精子檢測是通過一系列檢測方法來評估男性生育能力的指標(biāo)之一。而檢測方法的選擇直接影響到檢測的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性。目前，常用的檢測方法有手動計(jì)數(shù)法、顯微鏡計(jì)數(shù)法、電子顯微鏡計(jì)數(shù)法、精子運(yùn)動軌跡分析法等。手動計(jì)數(shù)法是通過顯微鏡手動計(jì)算精液中精子數(shù)量的方法，該方法簡單易行，但因操作者技能不同，容易出現(xiàn)誤差。顯微鏡計(jì)數(shù)法是通過顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法，該方法比手動計(jì)數(shù)法更加準(zhǔn)確，但需要專業(yè)的技能和經(jīng)驗(yàn)。電子顯微鏡計(jì)數(shù)法是通過電子顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法，該方法非常準(zhǔn)確，但需要昂貴的設(shè)備。精子運(yùn)動軌跡分析法是通過計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動軌跡來判斷精子活力和數(shù)量的方法，該方法不僅準(zhǔn)確性，而且可以直觀地顯示精子的運(yùn)動狀態(tài)，但需要較為復(fù)雜的技術(shù)。除了以上常見的檢測方法，還有一些新興的檢測方法，如流式細(xì)胞術(shù)、全自動分析系統(tǒng)等。這些檢測方法雖然在檢測精子數(shù)量、活力等方面具有一定優(yōu)勢，但由于技術(shù)上的限制和設(shè)備的昂貴，目前還沒有得到廣泛應(yīng)用。在選擇檢測方法時，需要考慮檢測的目的、檢測的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性等因素。同時，需要選擇正規(guī)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測，避免因設(shè)備不足或技術(shù)不過關(guān)等因素導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差。CASA系統(tǒng)減少了人為因素對檢測結(jié)果的影響，提高了檢測的客觀性和可重復(fù)性?。香港綿羊精子分析W.H.O 4

精液檢查前有什么注意事項(xiàng)？

一、留精液前，病人應(yīng)停止**4～7天。檢查前1周不能用丙酸睪丸酮、**睪丸酮、苯丙酸諾龍。采取精液時，可用軟皂或石蠟油做**按摩，將標(biāo)本收集在無菌的試管中；也可用避孕套（沖洗干凈，不含殺精子藥物）或采用**中斷法收集精液，但這樣收集的量往往不多。如用上述方法采不到精液，可經(jīng)直腸內(nèi)按摩精囊及輸精管末端、壓迫采尿，檢查沉渣中有無精子。不要將精液暴露在過熱和過冷的環(huán)境中。及時交給醫(yī)生備查，不得超過30分鐘。冷天要注意保暖，送檢時可放在內(nèi)衣口袋里保溫。

二、如果要進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，應(yīng)先沖洗、消毒尿道口，再將精液收集在無菌試管中。夫妻同居3年以上，沒有采取任何避孕措施而未能受孕的稱不孕癥。如果是不孕癥，在雙方未進(jìn)行檢查前，不能盲目懷疑某一方，更不能認(rèn)為不孕的原因是女方。妊娠是夫妻雙方的事。實(shí)現(xiàn)受孕，男方的精液含量應(yīng)正常，形態(tài)和動力也應(yīng)正常。女方能正常排卵，精子和卵子能結(jié)合成受精卵，這種受精卵能在子宮內(nèi)膜種植。上述的幾個環(huán)節(jié)中的某一個環(huán)節(jié)發(fā)生障礙，都可引起不孕。

三、如果上述檢查結(jié)果精液是正常的，女方也應(yīng)去醫(yī)院檢查，包括全身情況、生殖***、卵巢排卵功能、輸卵管通暢否、免疫檢查。 香港Hamilton Thorne精子分析精子分析儀能分析與精子運(yùn)動功能相關(guān)的各種參數(shù)。

二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn)：1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L?！九R床意義】（1）精液果糖為0，可見于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常見于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可導(dǎo)致精子運(yùn)動能量缺乏，甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【臨床意義】（1）精漿酸性磷酸酶含量增高，常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。（2）精漿酸性磷酸酶含量降低，常見于前列腺炎患者。（3）精漿酸性磷酸酶檢測是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L?！九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān)，其活力不足，可導(dǎo)致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相對活性：≥0.426。【臨床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性，是精于運(yùn)動獲能的關(guān)鍵酶，該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標(biāo)。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失，精子發(fā)生缺陷時無LDH-X形成，少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。

CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：

3.2**分析儀閾值的確定（1）精子灰度、對比度閾值：由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)危瑢α炼群蛯Ρ榷纫筇貏e高，檢測時應(yīng)多次試用，尋找能準(zhǔn)確識別精子的比較好灰度閾值[8]。（2）碎片：測定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾，測定活動精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9]，這些也是需要注意的。對于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分，如精原細(xì)胞、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等，可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果。3.4對于無精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計(jì)數(shù)在內(nèi)，應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后，再涂片檢查，確認(rèn)無精后再出報告。 Hamilton Thorne精子分析儀具有良好的數(shù)據(jù)管理和報告生成功能，能夠方便用戶查閱和分享分析結(jié)果。

美國Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國內(nèi)外毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室所使用。本試驗(yàn)研究目的對精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在大鼠附睪精子計(jì)數(shù)結(jié)果的比較驗(yàn)證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計(jì)數(shù)進(jìn)行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實(shí)施安樂死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預(yù)熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進(jìn)行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOX IVOS精子分析儀載物臺,進(jìn)行精子計(jì)數(shù),同時吸取稀釋后的精子懸液滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi),通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù),比較兩種計(jì)數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的精子計(jì)數(shù)結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。結(jié)論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價值。?精子分析可以分析參數(shù)有，曲線速率（VCL）?：精子頭沿其實(shí)際曲線運(yùn)動的時均速率。上海Hamilton Thorne精子分析負(fù)相差

CASA系統(tǒng)通過計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動參數(shù)，能夠提供精確的量化數(shù)據(jù)，優(yōu)于人工檢測方法。香港綿羊精子分析W.H.O 4

精子分析儀工作原理

以灰度識別CASA為例，采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合，**標(biāo)本液化后吸入計(jì)數(shù)，通過顯微鏡放大后，用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動、靜態(tài)圖像后輸入計(jì)算機(jī)。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運(yùn)動移位及運(yùn)動參數(shù)，對采集圖像進(jìn)行精子密度、活動力、活動率、運(yùn)動特征等幾十項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目動態(tài)分析，由計(jì)算機(jī)處理后，打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個精子進(jìn)行動態(tài)檢測分析，2-3分鐘即可完成檢測 [1]。

優(yōu)點(diǎn)：

操作簡便，用量少，檢測速度快，重復(fù)性優(yōu)于人工檢測，并且能夠快速、準(zhǔn)確的測定精子密度、活力、精子分級等，還可提供精子運(yùn)動狀態(tài)的多種參數(shù)等。

缺點(diǎn)：

影響分析結(jié)果的因素較多，除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外，不同的精子計(jì)數(shù)池的相對準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。 香港綿羊精子分析W.H.O 4