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芯棄疾單分子數(shù)字ELISA檢測(cè)平臺(tái)開發(fā)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-12-23

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)

我們已經(jīng)開發(fā)了兩種臨床相關(guān)蛋白的檢測(cè)方法——前列腺特異性抗原(PSA)和腫瘤壞死因子α(TNF-α),以確定高酶標(biāo)記物單體提供的靈敏度轉(zhuǎn)化為高靈敏度的檢測(cè)方法血液中的蛋白質(zhì)。兩種蛋白質(zhì)的數(shù)字ELISA如圖1所示。開發(fā)這些試驗(yàn)的關(guān)鍵參數(shù)是:珠子濃度和兩種標(biāo)記試劑(檢測(cè)試劑和酶偶聯(lián)物)的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個(gè)相互競(jìng)爭(zhēng)的因素。首先,足夠的珠子必須在場(chǎng)以從熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)中捕獲大部分目標(biāo)分析物從熱力學(xué)角度看,100μL中有20萬個(gè)珠子,每個(gè)珠子大約有8萬個(gè)與之結(jié)合的抗體25相當(dāng)于約0.3nM的抗體濃度,在該濃度下,抗體-蛋白平衡導(dǎo)致高捕獲效率(>70%)(D.M.R.,E.P.F.,D.C.D.,未發(fā)表工作)。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,微量檢測(cè),使用微量樣本就能測(cè)試;芯棄疾單分子數(shù)字ELISA檢測(cè)平臺(tái)開發(fā)

芯棄疾單分子數(shù)字ELISA檢測(cè)平臺(tái)開發(fā),數(shù)字ELISA

    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)SiMoA通過將單個(gè)酶產(chǎn)生的熒光團(tuán)限制在極小范圍內(nèi),從而能夠檢測(cè)到非常低濃度的酶標(biāo)記物體積(~50fL),導(dǎo)致熒光產(chǎn)物分子的局部高濃度。為了在免疫測(cè)定中實(shí)現(xiàn)這種定位,在第二步中,將珠子加載到一個(gè)陣列為離散的微升大小的孔(圖1C)。本研究中使用的2毫米寬陣列有~50,000個(gè)孔,孔徑為μm,孔深為μm。加載后的陣列在含有熒光酶底物液滴的情況下,用橡膠密封圈密封。Rissin等人,第3頁將每個(gè)微球隔離在飛升反應(yīng)室中。具有單一酶的微球標(biāo)記的免疫復(fù)合物在50飛升的反應(yīng)室中產(chǎn)生局部高濃度的熒光產(chǎn)物(圖1D)。通過使用標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)獲取陣列的時(shí)間變化熒光圖像,可以區(qū)分與單一酶分子相關(guān)的微球(“開啟”孔)和不與酶相關(guān)的微球(“關(guān)閉”孔);補(bǔ)充圖1顯示了“開啟”和“關(guān)閉”孔的熒光直方圖。成像陣列可以成千上萬的單個(gè)免疫復(fù)合物同時(shí)檢測(cè)。通過測(cè)定供試品中的蛋白質(zhì)濃度來確定計(jì)算含有珠子和熒光產(chǎn)物的孔數(shù)相對(duì)于含有珠子的孔數(shù)(圖1D)。使用SiMoA,濃度是因此,我們稱SiMoA應(yīng)用于檢測(cè)單個(gè)免疫復(fù)合物為數(shù)字ELISA。 進(jìn)口數(shù)字ELISA極速檢測(cè)芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測(cè)產(chǎn)品,每個(gè)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都能用的單分子檢測(cè);

芯棄疾單分子數(shù)字ELISA檢測(cè)平臺(tái)開發(fā),數(shù)字ELISA

 芯棄疾JX-8B單分子ELISA高敏檢測(cè)產(chǎn)品具有開放的優(yōu)勢(shì):

開放:可匹配各種免疫檢測(cè)項(xiàng)目,兼容各種自行開發(fā)的試劑;

測(cè)試結(jié)果:國產(chǎn)普通熒光顯微鏡,科研或預(yù)研場(chǎng)景;

測(cè)試結(jié)果:國產(chǎn)低成本熒光顯微鏡拍攝

我們公司擁有專業(yè)的MEMS、微流控設(shè)計(jì)/加工能力。提供一站式單步工藝或完整器件的設(shè)計(jì)流片。我們提供的服務(wù)有:MEMS微納加工,微流控芯片加工、設(shè)計(jì),高靈敏免疫檢測(cè)產(chǎn)品芯棄疾JX-8B單分子ELISA、單分子檢測(cè)芯片、數(shù)字免疫層析POCT檢測(cè)產(chǎn)品、滴液生成微球制備芯片等。

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,我們?yōu)槭裁茨茏龅??產(chǎn)品主要原理同單分子陣列技術(shù):

非常近,已經(jīng)描述了兩種數(shù)字蛋白質(zhì)測(cè)量方法,這些方法能夠提高對(duì)單分子水平的靈敏度。一種方法依賴于在固相上形成免疫三明治復(fù)合物,然后化學(xué)解離并通過激光計(jì)數(shù)每個(gè)分子。第二種方法由美國開發(fā),依賴于單分子陣列和同時(shí)計(jì)數(shù)單分子捕獲微珠。這兩種方法都能將檢測(cè)能力的下限降低10倍或更多,與增強(qiáng)的模擬放大方法相比,但后者技術(shù)也易于與高通量自動(dòng)化儀器兼容,用于ELISA試劑處理。通過使用大量微孔陣列,可以同時(shí)獲取和查詢數(shù)百到數(shù)萬個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn),實(shí)現(xiàn)快速數(shù)據(jù)采集和穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)。此外,從陣列中可能獲得的快速數(shù)據(jù)采集可以應(yīng)用于預(yù)編碼具有不同熒光特性的多個(gè)微珠亞群,從而在單分子水平上實(shí)現(xiàn)高通量多重分析。 芯棄疾單分子ELISA檢測(cè)試劑盒,多重超敏檢測(cè),多重指標(biāo)也能檢測(cè)到亞皮克級(jí)!

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每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)

由于活性珠子的百分比接近50%(酶與微球的比例大于~1:1.5),然而,使用圖像分析軟件區(qū)分“開啟”和“關(guān)閉”孔變得具有挑戰(zhàn)性,我們達(dá)到了數(shù)字動(dòng)態(tài)范圍的實(shí)際上限。例如,圖2中7fM(~45%活性)的信號(hào)偏離了線性。因此,這里使用50,000個(gè)孔展示的數(shù)字線性動(dòng)態(tài)范圍是從3.5fM到350zM,即大約四個(gè)對(duì)數(shù)單位。前提是蛋白質(zhì)使用適當(dāng)?shù)拿笣舛冗M(jìn)行標(biāo)記,這種動(dòng)態(tài)范圍對(duì)于許多臨床應(yīng)用來說是足夠的 單分子POCT產(chǎn)品,幫您數(shù)字化高靈敏檢測(cè),且微量樣本多重指標(biāo)檢測(cè);生物實(shí)驗(yàn)室數(shù)字ELISA檢測(cè)平臺(tái)開發(fā)

芯棄疾單分子ELISA檢測(cè)盒,微量極速檢測(cè),微量檢測(cè)15min就完成檢測(cè)!芯棄疾單分子數(shù)字ELISA檢測(cè)平臺(tái)開發(fā)

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每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)

數(shù)字ELISA測(cè)量蛋白質(zhì)濃度遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)ELISA的能力源于兩種效應(yīng):1)SiMoA對(duì)酶標(biāo)記的高度敏感性;以及2)通過數(shù)字化蛋白質(zhì)檢測(cè)可以實(shí)現(xiàn)的低背景信號(hào)。任何免疫測(cè)定的靈敏度由其靈敏度決定。檢測(cè)技術(shù)到標(biāo)簽,抗體親和力,試驗(yàn)背景,以及背景測(cè)量值的變異(%CV)27.SiMoA對(duì)酶非常敏感標(biāo)簽(圖2)為在數(shù)字ELISA中檢測(cè)亞飛摩爾濃度的標(biāo)記蛋白提供了基礎(chǔ)。也就是說,對(duì)于給定親和力的抗體,其靈敏度為免疫測(cè)定將由測(cè)定背景決定,SiMoA的高標(biāo)記靈敏度有助于降低這種背景。對(duì)照實(shí)驗(yàn)表明,數(shù)字ELISA的背景來自于檢測(cè)抗體和酶的非特異性結(jié)合(NSB)與捕獲珠表面結(jié)合(補(bǔ)充表2)。AsSiMoA相比傳統(tǒng)檢測(cè)方法具有更高的標(biāo)記靈敏度,明顯減少了檢測(cè)抗體(~1nM)和酶標(biāo)記物(1–50pM)的需要,以檢測(cè)結(jié)合事件,與傳統(tǒng)方法相比(標(biāo)記試劑濃度~10nM)。降低的標(biāo)記物濃度減少了NSB到捕獲表面,從而導(dǎo)致背景信號(hào)明顯降低。 芯棄疾單分子數(shù)字ELISA檢測(cè)平臺(tái)開發(fā)