量化生產(chǎn)的重組蛋白種類有限,如果購買不到所需蛋白,則需要重組蛋白定制服務(wù)。對于特定的應(yīng)用,使用正確的蛋白表達系統(tǒng)是實驗成功的因素。以義翹神州為例,義翹神州的重組蛋白表達服務(wù),擁有多年的重組蛋白表達經(jīng)驗,提供從基因合成、載體構(gòu)建到蛋白表達及純化的一站式服務(wù)。擁有多種重組蛋白表達系統(tǒng),包括原核生物蛋白表達系統(tǒng)、酵母蛋白表達系統(tǒng)、昆蟲細(xì)胞蛋白表達系統(tǒng)(桿狀病毒)、哺乳動物細(xì)胞蛋白表達系統(tǒng)。具備多種純化體系,為蛋白表達與純化方面提供多種選擇。自公司成立以來,已成功表達約6000 個毫克至克級的不同種屬的重組蛋白。每年1000個新蛋白的研制和生產(chǎn)能力以及快速解決研發(fā)和生產(chǎn)問題的能力。擁有近百個2L 到1000L 不同體積的發(fā)酵罐和超過30 種重組蛋白純化體系,可以滿足高通量及大規(guī)模的重組蛋白表達需求。重組蛋白的表達與純化方法。普欣重組蛋白代理
不同表達系統(tǒng)所生成的重組蛋白間有何主要區(qū)別?以賽默飛為例,Thermo Fisher Scientific? 所提供的重組蛋白產(chǎn)品通常在大腸桿菌,昆蟲細(xì)胞或哺乳動物細(xì)胞等不同的表達系統(tǒng)中產(chǎn)生。不同表達系統(tǒng)之間產(chǎn)生的重組蛋白的主要差別在于這些蛋白所攜帶的翻譯后修飾,如糖基化修飾。在大腸桿菌中生成的重組蛋白未經(jīng)糖基化。在昆蟲細(xì)胞中產(chǎn)生的重組蛋白通常經(jīng)有部分糖基化,但不含半乳糖和唾液脫鹽酸,糖鏈也無復(fù)雜分支。在哺乳動物細(xì)胞中生成的重組蛋白會發(fā)生附帶完全的糖基化修飾。備注:Mimic? Sf9 昆蟲細(xì)胞(來源于sf9昆蟲細(xì)胞系,經(jīng)改造可穩(wěn)定表達多種哺乳動物糖基轉(zhuǎn)移酶)可產(chǎn)生用于表達帶末端唾液酸和半乳糖的復(fù)雜的N-糖鏈。義翹神州BMP-5重組蛋白怎么樣進口重組蛋白品牌有哪些?
如果說明書上沒有具體的說明,如何重溶(Reconstitute)凍干的重組蛋白?我們建議采用以下方式:(1)將試劑瓶和重溶緩沖液平衡至室溫。(2)短暫離心試劑瓶以確保在小瓶底部收集所有凍干物。(3)加入推薦的重溶緩沖液,達到產(chǎn)品說明上推薦的濃度。避免劇烈振蕩或移液器吹打,這可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性。(4)使試劑瓶在室溫下重溶15-30分鐘,可使用360度搖床或手動輕輕上下顛倒。(5)每管體積不小于10μL分裝,并按產(chǎn)品說明書上的指示儲存。(6)如果小瓶內(nèi)呈現(xiàn)薄片或顆粒,則在室溫下將產(chǎn)品混合幾小時,然后在4℃過夜。
目前有超過180種重組蛋白藥物被用作藥物。重組蛋白藥物是為急需新療法的患者服務(wù)的一類重要藥物。在許多疾病領(lǐng)域有**性的選擇,重組蛋白藥物現(xiàn)在是整個保健行業(yè)的一個重要組成部分。近一半的重組蛋白藥物為單克隆抗體,其余可按功能細(xì)分如下: 替換缺失或有缺陷的蛋白質(zhì);增加已經(jīng)存在的蛋白質(zhì)數(shù)量;抑制病原體,如細(xì)菌或病毒;其他分子的載體(大部分仍在開發(fā)中)。我國重組蛋白藥物目前共有20多家企業(yè)已上市 ,包括長春金賽、通化東寶、三生制藥、甘李藥業(yè)、恒瑞醫(yī)藥、安科生物等。選擇合適的重組蛋白表達系統(tǒng),至關(guān)重要。
重組蛋白含與不含 CF 有什么區(qū)別?CF,是 Carrier Free 的意思。一般來說,為了對重組蛋白的結(jié)構(gòu)及活性進行保護,生產(chǎn)廠家會在蛋白產(chǎn)品中添加牛血清白蛋白(BSA)作為載體蛋白。但考慮到 BSA 會對某些實驗造成影響,廠家又研發(fā)出不含載體蛋白(BSA)的產(chǎn)品,即 Carrier Free 蛋白。客戶如何選擇呢?在用途上,一般情況下,我們建議使用含有 BSA 的重組蛋白用于細(xì)胞或組織培養(yǎng),或作為 ELISA 標(biāo)準(zhǔn)品。相對而言,當(dāng) BSA 可能會干擾實驗時,比如體內(nèi)實驗、蛋白標(biāo)記等,則推薦使用 CF 蛋白。另外,如果實驗平臺有特殊要求,也應(yīng)根據(jù)要求選擇不含 BSA 的蛋白。什么是重組蛋白?如何產(chǎn)生?大鼠CXCL1重組蛋白
45.蘇州近岸蛋白專注生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的重組蛋白質(zhì)。普欣重組蛋白代理
重組蛋白的細(xì)菌表達系統(tǒng)有各種各樣的載體和宿主菌可供選擇,大部分工程菌的增殖時間短,不僅便于快速評價實驗結(jié)果,而且降低了技術(shù)和設(shè)備無菌要求的嚴(yán)格性。無害大腸桿菌是腸道正常微生物群的一部分與生物體為共生關(guān)系,可以通過產(chǎn)生維生素K 2使機體受益,并防止病原菌在腸道增殖。大腸桿菌是用于重組蛋白生產(chǎn)的宿主菌,它不僅具有遺傳背景清楚、培養(yǎng)操作簡單、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高、生長繁殖快、成本低廉,可以快速大規(guī)模地生產(chǎn)目的蛋白等優(yōu)點,而且其表達外源基因產(chǎn)物的水平遠(yuǎn)高于其它基因表達系統(tǒng),表達的目的蛋白量甚至能超過細(xì)菌總蛋白量的30%,對小分子蛋白的生產(chǎn)具有極大的優(yōu)勢,因此大腸桿菌是目前應(yīng)用多的重組蛋白質(zhì)表達系統(tǒng)。普欣重組蛋白代理
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