掃描電鏡細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)冷凍割斷法 該方法簡(jiǎn)便，結(jié)構(gòu)清晰，已得到普遍應(yīng)用。其操作方法如下： 1) 取材和固定：為了使細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，不被過(guò)多的血細(xì)胞污染，可在取材前用灌注法沖洗。即先將動(dòng)物麻醉，經(jīng)腹主動(dòng)脈注入生理鹽水或低分子量的右,切開(kāi)下腔靜脈放血，至無(wú)血色為止。然后迅速取材，將樣品修成1mm×1mm×5mm大小，投入1%鋨酸溶液中固定1小時(shí)，用1/15M磷酸緩沖液(pH7.4)清洗兩次，每次10分鐘。 2) 二甲基亞砜浸泡：將樣品依次放入25%、50%二甲基亞砜溶液中，各浸泡30分鐘。 3) 割斷：用TF—1型冷凍割斷裝置進(jìn)行割斷。然后將割斷后的樣品放到50%二甲基亞砜中，等融化后再用1/15M磷酸緩沖液浸洗，每次10分鐘，換液5次。 4) 軟化及后固定：將樣品放入0.1%鋨酸中軟化，溫度20℃，時(shí)間48～72小時(shí)。然后用1%鋨酸固定1小時(shí)，雙蒸水浸洗1小時(shí)，換液幾次，需徹底清洗干凈。 5) 導(dǎo)電染色：將樣品放入2%丹寧酸中2小時(shí)(或過(guò)夜)，以雙蒸水清洗1小時(shí)，換液幾次。雙蒸水清洗1小時(shí)。 6) 脫水、干燥及鍍膜：按常規(guī)方法進(jìn)行。掃描電子顯微鏡、 或掃描電鏡，是強(qiáng)大的顯微鏡用電子來(lái)形成圖像。江西推薦的掃描電鏡哪家效果好

掃描電鏡進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察。在掃描電子顯微鏡中，成象的信息主要是電子信息。根據(jù)近代的電子工業(yè)技術(shù)水平，即使高速變化的電子信息，也能毫不困難的及時(shí)接收、處理和儲(chǔ)存，故可進(jìn)行一些動(dòng)態(tài)過(guò)程的觀察。如果在樣品室內(nèi)裝有加熱、冷卻、彎曲、拉伸和離子刻蝕等附件，則可以通過(guò)電視裝置，觀察相變、斷裂等動(dòng)態(tài)的變化過(guò)程。從試樣表面形貌獲得多方面資料。在掃描電子顯微鏡中，不*可以利用入射電子和試樣相互作用產(chǎn)生各種信息來(lái)成象，而且可以通過(guò)信號(hào)處理方法，獲得多種圖象的特殊顯示方法，還可以從試樣的表面形貌獲得多方面資料。因?yàn)閽呙桦娮酉蟛皇峭瑫r(shí)記錄的，它是分解為近百萬(wàn)個(gè)逐次依此記錄構(gòu)成的，因而使得掃描電子顯微鏡除了觀察表面形貌外，還能進(jìn)行成分和元素的分析，以及通過(guò)電子通道花樣進(jìn)行結(jié)晶學(xué)分析，選區(qū)尺寸可以從10μm到2μm。江蘇專業(yè)的掃描電鏡檢測(cè)掃描電子顯微鏡類型多樣, 不同類型的掃描電子顯微鏡存在性能上的差異。

生物樣品掃描電鏡常規(guī)掃描電鏡對(duì)樣品要求:必須是干燥的，不含水分或揮發(fā)性物質(zhì);具有一定機(jī)械強(qiáng)度,能耐受電子束轟擊；具有導(dǎo)電性，被激發(fā)時(shí)能夠產(chǎn)生足夠的二次電子。生物材料特點(diǎn):含水分多，質(zhì)地柔軟，機(jī)械強(qiáng)度小;組成元素的原子序數(shù)低，導(dǎo)電性差,激發(fā)后二次電子的產(chǎn)額較少。制樣的任務(wù):通過(guò)一系列處理,既要盡量地保存材料的固有形態(tài)，又要改良其物理性能，使其適合在電鏡下觀察成像。 電鏡是進(jìn)行材料表征時(shí)用到一種重要工具，幫助觀察材料的微觀形貌。然而，在觀察軟/濕生物材料時(shí)(離體組織，帶細(xì)胞材料等)，涉及到觀察樣品的固定、脫水、干燥、金屬濺射等步驟，處理復(fù)雜，耗時(shí)較長(zhǎng)。

掃描電鏡觀察生物試樣。因電子照射而發(fā)生試樣的損傷和污染程度很小。同其他方式的電子顯微鏡比較，因?yàn)橛^察時(shí)所用的電子探針電流?。ㄒ话慵s為10- 10～10- 12A）電子探針的束斑尺寸小（通常是5 nm到幾十納米），電子探針的能量也比較?。铀匐妷嚎梢孕〉? kV），而且不是固定一點(diǎn)照射試樣，而是以光柵狀掃描方式照射試樣，因此，由于電子照射而發(fā)生試樣的損傷和污染程度很小，這一點(diǎn)對(duì)觀察一些生物試樣特別重要。掃描式電子顯微鏡（SEM）中的電子束盡量聚焦在樣本的一小塊地方，然后一行一行地掃描樣本。入射的電子導(dǎo)致樣本表面散發(fā)出電子，顯微鏡觀察的是這些每個(gè)點(diǎn)散射出來(lái)的電子。由于這樣的顯微鏡中電子不必透射樣本，因此其電子加速的電壓不必非常高。場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡是一種比較簡(jiǎn)單的電子顯微鏡，它觀察樣本上因強(qiáng)電場(chǎng)導(dǎo)致的場(chǎng)發(fā)射所散發(fā)出來(lái)的電子。掃描電子顯微鏡觀測(cè)電疇是通過(guò)對(duì)樣品表面預(yù)先進(jìn)行化學(xué)腐蝕來(lái)實(shí)現(xiàn)的 。

掃描電鏡在材料學(xué)的應(yīng)用 掃描電鏡技術(shù)在材料學(xué)的應(yīng)用十分普遍，比如以下幾個(gè)方面： 1)用于高分子多相體系的形態(tài)結(jié)構(gòu)，界面狀況損傷性能預(yù)測(cè)等方面的研究； 2)用于研究高分子復(fù)合材料微觀形態(tài)； 3)用于分析磨料與金屬表面的相互作用過(guò)程； 4)用掃描電鏡及其動(dòng)態(tài)拉伸臺(tái)對(duì)高碳鋼中碳鋼進(jìn)行動(dòng)態(tài)拉伸試驗(yàn)，觀察高碳鋼、中碳鋼裂紋的萌生、擴(kuò)展及斷裂過(guò)程。掃描電鏡在物理學(xué)的應(yīng)用 在物理學(xué)中，掃描電鏡可用于觀測(cè)導(dǎo)電粉的粒徑分布、導(dǎo)電粉在導(dǎo)電點(diǎn)中的濃度和分析導(dǎo)電點(diǎn)缺陷，以提高液晶顯示器的產(chǎn)品質(zhì)量，用于也可觀測(cè)襯墊料的粒徑分布、 控制液晶顯示器的盒厚均勻程度、消除液晶顯示器的底色差異，所得圖像可為從事液晶顯示器研制的工程技術(shù)人員提供清的材料圖像，為排除襯墊料的不均勻因素所造 成的液晶屏的質(zhì)量問(wèn)題提供依據(jù)。掃描電鏡的圖象顯示在陰極射線管(顯像管)上，并由照相機(jī)拍照記錄。湖北專門(mén)做掃描電鏡

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由于掃描電子顯微鏡具有上述特點(diǎn)和功能，所以越來(lái)越受到科研人員的重視，用途日益普遍。掃描電子顯微鏡已普遍用于材料科學(xué)（金屬材料、非金屬材料、納米材料）、冶金、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、半導(dǎo)體材料與器件、地質(zhì)勘探、病蟲(chóng)害的防治、災(zāi)害（火災(zāi)、失效分析）鑒定、刑事偵察、寶石鑒定、工業(yè)生產(chǎn)中的產(chǎn)品質(zhì)量鑒定及生產(chǎn)工藝控制等。在電子掃描中，把電子束從左到右方向的掃描運(yùn)動(dòng)叫做行掃描或稱作水平掃描，把電子束從上到下方向的掃描運(yùn)動(dòng)叫做幀掃描或稱作垂直掃描。兩者的掃描速度完全不同，行掃描的速度比幀掃描的速度快，對(duì)于1000條線的掃描圖象來(lái)說(shuō)，速度比為1000。江西推薦的掃描電鏡哪家效果好

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