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外泌體(Exosome)開始被認(rèn)為是毫無作用的“垃圾”,但隨著研究的不斷深入,人們發(fā)現(xiàn)事實(shí)并非如此,外泌體(Exosome)是具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞的微囊泡。外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤細(xì)胞的免疫耐受。瘤細(xì)胞來源的外泌體(Exosome)本身可作為瘤抗原,因此,瘤來源的外泌體(Exosome)既是一種抗原呈遞系統(tǒng),同時(shí)也是瘤排斥抗原的來源。瘤來源的外泌體(Exosome)能夠通過傳遞某些抑制信號(hào),在機(jī)體免疫應(yīng)答過程中起負(fù)性調(diào)節(jié)作用,誘導(dǎo)瘤細(xì)胞形成免疫耐受,從而逃避免疫細(xì)胞的殺傷。外泌體分離之后,需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。瑞黎菲外泌體
外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡,其主要來源于細(xì)胞內(nèi)多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)、熱休克蛋白家族(HSP60,HSP70和HSP90),本示蹤病毒使用CD9作為生物標(biāo)記,通過將CD9與熒光蛋白偶聯(lián),帶熒光的膜蛋白會(huì)在表達(dá)至外泌體膜上,便于后續(xù)進(jìn)行、觀察內(nèi)化或其他實(shí)驗(yàn)。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒、細(xì)胞系的輔助下,經(jīng)過病毒包裝成為有g(shù)anran力的病毒顆粒,通過ganran細(xì)胞或組織,實(shí)現(xiàn)外源基因在細(xì)胞或組織中表達(dá)。瑞黎菲外泌體對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價(jià)和預(yù)后分析。
外泌體研究背景:胞外囊泡是從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體,主要由微囊泡、凋亡小體、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡,直徑為30~150nm,密度1.10~1.18g/ml,可攜帶核酸、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等,存在于血液、唾液、尿液等多種體液中。越來越多的研究證實(shí),外泌體可以通過細(xì)胞間轉(zhuǎn)移核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等特定物質(zhì),發(fā)揮特殊的功能。如在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中、肉瘤細(xì)胞發(fā)生了發(fā)展、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價(jià)和預(yù)后分析。
外泌體調(diào)控毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞的機(jī)能,延長毛發(fā)根部的囊生長期,同時(shí)活化處于靜止期的毛發(fā)根部的囊,使其提前進(jìn)入新的生長周期,實(shí)現(xiàn)了毛發(fā)的再次生長。骨衰老小鼠注射外泌體試驗(yàn)證明:年輕血液中的外泌體同樣使衰老的組織重新煥發(fā)生機(jī)。來源于脂肪組織中的干細(xì)胞分泌一些信號(hào)分子和生長因子,可以促使控制毛發(fā)根部的囊生長周期的毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞進(jìn)行分化,向上遷移生成表皮細(xì)胞和皮脂腺,向下遷移生成毛母細(xì)胞。毛發(fā)根部的囊的生長周期決定毛發(fā)的生長周期,而毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞的機(jī)能決定了毛發(fā)根部的囊的活躍程度,外泌體靶向調(diào)控毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞的功能。外泌體分析會(huì)引起何種生理作用,這是進(jìn)一步研究的發(fā)展方向。
幾乎所有的細(xì)胞都可以在自發(fā)或在一定刺激條件下產(chǎn)生外泌體,不同的細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體具有不同的功能,這些外泌體參與了一系列生理和病理過程,如ai癥發(fā)生與發(fā)展、抗原呈遞、免疫調(diào)節(jié)、組織愈合等。來自血細(xì)胞(包括血小板、白細(xì)胞和紅細(xì)胞)的外泌體具有參與凝血、提供促血管生成因子、誘導(dǎo)血管生成等生理功能;妊娠期外泌體能夠影響局部血管生成、調(diào)節(jié)分化、激huo免疫、促進(jìn)胚胎發(fā)育;肝臟細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體有利于維護(hù)肝臟內(nèi)穩(wěn)態(tài)。由此可見,正常細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體對維持機(jī)體的正常生命活動(dòng)起重要作用。PS親和法提取的外泌體,其蛋白特異性檢測可高出10~100倍以上。外泌體自動(dòng)收集儀
有關(guān)外泌體分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究。瑞黎菲外泌體
外泌體作為細(xì)胞外囊泡的一個(gè)亞群,直徑集中于30~150nm。目前,基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法、尺寸排除色譜法、靜水過濾透析法和非對稱場流分離法等。超濾法利用不同孔徑的濾膜,對樣品進(jìn)行選擇性分離以獲得外泌體,一般分為壓力超濾和離心超濾。其中離心超濾效果更好,不jin能減輕力對外泌體的破壞,而且可通過增大離心力和延長離心時(shí)間提高外泌體產(chǎn)物濃度。但離心力過大或離心時(shí)間過長均有可能導(dǎo)致超濾膜或外泌體破裂。此外,超濾法可以和切向流過濾法、微控流法、超速離心法或凝膠過濾色譜法等方法結(jié)合進(jìn)一步提高分離效率。瑞黎菲外泌體
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