重組人胰島素是上市的重組蛋白藥物，用于1型和2型糖尿病，經(jīng)過(guò)30多年的發(fā)展，目前胰島素已從一代動(dòng)物源性胰島素發(fā)展到第四代長(zhǎng)效胰島素類似物。目前重組蛋白藥物主要包含：1. 多肽類------重組人胰島素、胰島素類似物、重組人生長(zhǎng)因子和重組人促卵泡成熟因子等。2. 細(xì)胞因子-----重組人促卵泡成熟因子、重組人干擾素α、β、γ、重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞刺激因子、重組人白細(xì)胞介素2、11、重組人表皮生長(zhǎng)因子、重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因等。3. 重組酶----重組人尿激酶原、重組人α葡萄糖苷酶制劑等，以及其它如重組人骨形成蛋白2和重組水蛭素等多個(gè)細(xì)分領(lǐng)域。重組蛋白的表達(dá)與純化方法。義翹神州MMP-2重組蛋白

重組蛋白的細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)有各種各樣的載體和宿主菌可供選擇，大部分工程菌的增殖時(shí)間短,不僅便于快速評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而且降低了技術(shù)和設(shè)備無(wú)菌要求的嚴(yán)格性。無(wú)害大腸桿菌是腸道正常微生物群的一部分與生物體為共生關(guān)系，可以通過(guò)產(chǎn)生維生素K 2使機(jī)體受益，并防止病原菌在腸道增殖。大腸桿菌是用于重組蛋白生產(chǎn)的宿主菌,它不僅具有遺傳背景清楚、培養(yǎng)操作簡(jiǎn)單、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高、生長(zhǎng)繁殖快、成本低廉,可以快速大規(guī)模地生產(chǎn)目的蛋白等優(yōu)點(diǎn),而且其表達(dá)外源基因產(chǎn)物的水平遠(yuǎn)高于其它基因表達(dá)系統(tǒng),表達(dá)的目的蛋白量甚至能超過(guò)細(xì)菌總蛋白量的30%，對(duì)小分子蛋白的生產(chǎn)具有極大的優(yōu)勢(shì)，因此大腸桿菌是目前應(yīng)用多的重組蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)。義翹神州MMP-1重組蛋白中國(guó)的重組蛋白藥物市場(chǎng)，前景廣闊。

在昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中，昆蟲細(xì)胞需要桿狀病毒作為重組蛋白表達(dá)的中間體。桿狀病毒是一組不同的DNA病毒，能夠侵染各種昆蟲細(xì)胞。它們就像一個(gè)穿梭機(jī)，將目標(biāo)基因?qū)虢o定的宿主細(xì)胞。加州親筆多核多角體病毒(AcMNPV) 在利用桿狀病毒這方面表現(xiàn)出突出的特征。簡(jiǎn)單地說(shuō)，將編碼感興趣蛋白質(zhì)的基因插入一個(gè)主要載體，然后將其克隆到一個(gè)名為Bacmid的次要載體上。Bacmid被轉(zhuǎn)移到一株細(xì)菌(通常是大腸桿菌)中進(jìn)行初步病毒生產(chǎn)和組裝，以獲得一代桿狀病毒(P1)。P1病毒在昆蟲細(xì)胞中被擴(kuò)增(例如sf9)以獲得合適的滴度(P2)，然后P2病毒被用于侵染相同或不同的昆蟲細(xì)胞系(例如High-five)以實(shí)現(xiàn)重組蛋白表達(dá)。

重組蛋白的生化和生物學(xué)特性對(duì)于選擇表達(dá)策略來(lái)說(shuō)是必須要考慮的，可以通過(guò)它們對(duì)表達(dá)結(jié)果和產(chǎn)物的可溶性做出初步預(yù)測(cè)。通過(guò)分析一級(jí)序列可以整合一組屬性用以預(yù)測(cè)二級(jí)結(jié)構(gòu)、生物學(xué)定位 (細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、周質(zhì)腔或胞外）、家族歸類 (折疊和結(jié)構(gòu)域) 及推斷生化性質(zhì) (等電點(diǎn)、無(wú)序區(qū)域、配基)。目標(biāo)蛋白質(zhì)的一些特征，如極可能存在的跨膜螺旋，可能要求必須使用為表達(dá)膜蛋白設(shè)計(jì)的系統(tǒng)，或需要使用克隆單個(gè)結(jié)構(gòu)域的策略以表達(dá)蛋白質(zhì)的可溶部分。使用目標(biāo)蛋白質(zhì)的特征來(lái)指導(dǎo)表達(dá)宿主的選擇和載體的構(gòu)建有助于獲得成熟的、定位適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)?？梢允褂媚繕?biāo)蛋白質(zhì)或同源蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和歷史數(shù)據(jù)對(duì)序列信息加以補(bǔ)充，從而有助于表達(dá)系統(tǒng)的進(jìn)一步優(yōu)化。例如，已知某蛋白質(zhì)需要某種輔基以保持正確的功目旨，那就必須選擇特定的宿主以確保獲得具有完整功能的表達(dá)產(chǎn)物。重組蛋白的生物活性接近于天然蛋白質(zhì)，因此在生物制藥領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。

不同細(xì)胞研究中添加的重組蛋白有所不同。人胚胎干（ES）細(xì)胞研究中的重組蛋白主要有，細(xì)胞培養(yǎng)用人重組actin A，bFGF，IGF-II等，細(xì)胞分化用BMP-4，EGF和HGF。間充質(zhì)干（MSC）細(xì)胞研究中的重組蛋白主要有，間充質(zhì)干（MSC）細(xì)胞培養(yǎng)和自我更新的生長(zhǎng)因子：LIF，bFGF，EGF，HGF，PDGF和Wnt3，MSC分化的生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子：BMP-2與TGF-β1。神經(jīng)干細(xì)胞（NSC）研究中的重組蛋白主要有，重組EGF，重組bFGF，和重組VEGF，用于神經(jīng)干細(xì)胞的擴(kuò)增。此外，包括BDNF在內(nèi)的多幾種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子例如BDNF，CNTF，和GDNF也可適用于相關(guān)研究。重組蛋白的活性高低，是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。人CXCL16重組蛋白

PeproTech提供多種高質(zhì)量細(xì)胞因子和重組蛋白，包裝規(guī)格多，備受科學(xué)家青睞。義翹神州MMP-2重組蛋白

體外生產(chǎn)重組蛋白的表達(dá)系統(tǒng)中，哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)能夠?yàn)橹亟M人源蛋白提供較接近于天然狀態(tài)的翻譯后修飾，在蛋白表達(dá)過(guò)程中會(huì)形成接近天然蛋白的蛋白質(zhì)折疊和聚合，具備活性蛋白所必須的空間結(jié)構(gòu)和修飾。哺乳動(dòng)物細(xì)胞翻譯后再加工修飾產(chǎn)生的外源重組蛋白質(zhì)，在活性方面高于原核表達(dá)系統(tǒng)及酵母、昆蟲細(xì)胞等真核表達(dá)系統(tǒng)，更接近于天然蛋白質(zhì)。這些特性使得哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)在重組蛋白藥物，特別是重組單抗藥物的研發(fā)和生產(chǎn)中的具有極大的應(yīng)用。義翹神州MMP-2重組蛋白

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