編輯|steins來源|島津分析中心背景摘要:紫外可見分光光度計和熒光分光光度計都經(jīng)常用于樣品定量。使用紫外可見分光光度計進行定量時基于朗伯比爾定律，測定的吸收值一定范圍內(nèi)與樣品濃度成正比。另一方面，利用熒光分光光度計時，使用熒光強度。在低濃度時，熒光強度與濃度成正比，所以，可以用于定量。本次使用紫外可見分光光度計和熒光分光光度計兩臺儀器分別測定了羅丹明B溶液。羅丹明B是用于纖維和皮革的染色的熒光物質(zhì)。關(guān)于測定結(jié)果，對兩個機種的定量、檢測下限值和標準曲線的線性度進行了比較，下面將進行介紹。1紫外1羅丹明B溶液的吸光度測定使用了紫外可見分光光度計UV-260Oi測定樣品吸光度。測定條件如表1所示。將粉末狀的羅丹明B溶解在蒸餾水中，調(diào)配～5ug/ml的標準溶液。羅丹明B的標準溶液的吸光光譜如圖1所示，根據(jù)544nm的吸光度值創(chuàng)建的標準曲線如圖2和圖3所示。在圖2中，用～5ug/ml的6點和空白樣品（蒸餾水）創(chuàng)建，得到了線性度良好的標準曲線（相關(guān)系數(shù)的平方值是)。在圖3所示的低濃度區(qū)域中，噪聲的影響相對較大，導致線性較差。2熒光2羅丹明B溶液的熒光強度測定使用了熒光分光光度計RF-60O0測定了樣品熒光強度。測定條件如表2所示。紫外火焰光度計的光譜是帶狀光譜。上海f-100火焰光度計商家

兩束光合為一束。并交替通過入射狹縫進入單色器中，經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上，色散并通過出射狹縫之后，被濾光片濾除高級次光譜，再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測器的接收面上。探測器將上述交變的信號轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號，經(jīng)放大器進行電壓放大后，轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位，計算機處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。元析儀器紫外可見分光光度計二、紫外可見分光光度計和紅外分光光度計的概述不同：1、紫外分光光度計的概述：根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是比較大吸收波長λmax和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很***的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的比較大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。2、紅外分光光度計的概述：由光源發(fā)出的光，被分為能量均等對稱的兩束，一束為樣品光通過樣品，另一束為參考光作為基準。這兩束光通過樣品室進入光度計后，被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制，形成交變信號。三、紫外可見分光光度計和紅外分光光度計的應(yīng)用不同：1、紫外分光光度計的應(yīng)用：將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。海南元析火焰光度計銷售公司在測定時，紫外可見火焰光度計受到強電磁場干擾，應(yīng)去除無線電干擾環(huán)境后，再次測量。

分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個吸收峰的波長。由于儀器的制造和調(diào)整誤差，單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度，對波長準確度要求允許寬些。但是，當吸收峰寬度較小，而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直，此時波長準確度的影響就必須引起注意。很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準確性。

下面分光光度計使用中的那些事進行了總結(jié)，希望能對你有所幫助。分光光度計是用不連續(xù)的波長采樣反射物體或透射物體的一種測量儀器。由于不同物體分子的結(jié)構(gòu)不同，對不同波長光線的吸收能力也不同，因此，每種物體都具有特定的吸收光譜。能從含有各種波長的混合光中，將每一種單色光分離出來，并測量其強度的儀器叫做分光光度計。分光光度法是比色法的發(fā)展。比色法只限于在可見光區(qū)，分光光度法則可以擴展到紫外光區(qū)和紅外光區(qū)。。火焰光度法檢測技術(shù)是基于氫火焰燃燒原理，火焰能夠分解存在空氣中的任何有毒有害物質(zhì)。

雜散光是由于光學元件制造誤差以及光學和機械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光，隨著樣品濃度的增加，雜散光的影響也隨之增大，將給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱，雜散光的影響更不能忽視。因此，雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標。若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”點。然后再測量。指針式儀器在未接通電源時，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進行機械調(diào)零。保持紫外-可見火焰光度計的有效通風散熱。陜西大容量火焰光度計價格

紫外火焰光度計是測樣品中物質(zhì)吸收了光能量。上海f-100火焰光度計商家

試劑盒包含一個空白濾光片、三個檢查光度的濾光片和三個校正波長的濾光片。每個濾光片的吸光值是相對空白濾光片測定的。這個試劑盒不僅能讓用戶獲得測量準確性的信息，也能提供精確度的信息，包括平均值和變異系數(shù)。在測量準確性和精確度時，將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長時，測定三個測試濾光片在對應(yīng)波長(260nm、280nm和800nm)下的吸光度，以確定每個波長的變異系數(shù)。許多分光光度計，包括Eppendorf的所有儀器，都帶有一個特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶至少每周運行一次自檢，但自動自檢的頻率可根據(jù)需要進行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個部分。它通過測定現(xiàn)有波長的隨機誤差來校驗檢測器，通過檢查大能量、隨機誤差、基準傳感器的信號和光強度來校驗光源。它還通過測定紫外光譜范圍內(nèi)強度峰值位置的精確度來確定波長的系統(tǒng)及隨機誤差。遵照這些建議來維護分光光度計，那么在今后的使用過程中再也不用擔心測量結(jié)果有問題啦。上海f-100火焰光度計商家