羅丹明B的標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光光譜如圖4所示。短波長側(cè)的熒光被再次吸收，導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度變高的同時峰頂向長波長側(cè)變化。根據(jù)577nm的熒光強度值創(chuàng)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖5以及圖6所示。如圖5所示，在ug/ml(Abs）或更高的高濃度區(qū)域,標(biāo)準(zhǔn)曲線是彎曲的，但在圖6的低濃度區(qū)域，可獲得線性度良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。3比較結(jié)果、定量下限值來比較靈敏度與應(yīng)用報告，使用標(biāo)準(zhǔn)曲線和10次空白測定中計算得的標(biāo)準(zhǔn)偏差σ，計算出了定量下限值（10σ）和檢測下限值（3σ）。另外，采用了線性度較高的標(biāo)準(zhǔn)曲線。UV-2600i和RF-6000的定量下限值和檢測下限值如表3所示。從通過本實驗算出的定量下限值的比可知，RF-6000的靈敏度較高，是UV-2600i的400倍以上。即使對圖3和圖6的低濃度區(qū)域的標(biāo)準(zhǔn)曲線進行比較，圖6(RF-6000）的結(jié)果中得到了離散較小的標(biāo)準(zhǔn)曲線。與對未被樣品吸收的照射光進行檢測的吸光光度法不同，熒光光度法以零為標(biāo)準(zhǔn)檢測熒光，因此噪聲水平低，可得到較高的靈敏度。UV-2600i和RF-6000的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)的平方值與濃度范圍的關(guān)系如表4所示。另外，使用UV-2600i時，低于空白以外的定量下限值的點除外。即使在未達到UV-2600i的定量下限值的區(qū)域（0～)。上海光度計的型號種類。廣東光譜儀光度計操作

試劑盒包含一個空白濾光片、三個檢查光度的濾光片和三個校正波長的濾光片。每個濾光片的吸光值是相對空白濾光片測定的。這個試劑盒不僅能讓用戶獲得測量準(zhǔn)確性的信息，也能提供精確度的信息，包括平均值和變異系數(shù)。在測量準(zhǔn)確性和精確度時，將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長時，測定三個測試濾光片在對應(yīng)波長(260nm、280nm和800nm)下的吸光度，以確定每個波長的變異系數(shù)。**后，許多分光光度計，包括Eppendorf的所有儀器，都帶有一個特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶至少每周運行一次自檢，但自動自檢的頻率可根據(jù)需要進行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個部分。它通過測定現(xiàn)有波長的隨機誤差來校驗檢測器，通過檢查**大能量、隨機誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號和光強度來校驗光源。**后，它還通過測定紫外光譜范圍內(nèi)強度峰值位置的精確度來確定波長的系統(tǒng)及隨機誤差。遵照這些建議來維護分光光度計，那么在今后的使用過程中再也不用擔(dān)心測量結(jié)果有問題啦。（來源：互聯(lián)網(wǎng)整理）（圖片來源：Pixabay）上周看點2832萬大單！山一大公開采購成像分析系統(tǒng)等設(shè)備刷瓶子！實驗室新人的共同回憶……趣味科普丨??！廣東國產(chǎn)光度計推薦上海元析告訴您光度計的選擇方法。

在儀器改變測試波長和測試一段時間后可通過按0%鍵和100%/0A鍵對儀器進行調(diào)零和調(diào)滿度、吸光度。（5）顯示方式的選擇【相關(guān)實驗】鄰二氮菲吸光光度法測定鐵的含量報告實驗?zāi)康泥彾莆夤舛确y定鐵的含量；熟悉722N型分光光度計的原理和操作。實驗原理鄰二氮菲吸光光度法是測定鐵含量的常用方法。在PH為2~9的溶液中，F(xiàn)e2+的顯色劑鄰二氮菲形成穩(wěn)定的橘紅色絡(luò)合物，該絡(luò)合物在508nm波長處有**大吸收。為了消除Fe2+的副反應(yīng)及其他因素的影響，在微酸溶液進行，且用鹽酸羥胺將Fe3+還原為Fe2+。吸光光度法定量分析的依據(jù)是朗伯比爾定律A=?bc，當(dāng)液層厚度b一定時A=Kc，吸光光度法定量分析的方法有直接比較法和標(biāo)準(zhǔn)曲線法，這個實驗用標(biāo)準(zhǔn)曲線法。在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出試液中鐵的含量，按下式求出原始待測溶液中鐵的含量（ρ表示溶液中鐵的含量，mg/L）ρFe,原始待測溶液=ρFe,標(biāo)準(zhǔn)曲線查得×50/10實驗步驟1、取出容量瓶和移液管，用蒸餾水清洗容量瓶并用相應(yīng)的溶液潤洗移液管；2、在6個容量瓶中用刻度移液管分別加入,、、、、、，5mLHAc-NaAc緩沖溶液，1mL10%鹽酸羥胺溶液及，用水定容。將其分別對應(yīng)編號為1、2、3、4、5、6號。

分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個吸收峰的波長。由于儀器的制造和調(diào)整誤差，單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度，對波長準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是，當(dāng)吸收峰寬度較小，而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直，此時波長準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。選擇光度計的有哪些方法？

分光光度計是用不連續(xù)的波長采樣反射物體或透射物體的一種測量儀器。由于不同物體分子的結(jié)構(gòu)不同，對不同波長光線的吸收能力也不同，因此，每種物體都具有特定的吸收光譜。能從含有各種波長的混合光中，將每一種單色光分離出來，并測量其強度的儀器叫做分光光度計。分光光度法是比色法的發(fā)展。比色法只限于在可見光區(qū)，分光光度法則可以擴展到紫外光區(qū)和紅外光區(qū)。分光光度法則要求近于真正單色光，其光譜帶寬比較大不超過3－5nm，在紫外區(qū)可到1nm以下，來自棱鏡或光柵，具有較高的精度。歡迎致電上海元析咨詢光度計。福建分光光度計使用

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并交替通過入射狹縫進入單色器中，經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上，色散并通過出射狹縫之后，被濾光片濾除高級次光譜，再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測器的接收面上。探測器將上述交變的信號轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號，經(jīng)放大器進行電壓放大后，轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位，計算機處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。JC-HW30A雙光束紅外分光光度計二、紫外可見分光光度計和紅外分光光度計的概述不同：1、紫外分光光度計的概述：根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是比較大吸收波長λmax和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很***的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的比較大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。2、紅外分光光度計的概述：由光源發(fā)出的光，被分為能量均等對稱的兩束，一束為樣品光通過樣品，另一束為參考光作為基準(zhǔn)。這兩束光通過樣品室進入光度計后，被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制，形成交變信號。三、紫外可見分光光度計和紅外分光光度計的應(yīng)用不同：1、紫外分光光度計的應(yīng)用：將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)。廣東光譜儀光度計操作