在細(xì)胞培養(yǎng)過程中常用的生長因子,細(xì)胞因子和趨化因子,許多科學(xué)家傾向使用進(jìn)口的重組蛋白,如R&D Systems,PeproTech,ProSpec,Gibco等。這就導(dǎo)致可選擇范圍變得很窄。想要增加重組蛋白可選種類,建議選擇國產(chǎn)重組蛋白。如進(jìn)口品牌賽默飛選擇與國產(chǎn)品牌義翹神州(Sino Biologcical)合作來拓展他們的重組蛋白套裝范圍,為用戶提供1500種左右的重組蛋白(Thermo Fisher Scientific與Sino Biological聯(lián)合品牌)。Sino重組蛋白主要有四大優(yōu)勢(shì):(1)包括粘附蛋白,細(xì)胞因子,趨化因子,生長因子,流感蛋白,蛋白酶,磷酸酶,轉(zhuǎn)錄因子,通道蛋白和受體在內(nèi)的多種選擇;(2)具有競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格;(3)為每一種蛋白產(chǎn)品提供更多種的包裝尺寸規(guī)格(4)大多數(shù)由哺乳動(dòng)物細(xì)胞所表達(dá),90%由人體細(xì)胞系表達(dá),這樣有助于就可確保蛋白產(chǎn)品具擁有正確的哺乳動(dòng)物翻譯后修飾。重組蛋白藥物主要有哪些?R&DSystemsIL-3重組蛋白怎么樣
不同細(xì)胞研究中添加的重組蛋白有所不同。人胚胎干(ES)細(xì)胞研究中的重組蛋白主要有,細(xì)胞培養(yǎng)用人重組actin A,bFGF,IGF-II等,細(xì)胞分化用BMP-4,EGF和HGF。間充質(zhì)干(MSC)細(xì)胞研究中的重組蛋白主要有,間充質(zhì)干(MSC)細(xì)胞培養(yǎng)和自我更新的生長因子:LIF,bFGF,EGF,HGF,PDGF和Wnt3,MSC分化的生長因子或細(xì)胞因子:BMP-2與TGF-β1。神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)研究中的重組蛋白主要有,重組EGF,重組bFGF,和重組VEGF,用于神經(jīng)干細(xì)胞的擴(kuò)增。此外,包括BDNF在內(nèi)的多幾種神經(jīng)營養(yǎng)因子例如BDNF,CNTF,和GDNF也可適用于相關(guān)研究。R&DSystemsCXCL1重組蛋白高純度、高活性、低內(nèi)毒素,高批次間一致性是選購重組蛋白的重點(diǎn)。
如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)周期長于一周,或配制的細(xì)胞因子或重組蛋白一次用不完,我們就需對(duì)細(xì)胞因子或重組蛋白進(jìn)行長期保存。千萬不能將重組蛋白凍干粉用推薦的溶液重懸后直接分裝凍存于-20℃至-80℃。塑料管壁對(duì)多數(shù)蛋白均有很好的吸附作用,也就是說溶液中的蛋白很容易粘附在管壁。直接分裝凍存,則溶液中的大部分細(xì)胞因子或重組蛋白均會(huì)粘附到管壁上,導(dǎo)致溶液中實(shí)際溶解的細(xì)胞因子或重組蛋白的濃度大為降低,表現(xiàn)為細(xì)胞因子或重組蛋白活性的下降。正確的方法是:將已重懸的細(xì)胞因子或蛋白用含載體蛋白,如0.1% BSA(牛血清白蛋白),10% FBS(胎牛血清),5% HSA(人血清白蛋白)的溶液將重懸液進(jìn)一步稀釋,然后分裝凍存于-20℃至-80℃,即常規(guī)冰箱的冷凍室或超低溫冰箱中。
哺乳動(dòng)物蛋白表達(dá)系統(tǒng)在生產(chǎn)重組蛋白中的應(yīng)用中,優(yōu)勢(shì)明顯。具體表現(xiàn)為以下方面,能實(shí)現(xiàn)翻譯后修飾及正確的蛋白折疊復(fù)性:哺乳動(dòng)物為真核細(xì)胞,細(xì)胞器可以對(duì)蛋白正確折疊加工。表達(dá)水平高:載體可在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中高表達(dá)重組蛋白,表達(dá)量可高達(dá)1-3g/L。蛋白表達(dá)高效穩(wěn)定:高效啟動(dòng)子控制,穩(wěn)定表達(dá),并可以選擇多種表達(dá),如瞬時(shí)表達(dá)、穩(wěn)定細(xì)胞株表達(dá)、營養(yǎng)缺陷型細(xì)胞株表達(dá)(DHFR/GS)、大規(guī)模懸浮細(xì)胞表達(dá)等。適合大規(guī)模蛋白表達(dá):常用的哺乳動(dòng)物表達(dá)宿主細(xì)胞(HEK293和CHO),使用懸浮細(xì)胞培養(yǎng),可以在一個(gè)月內(nèi)可產(chǎn)生數(shù)克級(jí)蛋白。如何長期保存重組蛋白?
蘇州近岸蛋白質(zhì)科技股份有限公司,成立于2004年,是一家專注于生物醫(yī)藥領(lǐng)域中重組蛋白質(zhì)技術(shù)與應(yīng)用研發(fā)的****。公司建立了蛋白質(zhì)研發(fā)、分子進(jìn)化、抗體開發(fā)技術(shù)平臺(tái)以及在診斷、疫苗、藥物等蛋白質(zhì)應(yīng)用領(lǐng)域的綜合技術(shù)平臺(tái),可實(shí)現(xiàn)從蛋白質(zhì)原料到應(yīng)用技術(shù)開發(fā)的全產(chǎn)業(yè)鏈的創(chuàng)新支持?;诠境錾闹亟M蛋白質(zhì)制備平臺(tái),novoprotein 研發(fā)生產(chǎn)的細(xì)胞因子、酶試劑產(chǎn)品憑借其優(yōu)良的品質(zhì)、高性價(jià)比贏得了海外細(xì)胞因子及生物試劑銷售商的認(rèn)可。已為十余個(gè)國家與地區(qū)的數(shù)千家企業(yè)與科研機(jī)構(gòu)提供可靠的產(chǎn)品與服務(wù),與國內(nèi)外生物藥、疫苗、體外診斷等企業(yè)建立了長期合作關(guān)系,并給廣大科研單位提供產(chǎn)品與服務(wù),公司產(chǎn)品及服務(wù)被上千篇SCI論文引用。重組蛋白生物科研試劑總體市場(chǎng)逐年遞增。大鼠IL-7重組蛋白定制
怎么才能讓重組蛋白保持良好的穩(wěn)定性和生物學(xué)活性呢?R&DSystemsIL-3重組蛋白怎么樣
不同表達(dá)系統(tǒng)所生成的重組蛋白間有何主要區(qū)別?以賽默飛為例,Thermo Fisher Scientific? 所提供的重組蛋白產(chǎn)品通常在大腸桿菌,昆蟲細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞等不同的表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生。不同表達(dá)系統(tǒng)之間產(chǎn)生的重組蛋白的主要差別在于這些蛋白所攜帶的翻譯后修飾,如糖基化修飾。在大腸桿菌中生成的重組蛋白未經(jīng)糖基化。在昆蟲細(xì)胞中產(chǎn)生的重組蛋白通常經(jīng)有部分糖基化,但不含半乳糖和唾液脫鹽酸,糖鏈也無復(fù)雜分支。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中生成的重組蛋白會(huì)發(fā)生附帶完全的糖基化修飾。備注:Mimic? Sf9 昆蟲細(xì)胞(來源于sf9昆蟲細(xì)胞系,經(jīng)改造可穩(wěn)定表達(dá)多種哺乳動(dòng)物糖基轉(zhuǎn)移酶)可產(chǎn)生用于表達(dá)帶末端唾液酸和半乳糖的復(fù)雜的N-糖鏈。R&DSystemsIL-3重組蛋白怎么樣
上海研助寶生物醫(yī)藥有限公司主營品牌有abcam,absin,RD,Miltenyi(美天旎,Invitrogen,GIBCO,ThermoFisher,Amresco,ROCHE,發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大,該公司貿(mào)易型的公司。公司致力于為客戶提供安全、質(zhì)量有保證的良好產(chǎn)品及服務(wù),是一家有限責(zé)任公司(自然)企業(yè)。公司擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),具有試劑,儀器,耗材,試劑盒等多項(xiàng)業(yè)務(wù)。研助寶以創(chuàng)造***產(chǎn)品及服務(wù)的理念,打造高指標(biāo)的服務(wù),引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。