外泌體作為細胞外囊泡的一個亞群,直徑集中于30~150nm。目前,基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法、尺寸排除色譜法、靜水過濾透析法和非對稱場流分離法等。超濾法利用不同孔徑的濾膜,對樣品進行選擇性分離以獲得外泌體,一般分為壓力超濾和離心超濾。其中離心超濾效果更好,不jin能減輕力對外泌體的破壞,而且可通過增大離心力和延長離心時間提高外泌體產(chǎn)物濃度。但離心力過大或離心時間過長均有可能導致超濾膜或外泌體破裂。此外,超濾法可以和切向流過濾法、微控流法、超速離心法或凝膠過濾色譜法等方法結合進一步提高分離效率。外泌體分析會引起何種生理作用，這是進一步研究的發(fā)展方向。細胞提取試劑盒方法

小鼠骨髓樹突狀細胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動特異性細胞毒性T淋巴細胞，根除或抑制小鼠中流的生長，這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外，樹突狀細胞來源的外泌體也能夠通過激huo其他免疫細胞誘導抗中流反應，從而抑制中流。B細胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復合物，能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細胞，從而實現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫響應的功能。細菌或病原體感ran的巨噬細胞外泌體能夠刺激巨噬細胞和中性粒細胞分泌炎性介質(zhì)，在增強機體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用。外泌體的研究進展日本和光著眼于巨噬細胞的外泌體受體Tim4蛋白，制備Tim4細胞外域與磁珠結合的“Tim4磁珠”。

外泌體是新型治理劑，惡性瘤細胞往往能夠通過分泌大量外泌體抑制宿主固有免疫。對外泌體的質(zhì)譜研究發(fā)現(xiàn)，惡性瘤細胞的外泌體含有大量活化型的表皮生長因子受體（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR），可以抑制宿主細胞α型干擾素(IFN-α)的產(chǎn)生。這就解釋了為什么部分瘤患者固有免疫低下，也為晚期病癥患者的治理提供一個新的策略和理論依據(jù)。除了瘤，外泌體在其他疾病如心血管疾病等的診斷和治理的相關臨床試驗也在世界范圍內(nèi)開展中。

外泌體是細胞間信息傳遞的重要“信使”,可通過三種方式介導細胞通訊:(1)外泌體以旁分泌的方式與靶細胞相互作用,通過受體–配體作用黏附到靶細胞表面,隨后被內(nèi)吞入靶細胞,或直接將內(nèi)容物釋放到靶細胞內(nèi),從而激huo靶細胞;(2)外泌體的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割,產(chǎn)生的片段可以與靶細胞的細胞表面受體結合,從而激huo靶細胞;(3)外泌體還可以與靶細胞直接接觸發(fā)生膜融合,導致外泌體中的蛋白和核酸非選擇性轉移到目標細胞,從而引起靶細胞的響應。通過介導細胞間的通訊,外泌體不jin能夠參與多種生理過程,比如消除胞內(nèi)陳舊分子、呈遞抗原、分化調(diào)節(jié)性T淋巴細胞或髓樣細胞以抑制免疫反應,而且還可以參與疾病形成的病理過程,如通過與受體細胞的相互作用傳播病原物質(zhì)、促進中流轉移過程中的血管生長和中流細胞遷移。從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體，在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。

雖然外泌體作為藥物載體具有生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等潛在優(yōu)勢，但是外泌體在藥物遞送中的應用研究才剛剛起步，尚有許多問題需解決：選擇何種細胞作為外泌體的供體：如DCs來源的外泌體可用于免疫治理，因其富含組織相容復合物（MHC）及T細胞共刺激分子，能在體內(nèi)喚醒T淋巴細胞，進而抑制瘤細胞增殖；骨髓來源的間充質(zhì)干細胞（MSCs）來源的外泌體對KRAS基因有抑制作用；γδT細胞、自然殺傷細胞（NK）、瘤細胞等均有研究報道可作為載藥級別外泌體的細胞來源。關于外泌體相關的實驗技術，關于需要改進的課題存在很多。高純度外泌體介紹

外泌體在體液中十分穩(wěn)定，同時外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會分解。細胞提取試劑盒方法

在免疫系統(tǒng)中，淋巴細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞、肥大細胞等均可以產(chǎn)生外泌體。研究表明免疫細胞來源的外泌體能夠明顯影響機體的免疫調(diào)節(jié)機制，包括調(diào)節(jié)抗原呈遞、免疫激huo、免疫監(jiān)督等。不同免疫細胞來源的外泌體功能不同，以樹突狀細胞(該細胞具有免疫刺激能力，是目前能夠激huo初始T細胞的抗原遞呈細胞)來源的外泌體為例，其外泌體的免疫刺激作用取決于來源細胞的成熟狀態(tài)。成熟的樹突狀細胞外泌體內(nèi)包含能夠直接激huoT細胞的MHCclassⅠ和MHCclassⅡ，共刺激分子如CD40、CD8、CD86和熱激蛋白，這些分子使樹突狀細胞來源的外泌體具有抗原呈遞、調(diào)節(jié)免疫響應的生物功能。細胞提取試劑盒方法