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做了外泌體注意事項

來源: 發(fā)布時間:2023-06-23

Exosome(外泌體)是由活細胞分泌小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu);參與細胞之間的交流,物質(zhì)的運輸以及正常生理過程的維持,此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān)。對分離的外泌體進行體外標記或示蹤,有助于對外泌體的功能進行進一步的研究。目前對于外泌體的標記方法有很多種,包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。相比于PKH-67,PKH-26具有更長的半衰期,標記在兔紅細胞上的PKH26半衰期長達100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長期的體內(nèi)細胞跟蹤研究。外泌體的直徑比微泡的要小,后者直徑為100nm-1μm。做了外泌體注意事項

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Pascucci等將包含有紫杉醇的間充質(zhì)細胞來源外泌體與胰腺ai細胞共培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)裝載紫杉醇的間充質(zhì)細胞外泌體具有很強的抗中流增殖效果。Tian等為降低免疫原性與毒性,采用小鼠未成熟樹突狀細胞所產(chǎn)生外泌體作為藥物載體。同時為實現(xiàn)外泌體運輸?shù)陌邢蛐?,使細胞表達能夠識別乳腺ai細胞的外泌體膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b,溶酶體相關(guān)膜蛋白2)。并采用電穿孔的方法,在純化所得的小鼠未成熟樹突狀細胞外泌體中載入阿霉素。結(jié)果表明該外泌體能夠特異性的將阿霉素傳遞給中流組織,抑制中流生長且無明顯毒性。血漿外泌體提取試劑盒生產(chǎn)廠家干細胞外泌體攝取流式細胞技術(shù)是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法。

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外泌體(Exosome),是細胞外囊泡(EV)的一種主要類型,是直徑為30至150nm的納米大小的膜結(jié)構(gòu),大多數(shù)細胞都會分泌外泌體。外泌體存在于各種生物體液中,通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)和代謝物等來發(fā)揮細胞間通訊功能,參與免疫應答、代謝和心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病以及病癥進展等多種生理和病理過程。在內(nèi)體轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒於嗄遗輧?nèi)體(MVE)的過程中,內(nèi)體膜向腔內(nèi)出芽形成腔內(nèi)囊泡(ILV),MVE與細胞膜融合釋放ILV到細胞外,即形成外泌體。

在外泌體中引入藥物的方式包括體內(nèi)裝載和體外裝載兩種。體內(nèi)藥物裝載可以通過傳統(tǒng)方法(如病毒轉(zhuǎn)染、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染或電穿孔等)轉(zhuǎn)染來源細胞,編碼感興趣的RNA或蛋白質(zhì),也可以使藥物與來源細胞共混,使細胞分泌產(chǎn)生含有目標生物分子的外泌體。體外藥物裝載則首先需要得到純化的外泌體,然后將感興趣的藥物通過電穿孔或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染等方法裝入純化的外泌體。外泌體內(nèi)可裝載的藥物包括小分子化學藥物、蛋白質(zhì)和多肽、核酸藥物、天然產(chǎn)物等。關(guān)于外泌體相關(guān)的實驗技術(shù),關(guān)于需要改進的課題存在很多。

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小鼠骨髓樹突狀細胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動特異性細胞毒性T淋巴細胞,根除或抑制小鼠中流的生長,這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外,樹突狀細胞來源的外泌體也能夠通過激huo其他免疫細胞誘導抗中流反應,從而抑制中流。B細胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復合物,能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細胞,從而實現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫響應的功能。細菌或病原體感ran的巨噬細胞外泌體能夠刺激巨噬細胞和中性粒細胞分泌炎性介質(zhì),在增強機體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用。外泌體作為蛋白質(zhì)的藥物遞送載體。做了外泌體注意事項

1983年,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn)。做了外泌體注意事項

瘤在生長過程中會不斷地將外泌體釋放到周圍環(huán)境中去,同時,外泌體能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更長時間,可以從患者的體液中分離外泌體用于早期臨床診斷。隨著技術(shù)的進步,已經(jīng)有生物公司嘗試涉足外泌體領(lǐng)域,外泌體中存在黑色素瘤標志物包括MIA、S100B和酪氨酸酶相關(guān)蛋白,且黑色素瘤患者胞外體中MIA和S100B濃度顯著高于健康人群和非黑色素瘤患者,通過檢測MIA和S100B表達水平對黑色素瘤的診治具有積極地參照作用。從本質(zhì)上說,液態(tài)活檢是分子診斷在樣本來源上的延伸,進一步豐富了檢測手段,而隨著外泌體的不斷揭秘,相信其會在液態(tài)活檢中發(fā)揮越來越重要的作用。做了外泌體注意事項

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