重組蛋白是應(yīng)用了重組DNA或重組RNA技術(shù)而獲得的蛋白質(zhì)。用于體外生產(chǎn)重組蛋白的宿主細(xì)胞主要是細(xì)菌(枯草芽孢桿菌、大腸桿菌)、酵母、昆蟲細(xì)胞、哺乳動物細(xì)胞。 生產(chǎn)的蛋白在活性和應(yīng)用方法方面均有所不同。根據(jù)自身的下游運用選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng),提高表達(dá)成功率。重組蛋白已被廣泛應(yīng)用于蛋白結(jié)構(gòu)研究、免疫檢測試劑、重組蛋白藥物、診斷試劑開發(fā)、抗體藥物靶點、CAR-T細(xì)胞靶點、Fc受體、流感病毒蛋白和細(xì)胞因子等大多數(shù)熱門研究領(lǐng)域。重組蛋白藥物的發(fā)展動態(tài)。大鼠MMP-1重組蛋白
R&D Systems作為全球免疫學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)產(chǎn)品的生產(chǎn)商,1976年創(chuàng)立于美國明尼蘇達(dá)州,至今已為學(xué)術(shù)界服務(wù)近40年。其母公司Bio-Techne(原Techne公司)于1983年在美國NASDAQ上市。目前,R&D Systems擁有近30,000種產(chǎn)品,95%以上由自己研發(fā)生產(chǎn)。其產(chǎn)品包括重組蛋白、細(xì)胞因子、ELISA試劑盒、生長因子、趨化因子、抗體、Animal-Free?蛋白、Luminex 液相芯片、多因子檢測固相芯片、流式細(xì)胞分析與細(xì)胞篩選、干細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)等;覆蓋發(fā)育、糖生物、內(nèi)分泌、免疫、神經(jīng)學(xué)、蛋白酶、信號傳導(dǎo)等學(xué)科研究領(lǐng)域;且每年有近2,000種新產(chǎn)品不斷問世,以滿足不同科研工作者的研究需要。小鼠IL-1重組蛋白重組蛋白的生物學(xué)活性定義。
糖基化是指糖基轉(zhuǎn)移酶作用下將糖轉(zhuǎn)移至蛋白質(zhì),和蛋白質(zhì)上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質(zhì)經(jīng)過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調(diào)節(jié)蛋白質(zhì),幫助蛋白質(zhì)折疊功能作用。在大多數(shù)情況下,生長因子或細(xì)胞因子的糖基化作用不會直接影響該蛋白與受體之間的結(jié)合。所以在體外研究中,重組生長因子或細(xì)胞因子的生物活性不會受糖基化作用的過多影響。不過,糖基化蛋白通常對蛋白酶的降解更不敏感具耐受性,所以在體內(nèi)的半衰期比未經(jīng)無糖基化的同種蛋白更長。因此在體內(nèi)研究中,以選擇哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)或昆蟲表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的重組蛋白可能是比大腸桿菌中生產(chǎn)的同種重組蛋白效果更好的一個選擇要好。
蛋白的溶解性與很多因素有關(guān),其中比較重要的是pH值和離子強(qiáng)度。購買的重組蛋白按照說明上所標(biāo)明的溶解液來溶解。如果您所用的溶解液的pH值和離子強(qiáng)度與說明書中所標(biāo)明的不符,很多時候會造成細(xì)胞因子或重組蛋白不能完全溶解或者根本無法溶解,這樣所配得的細(xì)胞因子或重組蛋白必然活性不夠或喪失。重組蛋白溶解時一定要溶解到指定的濃度,高于或低于該濃度范圍,都可能會導(dǎo)致重組蛋白不穩(wěn)定,出現(xiàn)活性下降的現(xiàn)象。另外,重組蛋白在溶解時,一定不能用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩,以免出現(xiàn)蛋白鏈斷裂。重組蛋白的凍干粉是非常容易溶解的,一般用移液器的吸頭輕輕吹幾下,即可使細(xì)胞因子或重組蛋白完全溶解。比較熱門的重組蛋白主要為重組細(xì)胞因子。
蛋白質(zhì)是基因功能的執(zhí)行者,蛋白間相互作用構(gòu)成機(jī)體生命活動的基礎(chǔ)。當(dāng)體內(nèi)行使特定功能的蛋白發(fā)生變異或濃度異常時,都會導(dǎo)致疾病的發(fā)生。因此,理論上蛋白類藥物可用于任何發(fā)病機(jī)制清楚、病理學(xué)靶點明確的疾病。蛋白質(zhì)藥物,特別是重組蛋白、工程化抗體等生物技術(shù)藥物取得的良好療效及巨大的經(jīng)濟(jì)效益。重組蛋白藥物主要有多肽類、細(xì)胞因子、血漿蛋白因子、重組酶及融合蛋白等類別。中國重組蛋白藥物市場以仿制藥為主,重組人胰島素、重組干擾素、重組粒細(xì)胞集落刺激因子為市場份額多的重組蛋白藥物,發(fā)展前景廣闊。如何挑選 GMP級重組蛋白?大鼠MMP-1重組蛋白
進(jìn)口重組蛋白質(zhì)量好,能保證實驗結(jié)果。大鼠MMP-1重組蛋白
重組蛋白含與不含 CF 有什么區(qū)別?CF,是 Carrier Free 的意思。一般來說,為了對重組蛋白的結(jié)構(gòu)及活性進(jìn)行保護(hù),生產(chǎn)廠家會在蛋白產(chǎn)品中添加牛血清白蛋白(BSA)作為載體蛋白。但考慮到 BSA 會對某些實驗造成影響,廠家又研發(fā)出不含載體蛋白(BSA)的產(chǎn)品,即 Carrier Free 蛋白??蛻羧绾芜x擇呢?在用途上,一般情況下,我們建議使用含有 BSA 的重組蛋白用于細(xì)胞或組織培養(yǎng),或作為 ELISA 標(biāo)準(zhǔn)品。相對而言,當(dāng) BSA 可能會干擾實驗時,比如體內(nèi)實驗、蛋白標(biāo)記等,則推薦使用 CF 蛋白。另外,如果實驗平臺有特殊要求,也應(yīng)根據(jù)要求選擇不含 BSA 的蛋白。大鼠MMP-1重組蛋白
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