不同細(xì)胞研究中添加的重組蛋白有所不同。人胚胎干（ES）細(xì)胞研究中的重組蛋白主要有，細(xì)胞培養(yǎng)用人重組actin A，bFGF，IGF-II等，細(xì)胞分化用BMP-4，EGF和HGF。間充質(zhì)干（MSC）細(xì)胞研究中的重組蛋白主要有，間充質(zhì)干（MSC）細(xì)胞培養(yǎng)和自我更新的生長因子：LIF，bFGF，EGF，HGF，PDGF和Wnt3，MSC分化的生長因子或細(xì)胞因子：BMP-2與TGF-β1。神經(jīng)干細(xì)胞（NSC）研究中的重組蛋白主要有，重組EGF，重組bFGF，和重組VEGF，用于神經(jīng)干細(xì)胞的擴(kuò)增。此外，包括BDNF在內(nèi)的多幾種神經(jīng)營養(yǎng)因子例如BDNF，CNTF，和GDNF也可適用于相關(guān)研究。怎么才能讓重組蛋白保持良好的穩(wěn)定性和生物學(xué)活性呢？無動物源性BDNF重組蛋白

重組人胰島素是上市的重組蛋白藥物，用于1型和2型糖尿病，經(jīng)過30多年的發(fā)展，目前胰島素已從一代動物源性胰島素發(fā)展到第四代長效胰島素類似物。目前重組蛋白藥物主要包含：1. 多肽類------重組人胰島素、胰島素類似物、重組人生長因子和重組人促卵泡成熟因子等。2. 細(xì)胞因子-----重組人促卵泡成熟因子、重組人干擾素α、β、γ、重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞刺激因子、重組人白細(xì)胞介素2、11、重組人表皮生長因子、重組人成纖維細(xì)胞生長因等。3. 重組酶----重組人尿激酶原、重組人α葡萄糖苷酶制劑等，以及其它如重組人骨形成蛋白2和重組水蛭素等多個細(xì)分領(lǐng)域。GMP級TNF-alpha重組蛋白進(jìn)口重組蛋白質(zhì)量好，能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

如果說明書上沒有具體的說明，如何重溶（Reconstitute）凍干的重組蛋白？我們建議采用以下方式：（1）將試劑瓶和重溶緩沖液平衡至室溫。（2）短暫離心試劑瓶以確保在小瓶底部收集所有凍干物。（3）加入推薦的重溶緩沖液，達(dá)到產(chǎn)品說明上推薦的濃度。避免劇烈振蕩或移液器吹打，這可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性。（4）使試劑瓶在室溫下重溶15-30分鐘，可使用360度搖床或手動輕輕上下顛倒。（5）每管體積不小于10μL分裝，并按產(chǎn)品說明書上的指示儲存。（6）如果小瓶內(nèi)呈現(xiàn)薄片或顆粒，則在室溫下將產(chǎn)品混合幾小時，然后在4℃過夜。

重組蛋白的活性低是讓科研工作者十分頭疼的難題，買來的重組蛋白活性低怎么辦？除了重組蛋白自身存在質(zhì)量問題外，它可能只是需要一個“搭檔”。在某些重組蛋白在使用時，需要加入交聯(lián)抗體，進(jìn)行交聯(lián)（Cross-linking）反應(yīng)后才能表現(xiàn)出高活性，發(fā)揮出功能。其原理是，交聯(lián)反應(yīng)能夠?qū)⒅亟M蛋白的受體相互拉近，因?yàn)槊總€標(biāo)簽抗體含有兩個抗原結(jié)合臂，從而能夠使兩個含標(biāo)簽蛋白 - 受體復(fù)合物拉近，進(jìn)而指數(shù)級放大下游信號，提升刺激的效率（表現(xiàn)為更低的 ED50 值）。眾所周知，在同一實(shí)驗(yàn)中 ED50 越低表明著活性越高。進(jìn)口重組蛋白品牌有哪些？

哺乳動物蛋白表達(dá)系統(tǒng)在生產(chǎn)重組蛋白中的應(yīng)用中，優(yōu)勢明顯。具體表現(xiàn)為以下方面，能實(shí)現(xiàn)翻譯后修飾及正確的蛋白折疊復(fù)性：哺乳動物為真核細(xì)胞，細(xì)胞器可以對蛋白正確折疊加工。表達(dá)水平高:載體可在哺乳動物細(xì)胞中高表達(dá)重組蛋白，表達(dá)量可高達(dá)1-3g/L。蛋白表達(dá)高效穩(wěn)定：高效啟動子控制，穩(wěn)定表達(dá)，并可以選擇多種表達(dá)，如瞬時表達(dá)、穩(wěn)定細(xì)胞株表達(dá)、營養(yǎng)缺陷型細(xì)胞株表達(dá)(DHFR/GS)、大規(guī)模懸浮細(xì)胞表達(dá)等。適合大規(guī)模蛋白表達(dá):常用的哺乳動物表達(dá)宿主細(xì)胞（HEK293和CHO），使用懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，可以在一個月內(nèi)可產(chǎn)生數(shù)克級蛋白。重組蛋白定制中的注意事項(xiàng)。普欣TGF-beta 1重組蛋白

選擇高品質(zhì)重組蛋白和生長因子。無動物源性BDNF重組蛋白

在科研實(shí)驗(yàn)中，重組蛋白的生物學(xué)活性通常以ED50來表示。在大多數(shù)情況下，研究人員一般基于各類指示性細(xì)胞——如某些原代細(xì)胞或細(xì)胞系——來開展生物分析。常用的生物分析法包括細(xì)胞增殖分析，細(xì)胞趨化性分析，細(xì)胞因子生成分析和細(xì)胞毒性分析。通常以ED50來表示某一細(xì)胞因子的生物活性，該值表示能夠誘發(fā)50%大效應(yīng)的細(xì)胞因子濃度。這一表示效價的方法適用于那些劑量效應(yīng)曲線為S形的細(xì)胞因子。ED50被定義為處于max反應(yīng)50%水平的細(xì)胞因子濃度。這一表示現(xiàn)效價的方法適用于那些劑量效應(yīng)曲線為S形的細(xì)胞因子。將ng/mL單位的ED50活性值（注意：如當(dāng)前為pg/mL，請先換算為ng/mL）轉(zhuǎn)換為（注意：如需當(dāng)前單位為pg/mL，請先換算為ng/mL）單位/毫克（unit/mg）特定活性值的公式為（當(dāng)ED50表示為處于一個范圍區(qū)間時，選擇此范圍的中點(diǎn)值）：1 x 10E6/ED50* (ng/mL) = 以單位/毫克（Units/mg蛋白）表示為單位的特定蛋白特定活性。無動物源性BDNF重組蛋白

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