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不同細胞研究中添加的重組蛋白有所不同。人胚胎干(ES)細胞研究中的重組蛋白主要有,細胞培養(yǎng)用人重組actin A,bFGF,IGF-II等,細胞分化用BMP-4,EGF和HGF。間充質(zhì)干(MSC)細胞研究中的重組蛋白主要有,間充質(zhì)干(MSC)細胞培養(yǎng)和自我更新的生長因子:LIF,bFGF,EGF,HGF,PDGF和Wnt3,MSC分化的生長因子或細胞因子:BMP-2與TGF-β1。神經(jīng)干細胞(NSC)研究中的重組蛋白主要有,重組EGF,重組bFGF,和重組VEGF,用于神經(jīng)干細胞的擴增。此外,包括BDNF在內(nèi)的多幾種神經(jīng)營養(yǎng)因子例如BDNF,CNTF,和GDNF也可適用于相關(guān)研究。嚴(yán)格的質(zhì)量控制系統(tǒng), 才能保證重組蛋白產(chǎn)品的生物活化與一致性。BMP-1重組蛋白定制
市場上重組蛋白通常以凍干形式售賣,這是因為蛋白質(zhì)對熱敏感,凍干能使蛋白質(zhì)在存儲過程中保持活性,延長保存時間,同時也能降低運輸成本。但是凍干對蛋白質(zhì)的活性會有一定的影響,可能造成蛋白質(zhì)部分失活、聚集和其它變性等。這個時候,就需要通過加入保護劑(穩(wěn)定劑,添加劑,輔料)和控制凍干的各種條件來盡可能降低這些負面的影響,盡可能的保護蛋白的活性。常見的保護劑或穩(wěn)定劑包括糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。PD-L1重組蛋白重組蛋白到貨后,如何操作?
購買的重組蛋白單位一般是 μg,重組蛋白檢測結(jié)果和用量常用單位是 U/mL 或 IU/mL。U是什么?和IU之間有什么差別?它們又是怎么與 μg 進行換算的呢?首先,U 是蛋白活性單位,用于計量蛋白本身的生物學(xué)活性?;钚詥挝恢冈谶m條件下,單位時間內(nèi)產(chǎn)生單位生物學(xué)效應(yīng)的蛋白量。以酶為例,1961年,國際生物化學(xué)學(xué)會酶學(xué)委員會提出采用統(tǒng)一的「國際單位」(IU)來表示酶的活力,在合適條件下,每分鐘內(nèi)催化 1 微摩爾(μmol)底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物或轉(zhuǎn)化底物中 1 微摩爾的有關(guān)基團所需的酶量。即 1 IU=1 U=1 μmol/min。IU 與 μg之間的換算,要引入比活性的概念。比活性是指單位質(zhì)量蛋白的生物學(xué)活性單位,通常用 U/μg 或 μmol/min/μg 表示。以酶為例,在合適條件下,如果 1 μg 酶可以在 1 分鐘內(nèi)催化 1μmol 的底物,那么其比活性就是 1U/μg。比活性是重組蛋白的一項重要指標(biāo)。進行比活性項目的檢測,不僅可以反映產(chǎn)品生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定情況,而且可以比較不同表達體系、不同生產(chǎn)廠家生產(chǎn)同一產(chǎn)品的品質(zhì)情況。比活性高說明產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝更先進、純度更高、質(zhì)量更優(yōu)。
PeproTech Inc. 創(chuàng)立于1988年,始終致力于為生命科學(xué)研究開發(fā)重組蛋白及相關(guān)產(chǎn)品,如今已成為能提供多種高質(zhì)量細胞因子和重組蛋白,相應(yīng)的單克隆、多克隆和生物素標(biāo)記抗體,以及ELISA試劑盒的世界。PeproTech Inc.的產(chǎn)品涵蓋免疫調(diào)節(jié)蛋白、白介素、集落刺激因子、生長因子、化學(xué)趨化因子、干擾素、脂聯(lián)素、成纖維生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子、壞死因子、神經(jīng)營養(yǎng)素和防御素等諸多生命科學(xué)研究領(lǐng)域中重要的生物活性分子。為跟上當(dāng)今科研發(fā)展、滿足日益增長的需求,PeproTech Inc.研制出無動物成分的重組蛋白(animal-free recombinant proteins)。這些蛋白是利用專有的無動物成分生產(chǎn)設(shè)施,在嚴(yán)格的無動物成分條件下生產(chǎn)出來,因此痕量的動物源性污染引發(fā)潛在問題的可能性被降至低,從而完全達到臨床前研究用標(biāo)準(zhǔn)。重組蛋白的生物活性接近于天然蛋白質(zhì),因此在生物制藥領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
重組蛋白疫苗是采用基因工程技術(shù),將病毒的目的抗原基因構(gòu)建在表達載體上,將已構(gòu)建的表達蛋白載體轉(zhuǎn)化到細菌、酵母或哺乳動物或昆蟲細胞中,在一定的誘導(dǎo)條件下,表達出大量的抗原蛋白,再經(jīng)提純并添加佐劑而制成疫苗。重組蛋白疫苗主要有三個優(yōu)勢:不養(yǎng)活病毒,無需擔(dān)心病毒外泄,對生產(chǎn)車間的生物安全等級要求低;利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)病毒S蛋白上的RBD蛋白,能實現(xiàn)高產(chǎn)量、高純度、低成本;重組蛋白疫苗只含RBD蛋白,純度高,安全性更好。國產(chǎn)重組蛋白種類多,性價比高。R&DSystemsIL-7重組蛋白
高純度、高活性、低內(nèi)毒素,高批次間一致性是選購重組蛋白的重點。BMP-1重組蛋白定制
體外生產(chǎn)重組蛋白的表達系統(tǒng)中,哺乳動物細胞表達系統(tǒng)能夠為重組人源蛋白提供較接近于天然狀態(tài)的翻譯后修飾,在蛋白表達過程中會形成接近天然蛋白的蛋白質(zhì)折疊和聚合,具備活性蛋白所必須的空間結(jié)構(gòu)和修飾。哺乳動物細胞翻譯后再加工修飾產(chǎn)生的外源重組蛋白質(zhì),在活性方面高于原核表達系統(tǒng)及酵母、昆蟲細胞等真核表達系統(tǒng),更接近于天然蛋白質(zhì)。這些特性使得哺乳動物細胞表達系統(tǒng)在重組蛋白藥物,特別是重組單抗藥物的研發(fā)和生產(chǎn)中的具有極大的應(yīng)用。BMP-1重組蛋白定制
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