不同細(xì)胞研究中添加的重組蛋白有所不同。人胚胎干(ES)細(xì)胞研究中的重組蛋白主要有,細(xì)胞培養(yǎng)用人重組actin A,bFGF,IGF-II等,細(xì)胞分化用BMP-4,EGF和HGF。間充質(zhì)干(MSC)細(xì)胞研究中的重組蛋白主要有,間充質(zhì)干(MSC)細(xì)胞培養(yǎng)和自我更新的生長(zhǎng)因子:LIF,bFGF,EGF,HGF,PDGF和Wnt3,MSC分化的生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子:BMP-2與TGF-β1。神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)研究中的重組蛋白主要有,重組EGF,重組bFGF,和重組VEGF,用于神經(jīng)干細(xì)胞的擴(kuò)增。此外,包括BDNF在內(nèi)的多幾種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子例如BDNF,CNTF,和GDNF也可適用于相關(guān)研究。中國(guó)的重組蛋白藥物市場(chǎng),前景廣闊。R&DSystemsMMP-7重組蛋白
近年來(lái),用于重組蛋白表達(dá)和純化的技術(shù)和產(chǎn)品迅速增長(zhǎng)。自從親和標(biāo)簽融合技術(shù)出現(xiàn)以來(lái),多種多樣的短肽或蛋白親和標(biāo)簽極大地方便了外源表達(dá)重組蛋白的分離與蛋白質(zhì)復(fù)合體的純化,已成為蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域不可或缺的工具。多聚組氨酸標(biāo)簽(His-tag)是目前高通量蛋白純化普遍使用的親和標(biāo)簽,His 標(biāo)簽融合蛋白的固定化金屬離子親和層析(immobilized metal-ion affinity chromatography, IMAC)被作為主要的蛋白純化方法。從重組蛋白的表達(dá)優(yōu)化,到小量誘導(dǎo)純化,再到中試、大規(guī)模生產(chǎn)需要眾多繁瑣、大量的工作。快速、可靠、高效的自動(dòng)化分離分析技術(shù)可極大地提高效率,降低時(shí)間、人員成本。人IGF-II重組蛋白重組蛋白包括各類受體、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)錄因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。
CHO細(xì)胞即:中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(Chinese Hamster Ovary),它是基因工程疫苗研究中具有代表性的哺乳動(dòng)物表達(dá)載體,是用來(lái)表達(dá)外源蛋白多也是成功的一類細(xì)胞。市場(chǎng)上超過(guò)70%的蛋白質(zhì)藥物選擇的制造細(xì)胞就是CHO細(xì)胞。CHO細(xì)胞可以在外源表達(dá)的蛋白質(zhì)上摻入復(fù)雜的聚糖,如N-連接聚糖。有助于蛋白質(zhì)的折疊和細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸。重組蛋白表達(dá)側(cè)重于大化每個(gè)分子中含有唾液酸的復(fù)雜聚糖的數(shù)量,CHO細(xì)胞糖基化之后,能增加對(duì)蛋白水解的抵抗力和延長(zhǎng)體內(nèi)血清半衰期,所以CHO細(xì)胞成為用作重組蛋白的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系。
重組人胰島素是上市的重組蛋白藥物,用于1型和2型糖尿病,經(jīng)過(guò)30多年的發(fā)展,目前胰島素已從一代動(dòng)物源性胰島素發(fā)展到第四代長(zhǎng)效胰島素類似物。目前重組蛋白藥物主要包含:1. 多肽類------重組人胰島素、胰島素類似物、重組人生長(zhǎng)因子和重組人促卵泡成熟因子等。2. 細(xì)胞因子-----重組人促卵泡成熟因子、重組人干擾素α、β、γ、重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞刺激因子、重組人白細(xì)胞介素2、11、重組人表皮生長(zhǎng)因子、重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因等。3. 重組酶----重組人尿激酶原、重組人α葡萄糖苷酶制劑等,以及其它如重組人骨形成蛋白2和重組水蛭素等多個(gè)細(xì)分領(lǐng)域。溶解后的重組蛋白如何保存?
蛋白質(zhì)是基因功能的執(zhí)行者,蛋白間相互作用構(gòu)成機(jī)體生命活動(dòng)的基礎(chǔ)。當(dāng)體內(nèi)行使特定功能的蛋白發(fā)生變異或濃度異常時(shí),都會(huì)導(dǎo)致疾病的發(fā)生。因此,理論上蛋白類藥物可用于任何發(fā)病機(jī)制清楚、病理學(xué)靶點(diǎn)明確的疾病。蛋白質(zhì)藥物,特別是重組蛋白、工程化抗體等生物技術(shù)藥物取得的良好療效及巨大的經(jīng)濟(jì)效益。重組蛋白藥物主要有多肽類、細(xì)胞因子、血漿蛋白因子、重組酶及融合蛋白等類別。中國(guó)重組蛋白藥物市場(chǎng)以仿制藥為主,重組人胰島素、重組干擾素、重組粒細(xì)胞集落刺激因子為市場(chǎng)份額多的重組蛋白藥物,發(fā)展前景廣闊。45.蘇州近岸蛋白專注生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的重組蛋白質(zhì)。GMP級(jí)重組蛋白怎么樣
什么是重組蛋白?如何產(chǎn)生?R&DSystemsMMP-7重組蛋白
單克隆抗體是一類重組蛋白,不論是科研還是醫(yī)療中,都有很大應(yīng)用。突出的表達(dá)重組單克隆抗體的宿主細(xì)胞系是CHO、NS0、SP2/0、HEK293和PER.C6。然而,大多數(shù)文獻(xiàn)都是關(guān)于CHO細(xì)胞的,該細(xì)胞仍然是現(xiàn)今工業(yè)生產(chǎn)重組蛋白藥物的主力,占到了70%(Jayapal等人,2007)。CHO細(xì)胞是于1986年一個(gè)被批準(zhǔn)的重組生物制藥的表達(dá)系統(tǒng)(組織型纖溶酶原actin物;t-PA)。從那時(shí)起,CHO細(xì)胞就是是重組蛋白表達(dá)的選擇。盡管有其他哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)可用,CHO細(xì)胞仍然是優(yōu)化重組蛋白表達(dá)研究的中心。R&DSystemsMMP-7重組蛋白
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