采集精液前5~7天內必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。采取精液時間以晨起為佳,采精前用溫水將雙手、**,尤其是**洗凈??刹捎?*法或電動按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序,開頭部分來自前列腺、附睪及壺腹,伴有大量精子,***部分來自精囊,故應收集整份精液,不要遺漏任何部分,尤其是開頭部分。正因為易丟失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應干凈、無菌、干燥,采精前容器的溫度應與室溫相同;瓶子不應過大,但瓶口不應過小,以免將精液射出瓶外;還應貼上標簽,記錄姓名及取精時間。在冷天應將精液標本保溫,放置在貼身內衣袋中,不可傾斜或倒置,盡可能在1小時內送到實驗室。精子分析儀與人工方法相比具有客觀,高效,高精度的優(yōu)點。美國慢速運動精子分析LIN
精子分析儀是計算機技術和圖像處理技術結合的**分析儀器設備,通過顯微鏡下攝像和計算機快速分析多個視野內精子的運行軌跡,客觀記錄了精子的密度、活動力、活動率和存活率等各項參數(shù)。
計算機輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng)、恒溫系統(tǒng)、計算機處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構成。此外,儀器一般配有**樣品盒,以確保單層取樣 [1]。1.顯微攝像系統(tǒng):由顯微鏡及CCD組成??梢詫吮拘盘柾ㄟ^顯微放大由CCD傳輸?shù)接嬎銠C2.圖像采集系統(tǒng):由圖像卡構成,其功能是對CCD信號進行抓拍、識別、預處理后,將成熟信號輸送到計算機。3.恒溫系統(tǒng):由加溫和保溫設備組成。加溫是通過熱吹風機不斷將適宜的溫度熱風鼓入封閉保溫罩內,提供穩(wěn)定、可靠的檢查環(huán)境。4.計算機系統(tǒng):對圖像信號進行***系統(tǒng)的加工處理,對獲得的數(shù)據(jù)進行輸出和存儲的設備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質量分析軟件,利用現(xiàn)代化的計算機識別技術和圖像處理技術,對精子的動靜態(tài)特征進行***的量化分析,對精子的密度、活力、活率、運動軌跡等特征進行量的檢測分析 廣州馬精子分析VCL全自動精子分析儀在臨床Z療中展現(xiàn)了明顯的優(yōu)勢。
擴展性檢查:可以在某些情況下由實驗室選擇或根據(jù)臨床醫(yī)生的特殊要求而使用的項目。手冊增加了精子DNA損傷、遺傳學和炎癥細胞等相關檢查項目。提出了基因突變是導致不育和精液常規(guī)檢查異常的原因。新增了精液相關細胞因子、趨化因子等檢測的方法、試劑、檢測步驟等內容。在精液參數(shù)異常的男性中普遍存在精子DNA損傷,并且已有報道指出其與精液參數(shù)正常男性的不育有關。由于與精液質量相關,精子DNA損傷檢測是男性不育檢查中的重要補充內容,已成為男科學基礎和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標志物之一。本版手冊增加了大量篇幅對其原理和檢測方法進行了描述。新增了基因和基因組測序內容。臨床上,越來越多的人意識到染色體異常[數(shù)量異常、結構異常(包括微缺失和微重復)]和基因突變是導致各種男性不育癥的基礎病因,而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測序常規(guī)在醫(yī)學遺傳學實驗室進行,但一些男科實驗室也在做同樣的檢測。為明確生殖道炎癥對于男性不育的影響,泌尿男科醫(yī)生可能提出對精液中的趨化因子和細胞因子進行評估。本手冊納入了精液中白細胞介素檢測方法。
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽#€可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標準差和中位數(shù),以及對染色的精子頂體區(qū)進行測量[3]。
與人工操作相比,自動化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復性的潛力[4]。精確度和重復性不低于7%[5],這優(yōu)于有經驗的技術人員的手工評估。兩個研究已經提示在CASA結果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結果是預示體外受精率和妊娠率的有意義指標[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關系。Z%和VSL與生育力間的關系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會進一步增加[7]。 Hamilton Thorne精子分析儀具有良好的數(shù)據(jù)管理和報告生成功能,能夠方便用戶查閱和分享分析結果。
Hamilton Thorne精子分析儀IVOS Ⅰ與IVOS Ⅱ一致性比對分析
根據(jù)質量控制的要求,對新精子分析系統(tǒng)進行性能驗證后,應與舊系統(tǒng)進行一致性評價,從而保證檢測結果的準確性。方法:選用原有Hamilton Thorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ為實驗儀器,對精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)進行分析比對。結果:兩臺儀器的方法內和方法間離群值檢驗、偏倚圖和散點圖的線性關系和離群值檢測所有參數(shù)均能符合比對要求,檢測結果具有相關性;對實驗儀器的檢測結果適合范圍的檢驗,當其精子濃度r=0.988,前向運動精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對預期偏倚(Bc)的接受性評價表明當精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當前向運動精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項檢測的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實驗儀器經比對分析顯示符合質控要求。結論:通過比對分析,得出兩臺精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)結果具有可比性,檢測結果一致,可同時用于臨床標本的檢測。 計算機輔助精子分析根據(jù)初估的精子濃度選擇合適的檢測方法,確保檢測過程的準確性和可靠性?。上海魚精子分析VSL
IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件,能夠自動識別和計算精子的各項參數(shù),減少了人工操作的誤差。美國慢速運動精子分析LIN
精子計數(shù)是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,滴于血細胞計數(shù)板上,在顯微鏡下計數(shù)紅細胞計數(shù)區(qū)內的所有精子數(shù)并換算為每m1內所含精子數(shù)。此外還可用電子細胞計數(shù)儀經調整閾值設置后計數(shù)精子數(shù)量。
將已經液化的精液標本均勻混合,用白細胞計數(shù)吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,振蕩三分鐘,然后置于血球計數(shù)板內,計數(shù)二大格(每格面積1平方毫米)之精子數(shù),在尾數(shù)后加5個“0”即得每毫升精液內精子數(shù)。例如計數(shù)為1280個,則每毫升精子應為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時,可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內,稀釋后進行計數(shù)。如精子的數(shù)目極少,亦可改為稀釋10倍計數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來的,因此單憑一次排精的精子計數(shù)來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計數(shù)來反映睪丸的生精機能。 美國慢速運動精子分析LIN