重組蛋白的活性低是讓科研工作者十分頭疼的難題，買(mǎi)來(lái)的重組蛋白活性低怎么辦？除了重組蛋白自身存在質(zhì)量問(wèn)題外，它可能只是需要一個(gè)“搭檔”。在某些重組蛋白在使用時(shí)，需要加入交聯(lián)抗體，進(jìn)行交聯(lián)（Cross-linking）反應(yīng)后才能表現(xiàn)出高活性，發(fā)揮出功能。其原理是，交聯(lián)反應(yīng)能夠?qū)⒅亟M蛋白的受體相互拉近，因?yàn)槊總€(gè)標(biāo)簽抗體含有兩個(gè)抗原結(jié)合臂，從而能夠使兩個(gè)含標(biāo)簽蛋白 - 受體復(fù)合物拉近，進(jìn)而指數(shù)級(jí)放大下游信號(hào)，提升刺激的效率（表現(xiàn)為更低的 ED50 值）。眾所周知，在同一實(shí)驗(yàn)中 ED50 越低表明著活性越高。重組蛋白的有效期限是多長(zhǎng)？PeproTechIL-8重組蛋白

R&D Systems作為全球免疫學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)產(chǎn)品的生產(chǎn)商，1976年創(chuàng)立于美國(guó)明尼蘇達(dá)州，至今已為學(xué)術(shù)界服務(wù)近40年。其母公司Bio-Techne（原Techne公司）于1983年在美國(guó)NASDAQ上市。目前，R&D Systems擁有近30,000種產(chǎn)品，95%以上由自己研發(fā)生產(chǎn)。其產(chǎn)品包括重組蛋白、細(xì)胞因子、ELISA試劑盒、生長(zhǎng)因子、趨化因子、抗體、Animal-Free?蛋白、Luminex 液相芯片、多因子檢測(cè)固相芯片、流式細(xì)胞分析與細(xì)胞篩選、干細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)等；覆蓋發(fā)育、糖生物、內(nèi)分泌、免疫、神經(jīng)學(xué)、蛋白酶、信號(hào)傳導(dǎo)等學(xué)科研究領(lǐng)域；且每年有近2,000種新產(chǎn)品不斷問(wèn)世，以滿(mǎn)足不同科研工作者的研究需要。國(guó)產(chǎn)BDNF重組蛋白定制進(jìn)口重組蛋白質(zhì)量好，能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

昆蟲(chóng)細(xì)胞是多種重組蛋白的多功能表達(dá)宿主。其較強(qiáng)的折疊能力和較高的培養(yǎng)密度使其成為表達(dá)細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜蛋白和病毒蛋白的理想選擇。2007年，由昆蟲(chóng)細(xì)胞系以病毒樣顆粒(VLPs)的形式生產(chǎn)的病毒疫苗Cervarix被批準(zhǔn)用于人類(lèi)。除了在疫苗開(kāi)發(fā)方面的潛力外，昆蟲(chóng)細(xì)胞產(chǎn)生的高活性蛋白還應(yīng)用于生物物理學(xué)和生物化學(xué)的各個(gè)學(xué)科，如結(jié)構(gòu)解釋、藥物設(shè)計(jì)、測(cè)定方法建立和診斷試劑開(kāi)發(fā)等等。許多生物廠(chǎng)家利用昆蟲(chóng)細(xì)胞進(jìn)行重組蛋白產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和承包研究項(xiàng)目。

在科研實(shí)驗(yàn)中，重組蛋白的生物學(xué)活性通常以ED50來(lái)表示。在大多數(shù)情況下，研究人員一般基于各類(lèi)指示性細(xì)胞——如某些原代細(xì)胞或細(xì)胞系——來(lái)開(kāi)展生物分析。常用的生物分析法包括細(xì)胞增殖分析，細(xì)胞趨化性分析，細(xì)胞因子生成分析和細(xì)胞毒性分析。通常以ED50來(lái)表示某一細(xì)胞因子的生物活性，該值表示能夠誘發(fā)50%大效應(yīng)的細(xì)胞因子濃度。這一表示效價(jià)的方法適用于那些劑量效應(yīng)曲線(xiàn)為S形的細(xì)胞因子。ED50被定義為處于max反應(yīng)50%水平的細(xì)胞因子濃度。這一表示現(xiàn)效價(jià)的方法適用于那些劑量效應(yīng)曲線(xiàn)為S形的細(xì)胞因子。將ng/mL單位的ED50活性值（注意：如當(dāng)前為pg/mL，請(qǐng)先換算為ng/mL）轉(zhuǎn)換為（注意：如需當(dāng)前單位為pg/mL，請(qǐng)先換算為ng/mL）單位/毫克（unit/mg）特定活性值的公式為（當(dāng)ED50表示為處于一個(gè)范圍區(qū)間時(shí)，選擇此范圍的中點(diǎn)值）：1 x 10E6/ED50* (ng/mL) = 以單位/毫克（Units/mg蛋白）表示為單位的特定蛋白特定活性。選擇高品質(zhì)重組蛋白和生長(zhǎng)因子。

哺乳動(dòng)物蛋白表達(dá)系統(tǒng)在生產(chǎn)重組蛋白中的應(yīng)用中，優(yōu)勢(shì)明顯。具體表現(xiàn)為以下方面，能實(shí)現(xiàn)翻譯后修飾及正確的蛋白折疊復(fù)性：哺乳動(dòng)物為真核細(xì)胞，細(xì)胞器可以對(duì)蛋白正確折疊加工。表達(dá)水平高:載體可在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中高表達(dá)重組蛋白，表達(dá)量可高達(dá)1-3g/L。蛋白表達(dá)高效穩(wěn)定：高效啟動(dòng)子控制，穩(wěn)定表達(dá)，并可以選擇多種表達(dá)，如瞬時(shí)表達(dá)、穩(wěn)定細(xì)胞株表達(dá)、營(yíng)養(yǎng)缺陷型細(xì)胞株表達(dá)(DHFR/GS)、大規(guī)模懸浮細(xì)胞表達(dá)等。適合大規(guī)模蛋白表達(dá):常用的哺乳動(dòng)物表達(dá)宿主細(xì)胞（HEK293和CHO），使用懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，可以在一個(gè)月內(nèi)可產(chǎn)生數(shù)克級(jí)蛋白。怎么才能讓重組蛋白保持良好的穩(wěn)定性和生物學(xué)活性呢？GMP級(jí)BMP-2重組蛋白定制

國(guó)產(chǎn)重組蛋白品牌有哪些？PeproTechIL-8重組蛋白

重組蛋白具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和科研價(jià)值，但是在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中使用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法將會(huì)消耗大量的時(shí)間，而傳統(tǒng)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法，在產(chǎn)量上也難以令人滿(mǎn)意。所以重組蛋白大規(guī)模的瞬時(shí)表達(dá)技術(shù)是近年來(lái)的一個(gè)研究熱點(diǎn)，已有報(bào)道能放大到 100L反應(yīng)器中生產(chǎn)重組蛋白，產(chǎn)量（分泌型蛋白）可達(dá) 1-10mg/L。不過(guò)該方法技術(shù)條件要求高，如質(zhì)粒的純度、轉(zhuǎn)染的效率等。哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中，重組蛋白的表達(dá)水平與許多 因素相關(guān)，如轉(zhuǎn)錄和翻譯調(diào)控元件、RNA剪接過(guò)程、mRNA穩(wěn) 定性、基因在染色體上的整合位點(diǎn)、重組蛋白對(duì)細(xì)胞的毒性作 用以及宿主細(xì)胞的遺傳特性等。PeproTechIL-8重組蛋白

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