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皮克級數字ELISA高速檢測

來源: 發(fā)布時間:2024-12-26

芯棄疾JX-8B數字ELISA產品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

我們已經開發(fā)了兩種臨床相關蛋白的檢測方法——前列腺特異性抗原(PSA)和腫瘤壞死因子α(TNF-α),以確定高酶標記物單體提供的靈敏度轉化為高靈敏度的檢測方法血液中的蛋白質。兩種蛋白質的數字ELISA如圖1所示。開發(fā)這些試驗的關鍵參數是:珠子濃度和兩種標記試劑(檢測試劑和酶偶聯(lián)物)的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個相互競爭的因素。首先,足夠的珠子必須在場以從熱力學和動力學中捕獲大部分目標分析物從熱力學角度看,100μL中有20萬個珠子,每個珠子大約有8萬個與之結合的抗體25相當于約0.3nM的抗體濃度,在該濃度下,抗體-蛋白平衡導致高捕獲效率(>70%)(D.M.R.,E.P.F.,D.C.D.,未發(fā)表工作)。 芯棄疾JX-8B數字ELISA,超敏檢測,理論可達飛克級;皮克級數字ELISA高速檢測

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創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數字ELISA

我公司推出的數字化高靈敏ELISA芯片檢測產品應用場景:適合生物實驗室、醫(yī)學實驗室、科研市場、產品預研、產品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應用場景應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。

光纖束購自SchottNorthAmericaouthbri,非增強型光澤硅片購自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人,第7頁鹽酸、無水乙醇和分子生物學級別的吐溫-20均購自西格瑪-奧德里奇(圣路易斯,密蘇里州)。2.7-μm-二羧基磁珠購自瓦里安公司(加利福尼亞州萊克福斯特)。單克隆抗人TNF-α捕獲抗體、多克隆抗人TNF-α檢測試劑和重組人TNF-α均購自R&DSystems(Minneapolis,MN)。單克隆抗PSA捕獲抗體、單克隆抗PSA檢測試劑和純化的PSA購自BiosPacific(埃默里維爾,加利福尼亞州);使用標準方法將檢測試劑抗體生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基磺基琥珀酰亞胺(NHS)和SuperBlock®T-20封閉緩沖液購自ThermoScientific(Rockford,IL)。純化DNA購自綜合DNA技術公司(Coralville,IA)。 醫(yī)學實驗室數字ELISA微量樣本芯棄疾JX-8B數字ELISA,低成本單分子檢測;

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為了證明檢測極低濃度的可能診斷價值使用數字ELISA檢測血液中的蛋白質,對接受治理性前列腺切除術(RP)的患者血清樣本中的PSA進行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標志物病癥既用作篩查工具,也用于監(jiān)測住院患者的復發(fā)接受治理性前列腺切除術28。治理性前列腺切除術后,絕大多數PSA被消除,水平低于標準商用檢測方法的檢測限(3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測這些患者的PSA恢復情況可以檢測前列腺病的復發(fā),但術后幾年內生化復發(fā)可能不會被發(fā)現(xiàn)。

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將200,000個功能化DNA捕獲探針與100μL孵育含有目標DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小時后,移除DNA靶標溶液,用0.2×SSC緩沖液洗滌珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新懸浮并與10nM混合生物素標記的信號探針(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)對目標DNA具有特異性,孵育1小時。然后將珠子在去除信號探針后用含0.1%吐溫-20的0.2×SSC緩沖液洗滌三次。隨后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混勻并混合1小時。然后將珠子分離并在含0.1%吐溫-20的5×PBS緩沖液中洗滌六次。重懸于10μLofPBS中并加載到飛升微升孔陣列上。 芯棄疾JX-8B數字ELISA,微量多重檢測,微量樣本就能同時測試4項指標;

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單分子POCT產品,幫您數字化高靈敏檢測,且微量樣本多重指標檢測;

低成本便捷檢測:數字ELISA芯片,分為手動版和自動版,其中手動版可以直接使用移液槍加液檢測;更少可以使用單片4孔芯片(同時做4個test)、8孔芯片(同時做8個test)進行檢測;(活動期8孔芯片只需要200元即可測試實驗);芯片內只需要微量樣本(10-20ul)即可完成檢測,所需要的試劑量也明顯降低,且每個芯片孔內可同時檢測2-4個檢測指標,分攤下來檢測成本有效降低;其中自動版可搭配小型多通道加樣儀,也可以進行高通量的ELISA芯片同時檢測。1)檢測快速:數字ELISA芯片高敏檢測試劑盒,搭配預埋的磁珠和熒光量子點試劑,整體反應在芯片的微小流道內進行,反應速度快、清洗速度快;更短只需要15-20min,就可以進行完整的檢測流程,接近POCT檢測產品,可以有效節(jié)省您的實驗時間。2)高靈敏檢測數字ELISA高靈敏度檢測芯片,使用單分子免疫檢測的原理(原理同simoa等產品,使用反應微球單分散陣列排布的原理,將反應信號進行單分子單分散檢測),在快速、便捷檢測的同時,仍能保持高靈敏度,常規(guī)指標輕松達到0.2-1pg/ml的靈敏度 7)數字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速進行微量樣本的檢測;皮克級數字ELISA高速檢測

芯棄疾JX-8B數字ELISA,極速檢測,檢測用時只需要 15-30min!皮克級數字ELISA高速檢測

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由于活性珠子的百分比接近50%(酶與微球的比例大于~1:1.5),然而,使用圖像分析軟件區(qū)分“開啟”和“關閉”孔變得具有挑戰(zhàn)性,我們達到了數字動態(tài)范圍的實際上限。例如,圖2中7fM(~45%活性)的信號偏離了線性。因此,這里使用50,000個孔展示的數字線性動態(tài)范圍是從3.5fM到350zM,即大約四個對數單位。前提是蛋白質使用適當的酶濃度進行標記,這種動態(tài)范圍對于許多臨床應用來說是足夠的 皮克級數字ELISA高速檢測