精子檢測是通過一系列檢測方法來評估男性生育能力的指標(biāo)之一。而檢測方法的選擇直接影響到檢測的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性。目前,常用的檢測方法有手動計數(shù)法、顯微鏡計數(shù)法、電子顯微鏡計數(shù)法、精子運動軌跡分析法等。手動計數(shù)法是通過顯微鏡手動計算精液中精子數(shù)量的方法,該方法簡單易行,但因操作者技能不同,容易出現(xiàn)誤差。顯微鏡計數(shù)法是通過顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法,該方法比手動計數(shù)法更加準(zhǔn)確,但需要專業(yè)的技能和經(jīng)驗。電子顯微鏡計數(shù)法是通過電子顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法,該方法非常準(zhǔn)確,但需要昂貴的設(shè)備。精子運動軌跡分析法是通過計算機分析精子運動軌跡來判斷精子活力和數(shù)量的方法,該方法不僅準(zhǔn)確性,而且可以直觀地顯示精子的運動狀態(tài),但需要較為復(fù)雜的技術(shù)。除了以上常見的檢測方法,還有一些新興的檢測方法,如流式細(xì)胞術(shù)、全自動分析系統(tǒng)等。這些檢測方法雖然在檢測精子數(shù)量、活力等方面具有一定優(yōu)勢,但由于技術(shù)上的限制和設(shè)備的昂貴,目前還沒有得到廣泛應(yīng)用。在選擇檢測方法時,需要考慮檢測的目的、檢測的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性等因素。同時,需要選擇正規(guī)的醫(yī)療機構(gòu)進行檢測,避免因設(shè)備不足或技術(shù)不過關(guān)等因素導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差。通過計算機圖像處理功能對顯微鏡下放大的精子圖像進行識別和跟蹤計算,從而得出精子動靜態(tài)各項參數(shù)。南京人精子分析DCL
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點,但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進行**分析應(yīng)注意以下幾點:3.1標(biāo)本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗科。(5)標(biāo)本置于37℃水浴.精子運動參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準(zhǔn)確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進行分析。(7)檢測精子活動力,標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標(biāo)本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。北京瀕危物種精子分析高準(zhǔn)確率?精子分析可以分析參數(shù)有,曲線速率(VCL)?:精子頭沿其實際曲線運動的時均速率。
精子分析儀工作原理
以灰度識別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,**標(biāo)本液化后吸入計數(shù),通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動、靜態(tài)圖像后輸入計算機。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運動移位及運動參數(shù),對采集圖像進行精子密度、活動力、活動率、運動特征等幾十項檢驗項目動態(tài)分析,由計算機處理后,打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個精子進行動態(tài)檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測 [1]。
優(yōu)點:
操作簡便,用量少,檢測速度快,重復(fù)性優(yōu)于人工檢測,并且能夠快速、準(zhǔn)確的測定精子密度、活力、精子分級等,還可提供精子運動狀態(tài)的多種參數(shù)等。
缺點:
影響分析結(jié)果的因素較多,除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,不同的精子計數(shù)池的相對準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。
方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計數(shù)池、Makler計數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結(jié)果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),鞭打頻率(BCF)?:精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率。
Hamilton Thorne IVOS是一套整合了光學(xué)觀察系統(tǒng)的精子動力分析儀。如今,IVOS 已成為快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定可靠的進行精子分析的代名詞。儀器特點:新款內(nèi)建CD Writer!內(nèi)部整合光學(xué)系統(tǒng)自動化,內(nèi)置樣品臺可用于多種樣品分析 儀器操作簡單提供滿足需求的分析結(jié)果實時質(zhì)量控制分析結(jié)果列表內(nèi)部整合的光學(xué)系統(tǒng)IVOS是***一套內(nèi)置光學(xué)系統(tǒng)的精子動力分析儀。與其它同類產(chǎn)品相比,IVOS并不采用顯微鏡持續(xù)照明方式,而是采用閃光拍攝方法。這種拍攝方法能夠消除由于精子運動而造成的位置模糊。通過60禎/秒的拍攝速度,能夠得到準(zhǔn)確可靠的精子速度和運動參數(shù)分析結(jié)果。IVOS可在以下三種模式下分析精子樣品:相差,明場和多波長熒光模式。自動化內(nèi)置加熱平臺作為整合光學(xué)系統(tǒng)的一部分,由計算機控制的IVOS樣品平臺可在分析時提供準(zhǔn)確的溫度控制和位置定位。樣品臺的溫度可在室溫到40°C范圍內(nèi)調(diào)節(jié),穩(wěn)定度為0.5°C。分析區(qū)域的選擇可選用自動或手動方式。樣品臺的溫度和位置可實時顯示在視頻窗口中。IVOS 還允許用戶自己進行分析室設(shè)定,控制分析樣品量。Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡單易懂,用戶無需具備專業(yè)知識也能夠輕松上手使用。北京水生動物精子分析W.H.O 4
WHO第6版明確提出:使用CASA系統(tǒng)須遵循適當(dāng)?shù)某绦虿襟E,才能獲得可靠和可重復(fù)的結(jié)果。南京人精子分析DCL
通過結(jié)果的生物學(xué)意義對結(jié)果質(zhì)量進行評估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運動性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關(guān)性較低]。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進行比較,其結(jié)果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標(biāo)準(zhǔn)來評估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)(授精IVF)的發(fā)展使檢測精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結(jié)果與精子真實質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。南京人精子分析DCL