體外生產(chǎn)重組蛋白有多個(gè)表達(dá)系統(tǒng),重組蛋白的預(yù)期用途對(duì)于表達(dá)系統(tǒng)的選擇和決定其優(yōu)先次序是很重要的。對(duì)于某些應(yīng)用 (如功能解析或藥物篩選) 來說,保持蛋白的天然功能和特性是必需的; 但如果是當(dāng)成免疫原來使用則關(guān)系不大。其他需要實(shí)際考慮的因素包括蛋白質(zhì)產(chǎn)量、時(shí)間限制或生產(chǎn)成本。明確項(xiàng)目需求對(duì)于確保選擇合適的表達(dá)系統(tǒng)、克隆策略和所需產(chǎn)品的生產(chǎn)策略是至關(guān)重要的。實(shí)際上, 在缺少目標(biāo)蛋白質(zhì)或相似蛋白質(zhì)歷史表達(dá)數(shù)據(jù)的情況下,要預(yù)測(cè)某個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是非常困難的。通常的做法是使用數(shù)個(gè)表達(dá)系統(tǒng), 一開始使用簡(jiǎn)單的、性價(jià)比高的表達(dá)系統(tǒng),失敗后再使用更復(fù)雜的表達(dá)系統(tǒng)。重組蛋白大規(guī)模的瞬時(shí)表達(dá)是研究熱點(diǎn)。國(guó)產(chǎn)VEGF重組蛋白
重組蛋白含與不含 CF 有什么區(qū)別?CF,是 Carrier Free 的意思。一般來說,為了對(duì)重組蛋白的結(jié)構(gòu)及活性進(jìn)行保護(hù),生產(chǎn)廠家會(huì)在蛋白產(chǎn)品中添加牛血清白蛋白(BSA)作為載體蛋白。但考慮到 BSA 會(huì)對(duì)某些實(shí)驗(yàn)造成影響,廠家又研發(fā)出不含載體蛋白(BSA)的產(chǎn)品,即 Carrier Free 蛋白??蛻羧绾芜x擇呢?在用途上,一般情況下,我們建議使用含有 BSA 的重組蛋白用于細(xì)胞或組織培養(yǎng),或作為 ELISA 標(biāo)準(zhǔn)品。相對(duì)而言,當(dāng) BSA 可能會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)時(shí),比如體內(nèi)實(shí)驗(yàn)、蛋白標(biāo)記等,則推薦使用 CF 蛋白。另外,如果實(shí)驗(yàn)平臺(tái)有特殊要求,也應(yīng)根據(jù)要求選擇不含 BSA 的蛋白。無動(dòng)物源性重組蛋白怎么樣重組蛋白的生物學(xué)活性定義。
CHO細(xì)胞即:中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(Chinese Hamster Ovary),它是基因工程疫苗研究中具有代表性的哺乳動(dòng)物表達(dá)載體,是用來表達(dá)外源蛋白多也是成功的一類細(xì)胞。市場(chǎng)上超過70%的蛋白質(zhì)藥物選擇的制造細(xì)胞就是CHO細(xì)胞。CHO細(xì)胞可以在外源表達(dá)的蛋白質(zhì)上摻入復(fù)雜的聚糖,如N-連接聚糖。有助于蛋白質(zhì)的折疊和細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸。重組蛋白表達(dá)側(cè)重于大化每個(gè)分子中含有唾液酸的復(fù)雜聚糖的數(shù)量,CHO細(xì)胞糖基化之后,能增加對(duì)蛋白水解的抵抗力和延長(zhǎng)體內(nèi)血清半衰期,所以CHO細(xì)胞成為用作重組蛋白的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系。
昆蟲細(xì)胞是多種重組蛋白的多功能表達(dá)宿主。其較強(qiáng)的折疊能力和較高的培養(yǎng)密度使其成為表達(dá)細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜蛋白和病毒蛋白的理想選擇。2007年,由昆蟲細(xì)胞系以病毒樣顆粒(VLPs)的形式生產(chǎn)的病毒疫苗Cervarix被批準(zhǔn)用于人類。除了在疫苗開發(fā)方面的潛力外,昆蟲細(xì)胞產(chǎn)生的高活性蛋白還應(yīng)用于生物物理學(xué)和生物化學(xué)的各個(gè)學(xué)科,如結(jié)構(gòu)解釋、藥物設(shè)計(jì)、測(cè)定方法建立和診斷試劑開發(fā)等等。許多生物廠家利用昆蟲細(xì)胞進(jìn)行重組蛋白產(chǎn)品開發(fā)和承包研究項(xiàng)目。外企的重組蛋白藥物占據(jù)了全球?qū)⒔?0%的醫(yī)藥市場(chǎng)份額。
近年來,用于重組蛋白表達(dá)和純化的技術(shù)和產(chǎn)品迅速增長(zhǎng)。自從親和標(biāo)簽融合技術(shù)出現(xiàn)以來,多種多樣的短肽或蛋白親和標(biāo)簽極大地方便了外源表達(dá)重組蛋白的分離與蛋白質(zhì)復(fù)合體的純化,已成為蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域不可或缺的工具。多聚組氨酸標(biāo)簽(His-tag)是目前高通量蛋白純化普遍使用的親和標(biāo)簽,His 標(biāo)簽融合蛋白的固定化金屬離子親和層析(immobilized metal-ion affinity chromatography, IMAC)被作為主要的蛋白純化方法。從重組蛋白的表達(dá)優(yōu)化,到小量誘導(dǎo)純化,再到中試、大規(guī)模生產(chǎn)需要眾多繁瑣、大量的工作??焖?、可靠、高效的自動(dòng)化分離分析技術(shù)可極大地提高效率,降低時(shí)間、人員成本。重組蛋白的活性高低,是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。ProSpecBMP-7重組蛋白怎么樣
嚴(yán)格的質(zhì)量控制系統(tǒng), 才能保證重組蛋白產(chǎn)品的生物活化與一致性。國(guó)產(chǎn)VEGF重組蛋白
PeproTech Inc. 創(chuàng)立于1988年,始終致力于為生命科學(xué)研究開發(fā)重組蛋白及相關(guān)產(chǎn)品,如今已成為能提供多種高質(zhì)量細(xì)胞因子和重組蛋白,相應(yīng)的單克隆、多克隆和生物素標(biāo)記抗體,以及ELISA試劑盒的世界。PeproTech Inc.的產(chǎn)品涵蓋免疫調(diào)節(jié)蛋白、白介素、集落刺激因子、生長(zhǎng)因子、化學(xué)趨化因子、干擾素、脂聯(lián)素、成纖維生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、壞死因子、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素和防御素等諸多生命科學(xué)研究領(lǐng)域中重要的生物活性分子。為跟上當(dāng)今科研發(fā)展、滿足日益增長(zhǎng)的需求,PeproTech Inc.研制出無動(dòng)物成分的重組蛋白(animal-free recombinant proteins)。這些蛋白是利用專有的無動(dòng)物成分生產(chǎn)設(shè)施,在嚴(yán)格的無動(dòng)物成分條件下生產(chǎn)出來,因此痕量的動(dòng)物源性污染引發(fā)潛在問題的可能性被降至低,從而完全達(dá)到臨床前研究用標(biāo)準(zhǔn)。國(guó)產(chǎn)VEGF重組蛋白
上海研助寶生物醫(yī)藥有限公司致力于醫(yī)藥健康,是一家貿(mào)易型公司。公司業(yè)務(wù)分為試劑,儀器,耗材,試劑盒等,目前不斷進(jìn)行創(chuàng)新和服務(wù)改進(jìn),為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。公司秉持誠(chéng)信為本的經(jīng)營(yíng)理念,在醫(yī)藥健康深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),發(fā)揮人才優(yōu)勢(shì),打造醫(yī)藥健康良好品牌。研助寶立足于全國(guó)市場(chǎng),依托強(qiáng)大的研發(fā)實(shí)力,融合前沿的技術(shù)理念,飛快響應(yīng)客戶的變化需求。