二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn):1、精漿果糖測(cè)定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L?!九R床意義】(1)精液果糖為0,可見于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,常見于精囊炎和雄***分泌不足,果糖不足可導(dǎo)致精子運(yùn)動(dòng)能量缺乏,甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測(cè)定【正常參考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【臨床意義】(1)精漿酸性磷酸酶含量增高,常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。(2)精漿酸性磷酸酶含量降低,常見于前列腺炎患者。(3)精漿酸性磷酸酶檢測(cè)是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測(cè)定【正常參考值】36.72±21.43U/L。【臨床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān),其活力不足,可導(dǎo)致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測(cè)定【正常參考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L;LDH-X相對(duì)活性:≥0.426?!九R床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性,是精于運(yùn)動(dòng)獲能的關(guān)鍵酶,該酶檢測(cè)可作為診斷男性不育有價(jià)值的指標(biāo)。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失,精子發(fā)生缺陷時(shí)無LDH-X形成,少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。精子分析,平均角位移(MAD)?:精子頭沿其曲線軌跡瞬時(shí)轉(zhuǎn)折角度的時(shí)均J對(duì)值?。北京計(jì)數(shù)精子分析DCL
全自動(dòng)的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出??梢允褂靡淮涡缘暮涂芍貜?fù)的載玻片,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級(jí)。
IVOS能提供:精確、客觀、具有重復(fù)性的結(jié)果。高速分析,在60Hz下半秒掃描30幀,為實(shí)驗(yàn)室節(jié)省成本。 [1]主要功能IVOS自動(dòng)精子活動(dòng)、濃度、形態(tài)分析系統(tǒng)。Hamilton Thorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床、研究實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領(lǐng)域,成為了精液分析業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn)。可以應(yīng)用于包括人類、公牛、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動(dòng)物。在TOX IVOS上有**的大鼠精液分析軟件。 香港濃度精子分析DAP計(jì)算機(jī)輔助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科學(xué)名詞。
精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上,在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量。
將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合,用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,振蕩三分鐘,然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi),計(jì)數(shù)二大格(每格面積1平方毫米)之精子數(shù),在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè),則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時(shí),可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi),稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。如精子的數(shù)目極少,亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來的,因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來反映睪丸的生精機(jī)能。
前沿性檢查:目前不作為生育力低下男性初步評(píng)估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測(cè)技術(shù)。有研究認(rèn)為,氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素;新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(cè)(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊(cè)重寫了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分,強(qiáng)調(diào)了CASA對(duì)于檢測(cè)精子濃度的局限性與質(zhì)控要求,增加了CASA檢測(cè)精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容。對(duì)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此,手冊(cè)新增了檢測(cè)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。精子分析儀與人工方法相比具有客觀,高效,高精度的優(yōu)點(diǎn)。
采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢(mèng)遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對(duì)生精功能有影響的藥物等。采取精液時(shí)間以晨起為佳,采精前用溫水將雙手、**,尤其是**洗凈??刹捎?*法或電動(dòng)按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序,開頭部分來自前列腺、附睪及壺腹,伴有大量精子,***部分來自精囊,故應(yīng)收集整份精液,不要遺漏任何部分,尤其是開頭部分。正因?yàn)橐讈G失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應(yīng)干凈、無菌、干燥,采精前容器的溫度應(yīng)與室溫相同;瓶子不應(yīng)過大,但瓶口不應(yīng)過小,以免將精液射出瓶外;還應(yīng)貼上標(biāo)簽,記錄姓名及取精時(shí)間。在冷天應(yīng)將精液標(biāo)本保溫,放置在貼身內(nèi)衣袋中,不可傾斜或倒置,盡可能在1小時(shí)內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室。計(jì)算機(jī)輔助精子分析根據(jù)初估的精子濃度選擇合適的檢測(cè)方法,確保檢測(cè)過程的準(zhǔn)確性和可靠性?。北京山羊精子分析VAP
不同品牌CASA分析的結(jié)果差異較大,因此,更高效精確的精液質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)促進(jìn)男科學(xué)發(fā)展具有重要的意義。北京計(jì)數(shù)精子分析DCL
精子手工計(jì)數(shù)原理及操作方法
1.原理:將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯?,混勻注入?jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù),再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法(按照***版第四版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》)1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。
3.計(jì)算1).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子少于10個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)所有25個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子在10~40個(gè),應(yīng)計(jì)10個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子多于40個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式:精子數(shù)=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×25×1/計(jì)數(shù)池高度×20×103/ml=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×1/計(jì)數(shù)池高度×5×103/ml 北京計(jì)數(shù)精子分析DCL