由于重組蛋白通常在不同的表達(dá)系統(tǒng)中生產(chǎn),容易受到各種因素的影響進(jìn)而引起蛋白質(zhì)的性質(zhì)出現(xiàn)差異,因此為了保證獲得高質(zhì)量,穩(wěn)定的結(jié)果,在藥物分析、新藥研發(fā)、細(xì)胞 therapy等應(yīng)用中優(yōu)先選擇GMP(Good Manufacturing Practice, 良好生產(chǎn)規(guī)范)級(jí)重組蛋白。GMP要求企業(yè)從原料、人員、設(shè)施設(shè)備、生產(chǎn)過(guò)程、包裝運(yùn)輸和質(zhì)量控制等方面達(dá)到法規(guī)相關(guān)要求,形成一套可操作的作業(yè)規(guī)范。GMP級(jí)重組蛋白具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn):詳實(shí)的產(chǎn)品信息;嚴(yán)格的質(zhì)量管理體系;批次間穩(wěn)定性高;無(wú)外源動(dòng)物源性。重組蛋白干粉如何重溶?大鼠BMP-8重組蛋白
如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)于一周,或配制的細(xì)胞因子或重組蛋白一次用不完,我們就需對(duì)細(xì)胞因子或重組蛋白進(jìn)行長(zhǎng)期保存。千萬(wàn)不能將重組蛋白凍干粉用推薦的溶液重懸后直接分裝凍存于-20℃至-80℃。塑料管壁對(duì)多數(shù)蛋白均有很好的吸附作用,也就是說(shuō)溶液中的蛋白很容易粘附在管壁。直接分裝凍存,則溶液中的大部分細(xì)胞因子或重組蛋白均會(huì)粘附到管壁上,導(dǎo)致溶液中實(shí)際溶解的細(xì)胞因子或重組蛋白的濃度大為降低,表現(xiàn)為細(xì)胞因子或重組蛋白活性的下降。正確的方法是:將已重懸的細(xì)胞因子或蛋白用含載體蛋白,如0.1% BSA(牛血清白蛋白),10% FBS(胎牛血清),5% HSA(人血清白蛋白)的溶液將重懸液進(jìn)一步稀釋,然后分裝凍存于-20℃至-80℃,即常規(guī)冰箱的冷凍室或超低溫冰箱中。人IL-2重組蛋白45.蘇州近岸蛋白專注生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的重組蛋白質(zhì)。
不同表達(dá)系統(tǒng)所生成的重組蛋白間有何主要區(qū)別?以賽默飛為例,Thermo Fisher Scientific? 所提供的重組蛋白產(chǎn)品通常在大腸桿菌,昆蟲(chóng)細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞等不同的表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生。不同表達(dá)系統(tǒng)之間產(chǎn)生的重組蛋白的主要差別在于這些蛋白所攜帶的翻譯后修飾,如糖基化修飾。在大腸桿菌中生成的重組蛋白未經(jīng)糖基化。在昆蟲(chóng)細(xì)胞中產(chǎn)生的重組蛋白通常經(jīng)有部分糖基化,但不含半乳糖和唾液脫鹽酸,糖鏈也無(wú)復(fù)雜分支。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中生成的重組蛋白會(huì)發(fā)生附帶完全的糖基化修飾。備注:Mimic? Sf9 昆蟲(chóng)細(xì)胞(來(lái)源于sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞系,經(jīng)改造可穩(wěn)定表達(dá)多種哺乳動(dòng)物糖基轉(zhuǎn)移酶)可產(chǎn)生用于表達(dá)帶末端唾液酸和半乳糖的復(fù)雜的N-糖鏈。
在中國(guó),根據(jù)Frost & Sullivan、中商產(chǎn)業(yè)研究院整理數(shù)據(jù)表明,重組蛋白生物科研試劑總體市場(chǎng)從2016年的5億元增長(zhǎng)到2021年的12億元,預(yù)計(jì)2022年市場(chǎng)規(guī)模將達(dá)到14億元。由于行業(yè)特性,生物研發(fā)企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)對(duì)重組蛋白和抗體的需求種類很多,一方面要求重組蛋白具備接近天然蛋白活性和修飾的特點(diǎn),另一方面又對(duì)供貨時(shí)間和能力具有較高的要求。為滿足客戶需求,重組蛋白生物科研試劑的供應(yīng)商需要建立相應(yīng)的試劑研發(fā)生產(chǎn)技術(shù)平臺(tái)和質(zhì)量控制技術(shù)平臺(tái),有合格的高技術(shù)人才儲(chǔ)備,還要具備較強(qiáng)的資金實(shí)力。重組蛋白的表達(dá)系統(tǒng)有多種。
北京義翹神州科技股份有限公司作為國(guó)家高新技術(shù)企業(yè),主要從事生物試劑研發(fā)、生產(chǎn)、銷售并提供技術(shù)服務(wù)的生物科技公司,主要業(yè)務(wù)包括重組蛋白、抗體、基因和培養(yǎng)基等產(chǎn)品,以及重組蛋白、抗體的開(kāi)發(fā)和生物分析檢測(cè)等服務(wù),同時(shí)也為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供單克隆抗體候選藥物的臨床前規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)。義翹神州擁有多項(xiàng)先進(jìn)的技術(shù)以及從研發(fā)生產(chǎn)到放大生產(chǎn)的技術(shù)平臺(tái),為重組蛋白或者抗體試劑的高通量、高效率研發(fā)生產(chǎn)提供保障,旨在為全球制藥企業(yè)和生命科學(xué)研究機(jī)構(gòu)提供高質(zhì)量的生物試劑產(chǎn)品和高水平的技術(shù)服務(wù)。中國(guó)的重組蛋白藥物市場(chǎng),前景廣闊。人IL-2重組蛋白
重組蛋白的有效期限是多長(zhǎng)?大鼠BMP-8重組蛋白
在科研實(shí)驗(yàn)中,重組蛋白的生物學(xué)活性通常以ED50來(lái)表示。在大多數(shù)情況下,研究人員一般基于各類指示性細(xì)胞——如某些原代細(xì)胞或細(xì)胞系——來(lái)開(kāi)展生物分析。常用的生物分析法包括細(xì)胞增殖分析,細(xì)胞趨化性分析,細(xì)胞因子生成分析和細(xì)胞毒性分析。通常以ED50來(lái)表示某一細(xì)胞因子的生物活性,該值表示能夠誘發(fā)50%大效應(yīng)的細(xì)胞因子濃度。這一表示效價(jià)的方法適用于那些劑量效應(yīng)曲線為S形的細(xì)胞因子。ED50被定義為處于max反應(yīng)50%水平的細(xì)胞因子濃度。這一表示現(xiàn)效價(jià)的方法適用于那些劑量效應(yīng)曲線為S形的細(xì)胞因子。將ng/mL單位的ED50活性值(注意:如當(dāng)前為pg/mL,請(qǐng)先換算為ng/mL)轉(zhuǎn)換為(注意:如需當(dāng)前單位為pg/mL,請(qǐng)先換算為ng/mL)單位/毫克(unit/mg)特定活性值的公式為(當(dāng)ED50表示為處于一個(gè)范圍區(qū)間時(shí),選擇此范圍的中點(diǎn)值):1 x 10E6/ED50* (ng/mL) = 以單位/毫克(Units/mg蛋白)表示為單位的特定蛋白特定活性。大鼠BMP-8重組蛋白
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