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北京壓電胚胎干細(xì)胞

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-03-25

?壓電破膜儀在生殖中的應(yīng)用主要是通過(guò)壓電效應(yīng)進(jìn)行細(xì)胞穿孔,以便進(jìn)行隨后的顯微注射和操作,從而提高各種操作的成功率?。壓電破膜儀利用壓電元件產(chǎn)生的驅(qū)動(dòng)力,可以良好地穿刺各類樣品,如哺乳動(dòng)物的卵母細(xì)胞和胚胎,用于ICSI(胞漿內(nèi)單精子注射)等操作。這種技術(shù)操作溫和,樣品無(wú)變形,刺破細(xì)胞膜時(shí)無(wú)細(xì)胞質(zhì)抽吸或攪動(dòng),操作簡(jiǎn)單且安全可靠?。在生殖醫(yī)學(xué)中,壓電破膜儀的具體應(yīng)用包括:?卵胞質(zhì)內(nèi)單精子注射?:通過(guò)壓電脈沖穿透卵子的透明帶,將單精子注入卵胞質(zhì)內(nèi),完成受精過(guò)程。這種方法適用于高齡女性或精子質(zhì)量較差的情況,能夠降低卵子退化率,提高卵子正常受精率和胚胎成活率?。?胚胎移植?:在胚胎移植手術(shù)中,壓電破膜儀可以幫助精確地將胚胎注入母體子宮,提高移植成功率?。這些應(yīng)用不僅提高了生殖醫(yī)學(xué)中的操作成功率,還為高齡女性和其他生育困難的患者提供了更多的生育機(jī)會(huì)。PMM PIEZO-ICSI的廣泛應(yīng)用將極大地推動(dòng)輔助生殖技術(shù)的發(fā)展,為不孕不育患者提供更多的選擇和機(jī)會(huì)。北京壓電胚胎干細(xì)胞

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有一類十分有趣的晶體,當(dāng)你對(duì)它擠壓或拉伸時(shí),它的兩端就會(huì)產(chǎn)生不同的電荷。這種效應(yīng)被稱為壓電效應(yīng)。能產(chǎn)生壓電效應(yīng)的晶體就叫壓電晶體。水晶(α-石英)是一種有名的壓電晶體。如果按一定方向?qū)λЬw上切下的薄片施加壓力,那么在此薄片上將會(huì)產(chǎn)生電荷。如果按相反方向拉伸這一薄片,在此薄片上也會(huì)出現(xiàn)電荷,不過(guò)符號(hào)相反。擠壓或拉伸的力愈大,晶體上的電荷也會(huì)愈多。如果在薄片的兩端鍍上電極,并通以交流電,那么薄片將會(huì)作周期性的伸長(zhǎng)或縮短,即開(kāi)始振動(dòng)。這種逆壓電效應(yīng)在科學(xué)技術(shù)中已得到了廣泛的應(yīng)用。用水晶可以制作壓電石英薄片,其面積不過(guò)數(shù)平方毫米,厚度則只有零點(diǎn)幾毫米。別小看這小小的晶片,它在無(wú)線電技術(shù)中卻發(fā)揮著巨大作用。如前所述,在交變電場(chǎng)中,這種薄片的振動(dòng)頻率絲毫不變。這種穩(wěn)定不變的振動(dòng)正是無(wú)線電技術(shù)中控制頻率所必須的,你家中的彩色電視機(jī)等許多電器設(shè)備中都有用壓電晶片制作的濾波器,保證了圖像和聲音的清晰度。你手上戴的石英電子表中有一個(gè)**部件叫石英振子。就是這個(gè)關(guān)鍵部件保證了石英表比其他機(jī)械表更高的走時(shí)準(zhǔn)確度。北京透明帶打孔壓電胚胎干細(xì)胞PRIME TECH 公司生產(chǎn)的PMM 150FU為全世界較早的壓電破膜儀。

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在正常受精過(guò)程中,精子進(jìn)入卵子后,會(huì)導(dǎo)致卵細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度發(fā)生持續(xù)數(shù)小時(shí)的周期性的短暫升高,這個(gè)過(guò)程被稱為卵子的“鈣震蕩”,鈣震蕩會(huì)引發(fā)大量生化反應(yīng)事件,代謝活動(dòng)重新活躍起來(lái),這個(gè)過(guò)程稱為卵子***。精子***后的卵子會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高,皮質(zhì)反應(yīng),透明帶反應(yīng)等,然后卵子完成第二次減數(shù)分裂,排出第二極體,開(kāi)啟后續(xù)的胚胎發(fā)育過(guò)程。第二代試管嬰兒(ICSI)授精后,成熟卵子見(jiàn)不到2原核的受精標(biāo)志,稱為ICSI完全受精失敗。ICSI受精失敗在ICSI周期中比例約為1%-3%,其中30%的夫婦會(huì)發(fā)生反復(fù)持續(xù)的受精失敗,是臨床中極其棘手的難題。即使是經(jīng)驗(yàn)豐富的胚胎學(xué)家,也無(wú)法避免這種情況。卵母細(xì)胞***失敗是ICSI受精失敗的主要原因之一。

PMM可用于移去卵細(xì)胞內(nèi)的染色體,它可以用平口針迅速的穿透透明帶,而無(wú)須用尖頭針。含有染色體的細(xì)胞質(zhì)會(huì)混進(jìn)洗液管,通過(guò)透明帶的孔抽取出來(lái)。PMM和傳統(tǒng)方法相比提高了速度和準(zhǔn)確率,也就是說(shuō)增加了效率。細(xì)胞核顯微注射Piezo可以輕易破壞核的細(xì)胞質(zhì)膜收集核,利用平口針灸可以一次注射1個(gè)或更多的核。針在膜的表面形成一個(gè)較深的內(nèi)陷,piezo就很容易破膜將核注射進(jìn)去。胚胎干細(xì)胞顯微注射PMM與傳統(tǒng)尖頭針相比可促進(jìn)ES細(xì)胞注射入胚泡,甚至可以穿透和部分破壞內(nèi)細(xì)胞群,增加ES細(xì)胞的作用。平口針的頂端直徑為8-12um,大約可裝15個(gè)ES細(xì)胞,用中、低檔能量的脈沖,PMM即可穿透細(xì)胞群,用低能量的多次脈沖,針可穿透滋養(yǎng)外胚層(TE)。卵母細(xì)胞胞漿內(nèi)單精子顯微注射PMM通過(guò)將精子尾部與頭部割離,精子頭部吸入平口針,在中低檔能量下即可穿透透明帶,進(jìn)行單精子顯微注射。增加了速度和準(zhǔn)確率,PMM為轉(zhuǎn)基因鼠高效率的產(chǎn)品。與傳統(tǒng)方法相比,Piezo增加了顯微注射的速度和準(zhǔn)確率,利用MII轉(zhuǎn)基因的方法很有效的生成轉(zhuǎn)基因鼠。Piezo-ICSI 相比常規(guī) ICSI方法,可有效提高ICSI受精率。

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Piezo-ICSI程序:使用直徑100-mm的細(xì)胞培養(yǎng)皿上蓋,準(zhǔn)備操作盤(pán);按照Piezo操作系統(tǒng)的要求,將4μL左右的汞從后部裝入注射針中,輕輕將汞推至針尖處,在20-25℃室溫下,準(zhǔn)備進(jìn)行顯微操作。具體操作前,首先取10枚卵母細(xì)胞置于15L含3%suerose的HEPES-CZB操作滴中備用;然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+12%PVP-360操作滴充分混合;再將單個(gè)精子從尾部吸入注射針,用Piezo脈沖從頸部斷開(kāi)頭和尾;連續(xù)剪切5個(gè)精子后,將吸入全部精子頭的注射針轉(zhuǎn)移到放置卵母細(xì)胞的操作滴中,準(zhǔn)備將精子頭逐個(gè)注射至卵母細(xì)胞質(zhì)中。注射時(shí),從時(shí)鐘9點(diǎn)的方向吸住卵母細(xì)胞,使紡錘體保持在6點(diǎn)或12點(diǎn)的位置,從3點(diǎn)的方向輕輕進(jìn)針,同時(shí)用Piezo脈沖擊穿透明帶,將透明帶碎片吹出注射針的同時(shí),將精子頭吹至針尖處,繼續(xù)進(jìn)針,直至針尖插入卵母細(xì)胞深處,幾乎貼近對(duì)側(cè)質(zhì)膜時(shí),用Piezo弱脈沖擊穿卵母細(xì)胞質(zhì)膜,將精子頭吐出,回吸注入卵內(nèi)多余的操作液,輕輕退針,完成一次注射。依次操作,盡快實(shí)現(xiàn)該批卵母細(xì)胞的注射,室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎,并且移入CO?箱培養(yǎng)。依法進(jìn)行第二批卵母細(xì)胞的精子頭注射,在注射HCG后17h,完成全部卵母細(xì)胞的精子注射。通過(guò)使用壓電破膜儀 PMM PIEZO-ICSI,醫(yī)生可以更加準(zhǔn)確地選擇和捕捉精子,提高受孕的幾率。深圳PMM 壓電平口針

壓電顯微操作儀PMM 6可用于牛卵母細(xì)胞和胚胎的ICSI等實(shí)驗(yàn)。北京壓電胚胎干細(xì)胞

雖然Piezo-ICSI對(duì)于大齡試管準(zhǔn)媽媽們的***來(lái)說(shuō)非常有意義,但這項(xiàng)技術(shù)的使用卻對(duì)生殖中心有著比較高的門(mén)檻。日本英醫(yī)院擁有三臺(tái)Piezo-ICSI儀器,儀器的顯微鏡來(lái)自日本精工企業(yè),手動(dòng)精密操作臺(tái)來(lái)自德國(guó)。作為**精密儀器,它的每一個(gè)組件成本都達(dá)百萬(wàn),整體造價(jià)超過(guò)千萬(wàn)。使用Piezo-ICSI不單單是設(shè)備升級(jí),對(duì)培養(yǎng)師的操作要求和難度也是直線升級(jí)的。具體說(shuō)來(lái),因?yàn)槭芫僮魇窃诟弑讹@微鏡下利用操作桿來(lái)進(jìn)行的,需要培養(yǎng)師同時(shí)配合操作觀察操作桿、顯微鏡、受精針和顯示屏。這么聽(tīng)起來(lái)是不是感覺(jué)難度似乎還可以?然而事實(shí)上,在操作的過(guò)程中,培養(yǎng)師需要不斷的進(jìn)行距離判斷的「切換」:想象一下,**挪動(dòng)1cm,鏡下實(shí)際只會(huì)挪動(dòng)0.1mm,但出現(xiàn)在視野中的范圍,實(shí)際上會(huì)有5cm那么大!北京壓電胚胎干細(xì)胞