CASA系統雖然有諸多優(yōu)點,但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準確性。CASA系統進行**分析應注意以下幾點:3.1標本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設計的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內送檢驗科。(5)標本置于37℃水浴.精子運動參數具有溫度敏感性,因此要求計數池應于分析儀恒溫板上預溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進行分析。(7)檢測精子活動力,標本密度應控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現錯誤的結果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標本。WHO第6版明確提出:使用CASA系統須遵循適當的程序步驟,才能獲得可靠和可重復的結果。美國山羊精子分析ALH
世界衛(wèi)生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》于1980年***出版,以滿足臨床與科研對人類精液標準化檢測程序日益增長的需求。該手冊是人類精液實驗室檢查和處理程序及方法的標準操作指南,旨在提高精液分析的質量和提高不同實驗室結果的可比性。在過去40年里,該手冊進行了4次修訂與補充(1987年、1992年、1999年和2010年),內容涉及精液檢查的標準化操作程序、精子功能、精漿生化、精液處理與冷凍以及質量保證等,已成為國際公認的標準,被世界各地臨床和實驗室***使用。中國衛(wèi)生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術規(guī)范。WHO《人類精液檢查與處理實驗室手冊(第5版)》精液參考值的數據是來自全球3大洲8個國家的前瞻性、多中心臨床研究的結果,通過循證醫(yī)學研究獲得的精液參數參考值具有里程碑式意義。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一,即使在**近幾年其下載量也在穩(wěn)步增長。它是男科實驗室及全球范圍內開展精液分析操作的其他實驗室、醫(yī)院和研究機構使用的標準操作手冊。該手冊在國際大會、科學會議、以及WHO合作中心、專業(yè)學會和其他學術機構的培訓項目中進行了***傳播。截止到2021年,已被3000余篇同行評議論文和評論引用。人精子分析VSLHamilton Thorne精子分析儀具有良好的數據管理和報告生成功能,能夠方便用戶查閱和分享分析結果。
全自動的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質量數據輸出。可以使用一次性的和可重復的載玻片,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級。
IVOS能提供:精確、客觀、具有重復性的結果。高速分析,在60Hz下半秒掃描30幀,為實驗室節(jié)省成本。 [1]主要功能IVOS自動精子活動、濃度、形態(tài)分析系統。Hamilton Thorne的CASA系統適用于臨床、研究實驗室、動物繁殖基地、水產業(yè)、制藥公司等各種領域,成為了精液分析業(yè)的金標準??梢詰糜诎ㄈ祟悺⒐?、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動物。在TOX IVOS上有**的大鼠精液分析軟件。
CASA可將每個精子的活力按以下分級:(1)前向運動型(PR):精子運動活躍、線性運動或者在較大的范圍內運動。(2)非前向運動型(NP):所有其他非前向運動的形式,如精子在較小的范圍內運動,精子頭部輕微移位或只觀察到尾部擺動。(3)完全不動型(IM):精子完全不動。CASA系統檢測的這些參數有一套標準的術語。(1)VCL=曲線速度(mm/s)。精子頭沿其實際的曲線,即在顯微鏡下見到的二維方式運動軌跡的平均速度。檢測細胞活力。(2)VSL=直線速度(mm/s)。根據精子頭在開始檢測時的位置與***所處位置之間的直線運動的時間平均速度。(3)VAP=平均路徑速度(mm/s)。精子頭沿其空間平均軌跡移動的時間平均速度。(4)ALH=精子頭側擺幅度(mm)。精子頭沿其空間平均軌跡側擺的幅度。以側擺的最大值或平均數值表示。(5)LIN=直線性。曲線軌跡的直線性。即VSL/VCL。(6)WOB=擺動性。精子頭沿其實際軌跡的空間平均路徑擺動的尺度。即VAP/VCL。(7)STR=前向性??臻g平均路徑的直線性。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打頻率(Hz)。精子曲線軌跡越過其平均路徑軌跡的時間平均速率。(9)MAD=平均移動角度(度)。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉折角度的時間平均***值。精子分析儀參數,平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。
精液一般檢查
(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)顏色和透明度:正常剛射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黃色。鮮紅色或暗紅色的血精見于生殖系統炎癥、結核、和**,黃色膿樣精液,見于精囊炎或前列腺炎。(3)粘稠度和液化:正常新鮮的精液排出后數秒呈粘稠膠凍狀,在精液中纖溶酶的作用下30分鐘后開始液化。如果粘稠度降低呈米湯樣,可能是精子數量減少,見于生殖系統炎癥,精液不凝固見于精囊阻塞或損傷;如果精液1小時后不液化,可能是由于炎癥破壞纖溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活動力而影響受孕。(4)酸堿度:pH值。正常精液呈弱堿性pH7.2~8.0,以利于中和酸性的陰道分泌物,pH值小于7或大于8都能影響精子的活動和代謝,不利于受孕。 所有操作人員都應接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓,嚴格按照使用指南進行操作?。美國濃度精子分析VAP
Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度、高效率和自動化的優(yōu)點。美國山羊精子分析ALH
1.基本檢查:是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法,不僅是男科實驗室,任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數依然推薦使用改良Neubauer血細胞計數板的方法,但計數的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法,伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數據表明,鑒別快速前向運動精子非常重要。因此,關于精子活力分級,第6版手冊建議恢復到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別,但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調,精子形態(tài)學評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(ART)結局的預后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正常”形態(tài)率的判斷,則要求必須由訓練有素的人員評估1500個精子來完成;對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數20%的精液,應單獨計算并在報告中注明;美國山羊精子分析ALH