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小鼠BMP-9重組蛋白

來源: 發(fā)布時間:2022-07-13

如果一個實驗周期長于一周,或配制的細胞因子或重組蛋白一次用不完,我們就需對細胞因子或重組蛋白進行長期保存。千萬不能將重組蛋白凍干粉用推薦的溶液重懸后直接分裝凍存于-20℃至-80℃。塑料管壁對多數(shù)蛋白均有很好的吸附作用,也就是說溶液中的蛋白很容易粘附在管壁。直接分裝凍存,則溶液中的大部分細胞因子或重組蛋白均會粘附到管壁上,導致溶液中實際溶解的細胞因子或重組蛋白的濃度大為降低,表現(xiàn)為細胞因子或重組蛋白活性的下降。正確的方法是:將已重懸的細胞因子或蛋白用含載體蛋白,如0.1% BSA(牛血清白蛋白),10% FBS(胎牛血清),5% HSA(人血清白蛋白)的溶液將重懸液進一步稀釋,然后分裝凍存于-20℃至-80℃,即常規(guī)冰箱的冷凍室或超低溫冰箱中。重組蛋白的有效期限是多長?小鼠BMP-9重組蛋白

重組蛋白溶液在低濃度的冰凍條件下凍存時通常不是很穩(wěn)定。在凍融過程中,溶液中的某些蛋白會粘附在容器壁上,如果蛋白的起始濃度較低,則上述原因可能會導致造成蛋白濃度的進一步下降。因此,重組蛋白溶液中要添加載體蛋白用于減少此類損失。常用的載體蛋白包括牛血清白蛋白(BSA),人血清白蛋白(HSA)或胎牛血清(FBS)。這些載體蛋白通常的使用濃度是在0.1%。依根據經驗數(shù)據,如果重組蛋白的濃度低于0.5 mg/mL,則推薦加入一些載體蛋白。常見國產重組蛋白品牌:北京義翹神州,武漢普健生物,上海普欣生物,近岸蛋白質科技,武漢華美生物,北京百普賽斯生物等。常見進口重組蛋白品牌:R&D Systems,PeproTech,ProSpec,Gibco等。義翹神州BDNF重組蛋白提供國內外知名品牌的重組蛋白,種類齊全,價格優(yōu)惠。

重組蛋白疫苗是采用基因工程技術,將病毒的目的抗原基因構建在表達載體上,將已構建的表達蛋白載體轉化到細菌、酵母或哺乳動物或昆蟲細胞中,在一定的誘導條件下,表達出大量的抗原蛋白,再經提純并添加佐劑而制成疫苗。重組蛋白疫苗主要有三個優(yōu)勢:不養(yǎng)活病毒,無需擔心病毒外泄,對生產車間的生物安全等級要求低;利用轉基因技術生產病毒S蛋白上的RBD蛋白,能實現(xiàn)高產量、高純度、低成本;重組蛋白疫苗只含RBD蛋白,純度高,安全性更好。

在昆蟲細胞表達系統(tǒng)中,昆蟲細胞需要桿狀病毒作為重組蛋白表達的中間體。桿狀病毒是一組不同的DNA病毒,能夠侵染各種昆蟲細胞。它們就像一個穿梭機,將目標基因導入給定的宿主細胞。加州親筆多核多角體病毒(AcMNPV) 在利用桿狀病毒這方面表現(xiàn)出突出的特征。簡單地說,將編碼感興趣蛋白質的基因插入一個主要載體,然后將其克隆到一個名為Bacmid的次要載體上。Bacmid被轉移到一株細菌(通常是大腸桿菌)中進行初步病毒生產和組裝,以獲得一代桿狀病毒(P1)。P1病毒在昆蟲細胞中被擴增(例如sf9)以獲得合適的滴度(P2),然后P2病毒被用于侵染相同或不同的昆蟲細胞系(例如High-five)以實現(xiàn)重組蛋白表達。重組蛋白大規(guī)模的瞬時表達是研究熱點。

在細胞培養(yǎng)過程中常用的生長因子,細胞因子和趨化因子,許多科學家傾向使用進口的重組蛋白,如R&D Systems,PeproTech,ProSpec,Gibco等。這就導致可選擇范圍變得很窄。想要增加重組蛋白可選種類,建議選擇國產重組蛋白。如進口品牌賽默飛選擇與國產品牌義翹神州(Sino Biologcical)合作來拓展他們的重組蛋白套裝范圍,為用戶提供1500種左右的重組蛋白(Thermo Fisher Scientific與Sino Biological聯(lián)合品牌)。Sino重組蛋白主要有四大優(yōu)勢:(1)包括粘附蛋白,細胞因子,趨化因子,生長因子,流感蛋白,蛋白酶,磷酸酶,轉錄因子,通道蛋白和受體在內的多種選擇;(2)具有競爭力的價格;(3)為每一種蛋白產品提供更多種的包裝尺寸規(guī)格(4)大多數(shù)由哺乳動物細胞所表達,90%由人體細胞系表達,這樣有助于就可確保蛋白產品具擁有正確的哺乳動物翻譯后修飾。R&D Systems是全球重組蛋白生產的前列。人LIF重組蛋白

如何挑選 GMP級重組蛋白?小鼠BMP-9重組蛋白

對于臨床使用的 GMP 級蛋白,批次間一致性是重要的指標之一。其次,要符合 GMP 要求的質量管理體系,至少,所選供應商應通過 ISO 9001: 2008/2015 相關認證的質量管理體系(QMS),質量管理體系是經過認證的符合相關政策的大量的文件和記錄管理系統(tǒng)以及生產過程的可追溯性。而后,要挑選無動物源性的重組蛋白,相較于普通實驗條件生產的重組蛋白,Animal-free 重組蛋白具有如下突出的優(yōu)勢:不會引入瘋牛病病毒或者其它未知病原體;不會引起異種免疫排斥和過敏反應;不會因微量動物活性成分引發(fā)副作用。小鼠BMP-9重組蛋白

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