科學家也嘗試利用外泌體的壓制發(fā)病機制功能。例如,類風濕關節(jié)炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體,高濃度集聚誘導細胞死亡的TNF-α,可使類風濕關節(jié)炎惡化。通過上述介紹可以知道癥狀細胞來源的外泌體含有與癥狀進展相關的分子,神經細胞來源的外泌體含有與神經退行性疾病相關的分子,因此,通過壓制或去除這些外泌體,有希望壓制疾病發(fā)生。隨著今后的研究發(fā)展,外泌體功能逐步清晰,并擴大臨床應用,有望將外泌體應用在各種疾病醫(yī)治上。甚至可嘗試利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運輸?shù)侥繕思毎?。關于外泌體相關的實驗技術,關于需要改進的課題存在很多。血漿外泌體提取試劑盒原理
外泌體大小不均可能是由于MVB的限制膜不均勻內陷,導致流體和固體的總含量不同;細胞的微環(huán)境和固有的生物學特性可能會影響外顯體的含量及其生物學標記,如乳腺病細胞及其外泌體的蛋白質組可以顯示來源細胞是上皮樣細胞還是間充質樣細胞;由于細胞表面受體表達的不同,外泌體對受體細胞的影響可能不同,可能誘導細胞存活,也可能誘導凋亡,或誘導免疫調節(jié)等;異質性也可以基于外泌體起源的組織,包括它們是否來自病細胞,瘤細胞產生的外泌體傳遞致瘤miRNAs明顯促進瘤細胞增殖。成都外泌體示蹤外泌體觀察到它們可以在體內刺激免疫應答。
在外泌體中引入藥物的方式包括體內裝載和體外裝載兩種。體內藥物裝載可以通過傳統(tǒng)方法(如病毒轉染、脂質體轉染或電穿孔等)轉染來源細胞,編碼感興趣的RNA或蛋白質,也可以使藥物與來源細胞共混,使細胞分泌產生含有目標生物分子的外泌體。體外藥物裝載則首先需要得到純化的外泌體,然后將感興趣的藥物通過電穿孔或脂質體轉染等方法裝入純化的外泌體。外泌體內可裝載的藥物包括小分子化學藥物、蛋白質和多肽、核酸藥物、天然產物等。
血清中的miR-122和miR-145非常不穩(wěn)定,將血清在4°C短期保存期間即發(fā)生降解,這可能是由外泌體的異質性所導致的。–80°C保存被公認是保存各種生物標本如尿、牛奶、血液和支氣管肺泡灌洗液適宜的保存環(huán)境,雖然這樣保存血漿可能產生含有大量“污染物”的外泌體。4°C保存雖然容易導致外泌體中蛋白和核酸的損失,但卻能夠避免凍融過程造成的囊泡破壞。外泌體雖然建議保存于-80°C環(huán)境下,但在處理或運輸過程中有時很難維持這種低溫條件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一種凍干法以保存外泌體,在冷凍過程中使用海藻糖作為保護劑,海藻糖可以提供生物保護作用,如穩(wěn)定蛋白質、細胞膜和脂質體;減少冷凍過程中冰的形成;防止蛋白質以及外泌體的聚集;減少分離和保存過程中細胞外囊泡的損失等。有望將外泌體應用在各種疾病醫(yī)治上。
建立記錄各論文實驗條件的數(shù)據庫也可作為規(guī)避混亂的方法之一。一方面,隨著EV研究倍受世界矚目,各國啟動了大型研究項目。美國啟動NIH戰(zhàn)略性大型項目(ExtracellularRNACommunication),國際厲害性學會——Gordon和KeystoneSymposia也從2016開始成立會議小組。受到歐洲藥物研究開發(fā)公司“創(chuàng)新藥物倡議組織(IMI)”的支持推進的CANCER-ID項目,也包含EV研究在內。2017年日本選定了EV研究為文部科學省研究開發(fā)戰(zhàn)略的目標之一,期待會加速今后的研究發(fā)展。無論如何,今后EV研究的根本就是必須有強有力的研究方法和技術,而PS親和法有望成為其中之一。干細胞外泌體可以有效活化提高細胞能量加速細胞排毒、淡化色斑。山東血液外泌體
確認外泌體生理作用的單獨方法就是明確外泌體的釋放機制,通過促進或壓制釋放機制。血漿外泌體提取試劑盒原理
外泌體即細胞分泌的直徑約40-100nm的微小膜泡,多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。一開始被當做細胞排泄物,但是近幾年,研究發(fā)現(xiàn)外泌體可謂是小身體大作用。種瘤發(fā)生轉移后,如何靶向呈遞藥物一直是種瘤醫(yī)治中的一個巨大挑戰(zhàn)。發(fā)表于NanoLett的一項研究中,研究人員利用外泌體制備藥物的遞送系統(tǒng)(LD-MDS),并取得成功。在這項研究中,研究人員將相關藥物錨定在活巨噬細胞膜上,細胞自身相關蛋白酶響應開啟并將藥物轉載進入外泌體,順利遞送至肺轉移灶并且轉化為納米囊泡和次級納米囊泡,促進轉移性4T1病細胞的有效內化和細胞死亡。之后,受損的4T1病細胞可以釋放次級納米囊泡和游離藥物分子,再破壞鄰近的病細胞。研究顯示,LD-MDS對體內直徑小于100μm的肺轉移病灶顯示出優(yōu)異的靶向效率,并顯著壓制肺轉移。血漿外泌體提取試劑盒原理