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外周血提取試劑盒

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-07-07

由于卵巢中流細(xì)胞質(zhì)膜上的磷脂酰絲氨酸(phosphati[1]dylserine,PS)可以外泌體形式分泌入血,惡性卵巢ai患者血漿外泌體中的PS水平明顯高于卵巢良xing病變患者和健康對照者,因此外泌體中的PS可用于協(xié)助早期卵巢惡性中流的篩查和診斷。外泌體可穿透血-腦脊液屏障的特點(diǎn)也為腦中流患者提供了早期診斷的重要工具。血漿微囊泡EGFRvIIImRNA已被證明可作為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者診斷的支持證據(jù)。2020年,DavidLyden和WilliamR.Jarnagin教授團(tuán)隊(duì)合作,通過探究來自不同ai種組織、血漿和其他體液的426個(gè)人類樣品中細(xì)胞外囊泡和顆粒(extracellularvesicleandparticle,EVP)的蛋白質(zhì)組學(xué)特征,鑒定出一批中流特異性血漿EVP蛋白(特異度和靈敏度分別為95%和90%),并可區(qū)分患者的中流類型,使基于外泌體的中流診斷和鑒別診斷向前邁進(jìn)了一步。外泌體被工程化改造后,具有靶向特定細(xì)胞類型或組織的功能。外周血提取試劑盒

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尺寸排除色譜法是使用聚合物凝膠或類似的固定相柱進(jìn)行外泌體分離的技術(shù),樣品以重力滴落的方式收集。流體力學(xué)半徑較小的樣品組分進(jìn)入凝膠孔隙后,需耗費(fèi)相對較長的時(shí)間通過凝膠柱,導(dǎo)致延遲洗脫,實(shí)現(xiàn)不同粒徑大小顆粒分離。尺寸排除色譜法可以與差速離心法結(jié)合而不會(huì)明顯損失外泌體,保證產(chǎn)量的同時(shí)可有效去除雜質(zhì)蛋白,更適合目標(biāo)蛋白質(zhì)組學(xué)和miRNA的分析。靜水過濾透析法主要利用靜水壓力迫使樣品中不同特定大小分子先后通過透析管,其中溶劑和小溶質(zhì)很容易通過透析管,而較大的顆粒,如外泌體和其他囊泡,仍留在透析管中而被收集。血漿血清提取試劑盒價(jià)錢外泌體可以通過多種方法給藥,靜脈內(nèi)給藥是較常用的途徑。

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為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息,可以通過電鏡、動(dòng)態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質(zhì)免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法、流式細(xì)胞儀等對外泌體進(jìn)行表征。通過電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息,不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同,得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如,在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中,外泌體呈現(xiàn)囊泡獨(dú)有的茶托形,可能由于樣品在固定或染色過程中極度脫水,導(dǎo)致外泌體塌陷所致。與之相反,在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形,由于不會(huì)脫水變性,所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實(shí)狀態(tài)。另外,由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率,也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。

細(xì)胞分泌外泌體的過程一般分為三個(gè)階段:(1)質(zhì)膜內(nèi)陷,形成早期內(nèi)吞小泡;(2)內(nèi)吞小泡向內(nèi)萌發(fā)成熟,形成多囊泡體;(3)多囊泡體與質(zhì)膜融合,并釋放出囊泡內(nèi)容物,形成外泌體。外泌體具有獨(dú)特的理化性質(zhì),其密度為1.13~1.19g/mL,由平均厚度小于5nm的雙層脂膜所包裹,具有典型杯狀形態(tài),呈現(xiàn)為扁平球形。外泌體表面富含多糖鏈,其質(zhì)膜主要由溶血磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、膽固醇、神經(jīng)酰胺和鞘磷脂構(gòu)成,另有與細(xì)胞來源相關(guān)的部分特殊脂類。外泌體可攜帶蛋白質(zhì)、核酸和脂質(zhì)等生物活性大分子,其中主要為蛋白質(zhì),且大部分蛋白為所有來源外泌體所共有,只有小部分與其來源有關(guān),為其分泌細(xì)胞的特有蛋白,能夠反映分泌細(xì)胞的類型和生理病理狀態(tài)。除此之外,外泌體可攜帶大量mRNA和miRNA等核酸,并將其運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞,發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)功能。外泌體的遺傳分子與肝臟病理息息相關(guān),在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點(diǎn)或分子標(biāo)志物。

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雖然外泌體作為藥物載體具有生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等潛在優(yōu)勢,但是外泌體在藥物遞送中的應(yīng)用研究才剛剛起步,尚有許多問題需解決:選擇何種細(xì)胞作為外泌體的供體:如DCs來源的外泌體可用于免疫治理,因其富含組織相容復(fù)合物(MHC)及T細(xì)胞共刺激分子,能在體內(nèi)喚醒T淋巴細(xì)胞,進(jìn)而抑制瘤細(xì)胞增殖;骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)來源的外泌體對KRAS基因有抑制作用;γδT細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(NK)、瘤細(xì)胞等均有研究報(bào)道可作為載藥級別外泌體的細(xì)胞來源。外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,從而活躍細(xì)胞內(nèi)的信號通路。方法外泌體提取

從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡。外周血提取試劑盒

目前,在各種健康與疾病模型中都發(fā)現(xiàn),外泌體通過分子信息傳遞扮演著重要的角色。外泌體還越來越多地被認(rèn)為是疾病的生物標(biāo)志物和預(yù)后因子,具有重要的臨床診斷和治理意義。除此之外,它們還有潛力被用于臨床,作為基因和藥物遞送的載體。健康人和多種疾病的患者會(huì)將含有不同RNA和蛋白質(zhì)成分的外泌體釋放到體液循環(huán)中,因其特殊性,外泌體可以作為生物標(biāo)志物來對疾病進(jìn)行檢測。例如,從血液或尿液中分離的外泌體可以用作病癥、心臟病的診斷和預(yù)后的指標(biāo)。外周血提取試劑盒

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