功能性ELISA是一類以ELISA形式進(jìn)行的、基于體外配體結(jié)合的分析法。該方法用于檢測(cè)目的蛋白與其天然結(jié)合物配體之間(如生長(zhǎng)因子與其受體)的結(jié)合能力。如果在該檢測(cè)中生長(zhǎng)因子能夠與其天然受體相結(jié)合,則該生長(zhǎng)因子很可能是具有功能的。ED50為OD值讀取過程中能夠提供50%信號(hào)強(qiáng)度的生長(zhǎng)因子濃度(在包被了受體的平板上)。重組蛋白使用了基于細(xì)胞的檢測(cè)分析或功能性ELISA分析對(duì)其生物學(xué)活性進(jìn)行了檢測(cè),產(chǎn)品頁上會(huì)提供相應(yīng)的ED50值。也有些重組蛋白沒有提供生物活性數(shù)據(jù)。在大多數(shù)情況下,這表明沒有進(jìn)行生物活性測(cè)試,但它并不一定意味著蛋白是沒有活性的。在沒有生物活性數(shù)據(jù)的情況下,這些蛋白可用做蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn),蛋白免疫印記陽性對(duì)照(如果是全長(zhǎng)的重組蛋白)或免疫原。其它可能的用途是配體結(jié)合試驗(yàn)或ELISA的標(biāo)準(zhǔn)品。R&D Systems是全球重組蛋白生產(chǎn)的前列。人TGF-beta 1重組蛋白
糖基化是指糖基轉(zhuǎn)移酶作用下將糖轉(zhuǎn)移至蛋白質(zhì),和蛋白質(zhì)上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質(zhì)經(jīng)過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對(duì)蛋白的重要的修飾作用,有調(diào)節(jié)蛋白質(zhì),幫助蛋白質(zhì)折疊功能作用。在大多數(shù)情況下,生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子的糖基化作用不會(huì)直接影響該蛋白與受體之間的結(jié)合。所以在體外研究中,重組生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子的生物活性不會(huì)受糖基化作用的過多影響。不過,糖基化蛋白通常對(duì)蛋白酶的降解更不敏感具耐受性,所以在體內(nèi)的半衰期比未經(jīng)無糖基化的同種蛋白更長(zhǎng)。因此在體內(nèi)研究中,以選擇哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)或昆蟲表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的重組蛋白可能是比大腸桿菌中生產(chǎn)的同種重組蛋白效果更好的一個(gè)選擇要好。義翹神州HGF重組蛋白重組蛋白的應(yīng)用顯著增長(zhǎng),用于重組蛋白表達(dá)和純化的技術(shù)和產(chǎn)品也得以增長(zhǎng)。
重組蛋白的許多生產(chǎn)廠家都是不限制產(chǎn)品使用期限的,不規(guī)定重組蛋白和抗體產(chǎn)品的失效期或生產(chǎn)日期。在適當(dāng)?shù)拇鎯?chǔ)條件下,重組蛋白和抗體可以保持活性穩(wěn)定多年。這些條件包括以凍干粉形式存儲(chǔ)蛋白,以大于 0.1 mg/mL 的蛋白濃度存儲(chǔ)冷凍的產(chǎn)品(-20 °C 或 -80 °C)以及限制凍融循環(huán)的次數(shù)。但是,廠家常規(guī)質(zhì)量控制測(cè)試可確保所有產(chǎn)品在銷售時(shí)都具有可接受的生物活性。在實(shí)驗(yàn)室的正常條件下使用時(shí),我們保證產(chǎn)品達(dá)到或超過我們提供的技術(shù)參數(shù)。由于無法控制終端用戶的存儲(chǔ)條件,通常,保質(zhì)期為自購(gòu)買之日起 6-12 個(gè)月。若有特殊要求,請(qǐng)參見各產(chǎn)品說明書。
不同表達(dá)系統(tǒng)所生成的重組蛋白間有何主要區(qū)別?以賽默飛為例,Thermo Fisher Scientific? 所提供的重組蛋白產(chǎn)品通常在大腸桿菌,昆蟲細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞等不同的表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生。不同表達(dá)系統(tǒng)之間產(chǎn)生的重組蛋白的主要差別在于這些蛋白所攜帶的翻譯后修飾,如糖基化修飾。在大腸桿菌中生成的重組蛋白未經(jīng)糖基化。在昆蟲細(xì)胞中產(chǎn)生的重組蛋白通常經(jīng)有部分糖基化,但不含半乳糖和唾液脫鹽酸,糖鏈也無復(fù)雜分支。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中生成的重組蛋白會(huì)發(fā)生附帶完全的糖基化修飾。備注:Mimic? Sf9 昆蟲細(xì)胞(來源于sf9昆蟲細(xì)胞系,經(jīng)改造可穩(wěn)定表達(dá)多種哺乳動(dòng)物糖基轉(zhuǎn)移酶)可產(chǎn)生用于表達(dá)帶末端唾液酸和半乳糖的復(fù)雜的N-糖鏈。國(guó)產(chǎn)重組蛋白品牌有哪些?
如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)于一周,或配制的細(xì)胞因子或重組蛋白一次用不完,我們就需對(duì)細(xì)胞因子或重組蛋白進(jìn)行長(zhǎng)期保存。千萬不能將重組蛋白凍干粉用推薦的溶液重懸后直接分裝凍存于-20℃至-80℃。塑料管壁對(duì)多數(shù)蛋白均有很好的吸附作用,也就是說溶液中的蛋白很容易粘附在管壁。直接分裝凍存,則溶液中的大部分細(xì)胞因子或重組蛋白均會(huì)粘附到管壁上,導(dǎo)致溶液中實(shí)際溶解的細(xì)胞因子或重組蛋白的濃度大為降低,表現(xiàn)為細(xì)胞因子或重組蛋白活性的下降。正確的方法是:將已重懸的細(xì)胞因子或蛋白用含載體蛋白,如0.1% BSA(牛血清白蛋白),10% FBS(胎牛血清),5% HSA(人血清白蛋白)的溶液將重懸液進(jìn)一步稀釋,然后分裝凍存于-20℃至-80℃,即常規(guī)冰箱的冷凍室或超低溫冰箱中。什么是重組蛋白?如何產(chǎn)生?PeproTechBMP-1重組蛋白
重組蛋白藥物在醫(yī)學(xué)中作用顯著。人TGF-beta 1重組蛋白
重組蛋白是由操縱的基因——重組基因編碼的蛋白質(zhì),由特定的重組表達(dá)系統(tǒng)產(chǎn)生(見蛋白表達(dá)系統(tǒng))。重組基因是一種新的基因組合,由一個(gè)或多個(gè)DNA的片段或基因從不同的分子或其他物種插入。與天然蛋白相比,重組蛋白產(chǎn)量大,生產(chǎn)相對(duì)容易。重組蛋白在研究細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子、酶和激酶研究以及補(bǔ)體系統(tǒng)功能等生物學(xué)過程中發(fā)揮著重要作用。此外,重組蛋白被認(rèn)為是一種高效的藥物,不會(huì)產(chǎn)生脫靶的副作用,比小分子的開發(fā)時(shí)間更短(見重組蛋白藥物)。人TGF-beta 1重組蛋白
上海研助寶生物醫(yī)藥有限公司擁有非臨床診斷用生物試劑、實(shí)驗(yàn)室儀器的銷售,從事計(jì)算機(jī)科技、網(wǎng)絡(luò)科技、化工科技、新材料科技、能源科技、生物醫(yī)藥科技、環(huán)??萍碱I(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓,廣告的設(shè)計(jì)、制作、代理、發(fā)布,專利代理,從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù)。等多項(xiàng)業(yè)務(wù),主營(yíng)業(yè)務(wù)涵蓋試劑,儀器,耗材,試劑盒。公司目前擁有專業(yè)的技術(shù)員工,為員工提供廣闊的發(fā)展平臺(tái)與成長(zhǎng)空間,為客戶提供高質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù),深受員工與客戶好評(píng)。公司以誠(chéng)信為本,業(yè)務(wù)領(lǐng)域涵蓋試劑,儀器,耗材,試劑盒,我們本著對(duì)客戶負(fù)責(zé),對(duì)員工負(fù)責(zé),更是對(duì)公司發(fā)展負(fù)責(zé)的態(tài)度,爭(zhēng)取做到讓每位客戶滿意。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實(shí)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德,樹立了良好的試劑,儀器,耗材,試劑盒形象,贏得了社會(huì)各界的信任和認(rèn)可。