重組蛋白的細菌表達系統(tǒng)有各種各樣的載體和宿主菌可供選擇，大部分工程菌的增殖時間短,不僅便于快速評價實驗結(jié)果，而且降低了技術(shù)和設(shè)備無菌要求的嚴格性。無害大腸桿菌是腸道正常微生物群的一部分與生物體為共生關(guān)系，可以通過產(chǎn)生維生素K 2使機體受益，并防止病原菌在腸道增殖。大腸桿菌是用于重組蛋白生產(chǎn)的宿主菌,它不僅具有遺傳背景清楚、培養(yǎng)操作簡單、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導效率高、生長繁殖快、成本低廉,可以快速大規(guī)模地生產(chǎn)目的蛋白等優(yōu)點,而且其表達外源基因產(chǎn)物的水平遠高于其它基因表達系統(tǒng),表達的目的蛋白量甚至能超過細菌總蛋白量的30%，對小分子蛋白的生產(chǎn)具有極大的優(yōu)勢，因此大腸桿菌是目前應用多的重組蛋白質(zhì)表達系統(tǒng)。重組蛋白在多種細胞培養(yǎng)中的應用。普欣LIF重組蛋白

量化生產(chǎn)的重組蛋白種類有限，如果購買不到所需蛋白，則需要重組蛋白定制服務。對于特定的應用，使用正確的蛋白表達系統(tǒng)是實驗成功的因素。以義翹神州為例，義翹神州的重組蛋白表達服務，擁有多年的重組蛋白表達經(jīng)驗，提供從基因合成、載體構(gòu)建到蛋白表達及純化的一站式服務。擁有多種重組蛋白表達系統(tǒng)，包括原核生物蛋白表達系統(tǒng)、酵母蛋白表達系統(tǒng)、昆蟲細胞蛋白表達系統(tǒng)（桿狀病毒）、哺乳動物細胞蛋白表達系統(tǒng)。具備多種純化體系，為蛋白表達與純化方面提供多種選擇。自公司成立以來，已成功表達約6000 個毫克至克級的不同種屬的重組蛋白。每年1000個新蛋白的研制和生產(chǎn)能力以及快速解決研發(fā)和生產(chǎn)問題的能力。擁有近百個2L 到1000L 不同體積的發(fā)酵罐和超過30 種重組蛋白純化體系，可以滿足高通量及大規(guī)模的重組蛋白表達需求。PeproTechBMP-3重組蛋白怎么樣重組蛋白的保存和運輸條件。

哺乳動物蛋白表達系統(tǒng)在生產(chǎn)重組蛋白中的應用中，優(yōu)勢明顯。具體表現(xiàn)為以下方面，能實現(xiàn)翻譯后修飾及正確的蛋白折疊復性：哺乳動物為真核細胞，細胞器可以對蛋白正確折疊加工。表達水平高:載體可在哺乳動物細胞中高表達重組蛋白，表達量可高達1-3g/L。蛋白表達高效穩(wěn)定：高效啟動子控制，穩(wěn)定表達，并可以選擇多種表達，如瞬時表達、穩(wěn)定細胞株表達、營養(yǎng)缺陷型細胞株表達(DHFR/GS)、大規(guī)模懸浮細胞表達等。適合大規(guī)模蛋白表達:常用的哺乳動物表達宿主細胞（HEK293和CHO），使用懸浮細胞培養(yǎng)，可以在一個月內(nèi)可產(chǎn)生數(shù)克級蛋白。

不同表達系統(tǒng)所生成的重組蛋白間有何主要區(qū)別？以賽默飛為例，Thermo Fisher Scientific? 所提供的重組蛋白產(chǎn)品通常在大腸桿菌，昆蟲細胞或哺乳動物細胞等不同的表達系統(tǒng)中產(chǎn)生。不同表達系統(tǒng)之間產(chǎn)生的重組蛋白的主要差別在于這些蛋白所攜帶的翻譯后修飾，如糖基化修飾。在大腸桿菌中生成的重組蛋白未經(jīng)糖基化。在昆蟲細胞中產(chǎn)生的重組蛋白通常經(jīng)有部分糖基化，但不含半乳糖和唾液脫鹽酸，糖鏈也無復雜分支。在哺乳動物細胞中生成的重組蛋白會發(fā)生附帶完全的糖基化修飾。備注：Mimic? Sf9 昆蟲細胞（來源于sf9昆蟲細胞系，經(jīng)改造可穩(wěn)定表達多種哺乳動物糖基轉(zhuǎn)移酶）可產(chǎn)生用于表達帶末端唾液酸和半乳糖的復雜的N-糖鏈。重組蛋白是生物醫(yī)藥行業(yè)研發(fā)及生產(chǎn)中的關(guān)鍵生物試劑。

昆蟲細胞是多種重組蛋白的多功能表達宿主。其較強的折疊能力和較高的培養(yǎng)密度使其成為表達細胞內(nèi)復雜蛋白和病毒蛋白的理想選擇。2007年，由昆蟲細胞系以病毒樣顆粒(VLPs)的形式生產(chǎn)的病毒疫苗Cervarix被批準用于人類。除了在疫苗開發(fā)方面的潛力外，昆蟲細胞產(chǎn)生的高活性蛋白還應用于生物物理學和生物化學的各個學科，如結(jié)構(gòu)解釋、藥物設(shè)計、測定方法建立和診斷試劑開發(fā)等等。許多生物廠家利用昆蟲細胞進行重組蛋白產(chǎn)品開發(fā)和承包研究項目。重組蛋白大規(guī)模的瞬時表達是研究熱點。BMP-10重組蛋白定制

重組蛋白定制中的注意事項。普欣LIF重組蛋白

體外生產(chǎn)重組蛋白的表達系統(tǒng)中，哺乳動物細胞表達系統(tǒng)能夠為重組人源蛋白提供較接近于天然狀態(tài)的翻譯后修飾，在蛋白表達過程中會形成接近天然蛋白的蛋白質(zhì)折疊和聚合，具備活性蛋白所必須的空間結(jié)構(gòu)和修飾。哺乳動物細胞翻譯后再加工修飾產(chǎn)生的外源重組蛋白質(zhì)，在活性方面高于原核表達系統(tǒng)及酵母、昆蟲細胞等真核表達系統(tǒng)，更接近于天然蛋白質(zhì)。這些特性使得哺乳動物細胞表達系統(tǒng)在重組蛋白藥物，特別是重組單抗藥物的研發(fā)和生產(chǎn)中的具有極大的應用。普欣LIF重組蛋白

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