精子分析儀使用注意事項
1.樣品制備是CASA取得高質(zhì)量檢查結(jié)果的關(guān)鍵。CASA采用深度為10um樣品池,能保證精子在單層界面內(nèi)自由運動。取樣分析前標(biāo)本必須充分混勻,用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中,用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。
2.不潔凈的計數(shù)池可影響精子的活力,尤其影響灰度CASA精子計數(shù)的準(zhǔn)確性。
3.精子樣品密度過大時,造成圖像處理上的粘連,無法分析每個精子的運動特性。**中所含精子太少時,需增加檢查視野數(shù)量或者使用低倍物鏡觀察,以提高樣品檢出率。 精子分析儀的出現(xiàn)簡化了檢驗流程,提高了診斷的可靠性,對于提升男性生殖健康領(lǐng)域的Z療效果具有重要作用。北京密度精子分析
CASA系統(tǒng)進行**分析應(yīng)注意以下幾點:
3.2**分析儀閾值的確定(1)精子灰度、對比度閾值:由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)危瑢α炼群蛯Ρ榷纫筇貏e高,檢測時應(yīng)多次試用,尋找能準(zhǔn)確識別精子的比較好灰度閾值[8]。(2)碎片:測定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾,測定活動精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9],這些也是需要注意的。對于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分,如精原細(xì)胞、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等,可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果。3.4對于無精子的患者應(yīng)仔細(xì)進行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計數(shù)在內(nèi),應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后,再涂片檢查,確認(rèn)無精后再出報告。 廣州全自動化精子分析W.H.O 5不同品牌CASA分析的結(jié)果差異較大,因此,更高效精確的精液質(zhì)量檢測系統(tǒng)對促進男科學(xué)發(fā)展具有重要的意義。
方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計數(shù)池、Makler計數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結(jié)果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法。
Hamilton Thorne精子分析儀IVOS Ⅰ與IVOS Ⅱ一致性比對分析
根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對新精子分析系統(tǒng)進行性能驗證后,應(yīng)與舊系統(tǒng)進行一致性評價,從而保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。方法:選用原有Hamilton Thorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ為實驗儀器,對精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)進行分析比對。結(jié)果:兩臺儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗、偏倚圖和散點圖的線性關(guān)系和離群值檢測所有參數(shù)均能符合比對要求,檢測結(jié)果具有相關(guān)性;對實驗儀器的檢測結(jié)果適合范圍的檢驗,當(dāng)其精子濃度r=0.988,前向運動精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對預(yù)期偏倚(Bc)的接受性評價表明當(dāng)精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當(dāng)前向運動精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項檢測的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實驗儀器經(jīng)比對分析顯示符合質(zhì)控要求。結(jié)論:通過比對分析,得出兩臺精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)結(jié)果具有可比性,檢測結(jié)果一致,可同時用于臨床標(biāo)本的檢測。 Hamilton Thorne精子分析儀采用先進的光學(xué)成像,能夠?qū)崟r分析精子的動力學(xué)參數(shù),提供有效的精子質(zhì)量評估。
采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。采取精液時間以晨起為佳,采精前用溫水將雙手、**,尤其是**洗凈。可采用**法或電動按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序,開頭部分來自前列腺、附睪及壺腹,伴有大量精子,***部分來自精囊,故應(yīng)收集整份精液,不要遺漏任何部分,尤其是開頭部分。正因為易丟失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應(yīng)干凈、無菌、干燥,采精前容器的溫度應(yīng)與室溫相同;瓶子不應(yīng)過大,但瓶口不應(yīng)過小,以免將精液射出瓶外;還應(yīng)貼上標(biāo)簽,記錄姓名及取精時間。在冷天應(yīng)將精液標(biāo)本保溫,放置在貼身內(nèi)衣袋中,不可傾斜或倒置,盡可能在1小時內(nèi)送到實驗室。精子分析儀節(jié)省時間,提高實驗室的工作效率,讓醫(yī)生和科研人員更快速地獲取實驗分析結(jié)果。廣州水生動物精子分析DSL
IVOS已成為快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定可靠的進行精子分析的代名詞。北京密度精子分析
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽?,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù),以及對染色的精子頂體區(qū)進行測量[3]。
與人工操作相比,自動化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗的技術(shù)人員的手工評估。兩個研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會進一步增加[7]。 北京密度精子分析