被特定部位的細胞獲取的瘤子外泌體可為肉瘤的轉(zhuǎn)移準備轉(zhuǎn)移前微環(huán)境。用肺轉(zhuǎn)傾向的肉瘤細胞來源的外泌體處理小鼠后可使骨轉(zhuǎn)傾向的肉瘤細胞重新定向。外泌體的蛋白質(zhì)組學分析發(fā)現(xiàn)不同部位傾向性的肉瘤細胞來源的外泌體具有不同的整合素（integrin）表達譜，整合素α6β4和α6β1與肺轉(zhuǎn)有關，而整合素αvβ5與肝轉(zhuǎn)有關。敲低整合素α6β4和αvβ5可減少外泌體被靶部位細胞獲取，進而分別降低了肺和肝的轉(zhuǎn)移。進一步研究發(fā)現(xiàn)外泌體整合素被細胞獲取后活躍了Src的磷酸化和促炎的S100基因的表達。通過臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預測肉瘤轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標。磁珠免疫法分離的外泌體，生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗，難以普遍普及。外泌體提取試劑盒服務

外泌體研究背景：胞外囊泡是從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體，主要由微囊泡、凋亡小體、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm，密度1.10~1.18g/ml，可攜帶核酸、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等，存在于血液、唾液、尿液等多種體液中。越來越多的研究證實，外泌體可以通過細胞間轉(zhuǎn)移核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等特定物質(zhì)，發(fā)揮特殊的功能。如在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、腫細胞細胞發(fā)生了發(fā)展、神經(jīng)細胞信號轉(zhuǎn)導過程中都發(fā)揮著重要作用。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價和預后分析。超速離心外泌體 離心管外泌體存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。

細胞攝取診療性外泌體：從樹突狀細胞、成纖維細胞和間充質(zhì)細胞中分離出的診療性外泌體可對靶細胞產(chǎn)生特定的作用，包括新抗原呈遞、免疫調(diào)節(jié)和藥物有效載荷傳遞。診療性外泌體對靶細胞的影響可能是通過不同的進入或相互作用機制來控制的。完整的外泌體的進入可能包括受體介導的內(nèi)吞作用、網(wǎng)格蛋白包被小凹、脂筏、吞噬作用、小凹和大胞飲作用。外泌體內(nèi)容物的進入或外泌體信號的誘導可能涉及配體受體誘導的細胞內(nèi)信號或融合，從而將外泌體內(nèi)容物沉積到細胞質(zhì)中。近年來，隨著外泌體研究的不斷深入，它的應用已經(jīng)涉及醫(yī)學基礎和免疫領域、寄生蟲領域。

常規(guī)生物學實驗中，實時定量PCR技術（RT-PCR）普遍用于microRNA的檢測實踐中，但外泌體樣品中的microRNA豐度極低，普通RT-PCR技術的靈敏度已經(jīng)不能夠滿足。第三代微滴式數(shù)字PCR——ddPCR技術，成為外泌體microRNA檢測的選擇技術。微滴式數(shù)字PCR（DropletdigitalPCR），又成為“油包水PCR”，在傳統(tǒng)的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理，即將含有核酸分子的反應體系分成成千上萬個納升級的微滴，其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子，或者含有一個至數(shù)個待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴增后，逐個對每個微滴進行檢測，有熒光信號的微滴判讀為1，沒有熒光信號的微滴判讀為0，根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。外泌體是分泌的細胞外囊泡的主要群體，是具有生物活性的脂雙層囊泡。

為什么超速離心提取外泌體看不到沉淀？答：這種問題通常有三種可能性，其一：使用的細胞上清或者血清量太低，從而造成了這樣的結(jié)果。其二：使用了不透明的超速離心管，一般來說外泌體產(chǎn)量都比較小，所以凡是不透明的管子，基本都是比較難見到明顯沉淀的，可以當做有沉淀，然后操作下去即可。其三：使用了角轉(zhuǎn)。部分品牌離心機的角轉(zhuǎn)管壁粘附性比較低，超離結(jié)束沒多久沉淀就會滑落下去，所以請在離心結(jié)束時趕緊去收樣。外泌體的角色：1、外泌體發(fā)揮功能并一定需要受體細胞攝入外泌體：外泌體的膜蛋白有可能與細胞膜蛋白作用，活躍細胞內(nèi)通路。2、外泌體的角色之一：細胞-細胞通訊，比如抗原遞呈。外泌體產(chǎn)生于細胞中的多泡體。外泌體功能的影像

外泌體的膜同細胞一樣，是磷脂雙分子層。外泌體提取試劑盒服務

尺寸排阻色譜法（SEC）根據(jù)大小來分離樣本。該技術應用了一個裝有多孔聚合物珠的色譜柱，該聚合物珠包含多個孔和通道，分子根據(jù)其直徑穿過。半徑小的分子穿過柱子的孔遷移需要較長的時間，而大分子則較早地從柱子上洗脫下來。SEC可精確分離大分子和小分子。與離心分離方法相比，SEC分離的外泌體不受剪切力的影響，剪切力可能會改變囊泡的結(jié)構(gòu)。此方法分離到的外泌體純度較高，在電鏡下大小均一，但是獲取量少，所需設備特殊。此外，SEC方法與超濾相結(jié)合已被用于尿液來源的外泌體的分離和分析。外泌體提取試劑盒服務

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