外泌體的提取、純化和鑒定：每一個外泌體研究者較初都要為外泌體的分離提取而煩惱。選擇的分離方式是利用超速離心的方式分離外泌體，并且可以選用梯度密度離心法得到純度更高的外泌體。另外利用外泌體自身的物理化學性質所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達到分離效果。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過形態(tài)學（電子顯微鏡技術）、粒子大小以及標志蛋白等方式實現(xiàn)的。近來的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用，如免疫中抗原呈遞、瘤子的生長與遷移、組織損傷的修復等。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標志物。外泌體具有脂質雙層膜結構，能比較好的保護其包被的物質，且能靶向特定細胞或組織，因此是一種比較好靶向給藥系統(tǒng)。腹水外泌體融合實驗外泌體的膜蛋白有可能與細胞膜蛋白作用，活躍細胞內通路。電子顯微鏡下外泌體大小不一，通常呈茶托樣的圓形或橢圓形。成都CD9外泌體慢病毒包裝

透射電子顯微鏡（TEM）和掃描電子顯微鏡（SEM）是用于評估外泌體形態(tài)、大小和表型的的兩種常見的電子顯微鏡。SEM和TEM均使用電子束產生高分辨率的亞微米顆粒放大圖像，以區(qū)分外泌體與殘留在樣品中相似大小的非外泌體顆粒，該方法還可用于檢查樣品的純度。TEM與SEM之間的區(qū)別在于檢測電子類別，在SEM中，電子與樣品中的粒子相互作用時會發(fā)生散射，捕獲并檢測散射的電子，從而生成粒子圖像。但是，在TEM中，不與粒子相互作用的電子穿過樣品，并使用熒光屏進行檢測。電子顯微鏡下外泌體大小不一，通常呈茶托樣的圓形或橢圓形。采用電子顯微鏡檢測外泌體時對樣品的預處理和制備要求較高，外泌體的提取方法和品質會對電鏡結果造成影響；另外樣品的準備階段比較復雜，不適合進行大量快速的測量；而且由于樣本經過了干燥、固定以及冷凍等預處理和制備過程，對生物樣本的結構會造成一定的破壞，從而影響觀察的效果，無法準確測量外泌體濃度。安徽植物外泌體鑒定磁珠免疫法分離的外泌體，生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗，難以普遍普及。成都CD9外泌體慢病毒包裝外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)。

外泌體的提取分離方法：1、PEG-base沉淀法：聚乙二醇可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀，早先應用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性），顆粒大小不均一，產生難以去除的聚合物，機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等，因此發(fā)表文章時易受質疑。2、試劑盒提?。航鼛啄陙?，市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒，有的是通過特殊設計的過濾器過濾掉雜質成分，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進行分離純化，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。

外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體，通過細胞內吞泡膜向內凹陷形成，其大小均一，直徑為40-100nm，密度為1.10-1.18g/mL。外泌體可由間充質干細胞、淋巴細胞和肉瘤細胞等多種類型細胞主動分泌釋放。外泌體內主要含有核酸、蛋白質和脂質等，可作為疾病診斷標記物、調控靶細胞功能、參與細胞生物學活動等。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質干細胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生；骨髓間充質干細胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調節(jié)成骨細胞分化促進大鼠顱骨缺損的骨再生。隨著外泌體研究的不斷深入，它的應用已經涉及醫(yī)學基礎和免疫領域、寄生蟲領域。

DLS使用由于粒子的布朗運動而產生的波動散射光的強度來估計外泌體顆粒的大小分布及其zeta電位。DLS樣品制備方便，只需要簡單的過濾，測量速度較快，需要的樣品體積較少。但由于動態(tài)光散射技術是基于光強測量，散射光的強度與粒徑的六次方成正比，使得當測量多種粒徑的混合懸浮液時，通常會偏向于檢測較大粒徑產生的散射光，比較難檢測到較小顆粒。所以DLS不適合對粒徑分布較寬的外泌體樣本的測量，只適合尺寸較為均一的外泌體樣本，并且無法測量樣品中外泌體的濃度。外泌體作為核酸的藥物遞送載體。外泌體膠原蛋白

外泌體可由間充質干細胞、淋巴細胞和腫細胞細胞等多種類型細胞主動分泌釋放。成都CD9外泌體慢病毒包裝

中國銷售產業(yè)憑借獨特資源和市場優(yōu)勢，一舉成為資本角逐的重點領域之一。從世界范圍來看，美、歐、日等發(fā)達地區(qū)的銷售產業(yè)發(fā)展歷史悠久，無論是銷售產品制造業(yè)還是銷售服務業(yè)，都處于全球優(yōu)先地位。如行家預判，生產型發(fā)展即將步入黃金時代，眾多企業(yè)圍繞醫(yī)藥產業(yè)、商業(yè)領域及新興的互聯(lián)網醫(yī)藥等領域正在進行廝殺。在我國政策的支持下，在社會資本的推動下以及技術升級的帶動下，互聯(lián)網巨頭、科技巨頭、地產巨頭等企業(yè)紛紛跨界進入生產型。監(jiān)管體系缺失，山東的疫苗事件中，體現(xiàn)出銷往24個省市的疫苗各方面監(jiān)管力度小。制藥企業(yè)和各大醫(yī)藥機構由不同部門管理，這種分段監(jiān)管方式存在很大的醫(yī)藥健康漏洞。除此之外，我國支付端仍是以醫(yī)保支付為主，外泌體提取試劑盒，外泌體，外泌體檢測，外泌體提取鏈的延伸以及消費醫(yī)藥市場價值的獲取也需要進一步探索解決的途徑。從外泌體提取試劑盒，外泌體，外泌體檢測，外泌體提取的健康發(fā)展來看依舊有待完善。成都CD9外泌體慢病毒包裝

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