論述
來自異源系統(tǒng)(如大腸桿菌)的蛋白質(zhì)表達(dá)是許多研究領(lǐng)域的重要工具。在這里,我們闡述了fluidlabR-300對于P450酶表達(dá)質(zhì)量評估是如何完成的。使用該工具和標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)物質(zhì)可以評估到所產(chǎn)生的酶的純度和血紅素?fù)饺氤潭戎挥?3%。我們可以得出結(jié)論,三組數(shù)據(jù)極為接近。首先,所表達(dá)的P450氧化還原酶*為Bradford試驗測定的肽總庫的一小部分,該部分可以使用SDS-PAGE或甚至質(zhì)譜分析來測定。其次,細(xì)胞裂解物未經(jīng)離心產(chǎn)生高雜質(zhì),光譜中可以看見在實際含血紅素部分附近有一個近紫外峰。細(xì)菌細(xì)胞對FeCl3和δ-氨基乙酰丙酸的攝取可能需要監(jiān)測或至少改變,以通過將酶轉(zhuǎn)移到所需的小部分來改善血紅素的摻入。監(jiān)測也可以通過光譜法進(jìn)行,使用例如鐵鋅作為比色測定的螯合劑??傮w而言,本次質(zhì)量評估的所有步驟都是通過手持設(shè)備完成的,這使得例如在生產(chǎn)環(huán)境中的質(zhì)量控制直接可行,而無需將任何方法轉(zhuǎn)移到另一個分析系統(tǒng)。 fluidlab R-300便攜式OD600測定儀細(xì)胞計數(shù)儀。河北智能化fluidlabR-300便攜式細(xì)胞計數(shù)儀廠家供應(yīng)
luidlab R-300細(xì)胞計數(shù)器覆蓋了很大的濃度范圍
fluidlabR-300可以自動計數(shù)細(xì)胞的濃度范圍(104-107細(xì)胞/mL)。為評估線性性能,與競品相比較,對三種不同細(xì)胞類型(HeLa,PBMCs,酵母)的樣品進(jìn)行連續(xù)稀釋,覆蓋到規(guī)定的濃度范圍進(jìn)行測試。圖2顯示了使用fluidlabR-300獲得的三種不同細(xì)胞系的細(xì)胞計數(shù),并與競品進(jìn)行了比較。高線性度(如線性回歸的R2值所示)表明,fluidlabR-300細(xì)胞計數(shù)器在寬線性工作范圍可穩(wěn)定地檢測和計數(shù)不同類型的細(xì)胞。此外,用fluidlabR-300測得的細(xì)胞總數(shù)與競品相當(dāng)(線性擬合的斜率接近1)。圖二::fluidlabR-300在大濃度范圍內(nèi)的不同細(xì)胞類型具有高線性。為了評估fluidlabR-300與競品比較的線性性能,對三個重復(fù)的不同濃度的HeLa細(xì)胞,PBMCs和酵母在三個不同的天進(jìn)行了測量。所有的測量結(jié)果用一個標(biāo)稱濃度表示,在所有重復(fù)中取平均值(N=9),并計算標(biāo)準(zhǔn)差以評估變異性。競品執(zhí)行同樣操作。誤差線表示標(biāo)準(zhǔn)差。 山西品質(zhì)fluidlabR-300便攜式細(xì)胞計數(shù)儀供應(yīng)fluidlab R-300便攜式分光光度計哪里有?
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細(xì)胞計數(shù)儀
通過全息顯微鏡進(jìn)行無標(biāo)記的生存力測量
具有高統(tǒng)計顯著性的大視場所需樣本量小(4-20μl)
光譜儀
從375到700nm記錄的全光譜圖
無需維護(hù)和重新校準(zhǔn)便攜式和小型
fluidlab R-300 使用數(shù)字全息顯微鏡 (DHM) 的無標(biāo)記技術(shù)直接在細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中分析細(xì)胞數(shù)量和活力。與明場顯微鏡相反,DHM 不使用光學(xué)透鏡,而是生成所謂的細(xì)胞“全息圖”,由計算機(jī)進(jìn)行分析。
德國anvajo fluidlab R-300便攜式生長曲線測定儀
fluidlabr-300使用全息顯微技術(shù)和機(jī)器學(xué)習(xí)算法獲得準(zhǔn)確可靠的細(xì)胞計數(shù)
介紹方法
細(xì)胞樣品制備hela細(xì)胞在DMEM中培養(yǎng),通過胰蛋白酶化從瓶的表面分離。為了在細(xì)胞計數(shù)驗證過程中盡量減少樣品的變異,HeLa細(xì)胞以~106細(xì)胞/mL的濃度在冰凍培養(yǎng)基(10%DMSO,20%FBS,DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基)中小等分冷凍,并在-20°C保存。
同樣,酵母細(xì)胞(釀酒酵母菌)在酵母培養(yǎng)基(NaCI?蛋白胨緩沖液和蔗糖)中,在20℃下生長2天,以~107個細(xì)胞/mL的濃度在15%甘油(v/v)的水中小等份凍存在-20℃。 fluidlab R-300便攜式生長曲線測定儀哪里有?
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重現(xiàn)性測量的可重復(fù)性是評估設(shè)備(特別是樣品通道)的機(jī)械公差的影響、光譜測量隨時間的穩(wěn)定性和測量值記錄的準(zhǔn)確性的一個重要因素。在這方面,美國藥典規(guī)定每種情況下至少6次測量,不高于0.005的標(biāo)準(zhǔn)偏差或消光值的0.5%。使用全部的參考玻璃濾光片這些值可以很容易地實現(xiàn)。表2顯示了n=10的重復(fù)測量值表2:參考玻璃濾光片的重復(fù)性測量。所有測量系列的標(biāo)準(zhǔn)偏差均低于規(guī)定的極限值0.005,因此符合美國藥典(n=10)。 德國anvajo fluidlab R-300便攜式OD600測定儀。山西品質(zhì)fluidlabR-300便攜式細(xì)胞計數(shù)儀供應(yīng)
細(xì)胞計數(shù)儀的工作原理。河北智能化fluidlabR-300便攜式細(xì)胞計數(shù)儀廠家供應(yīng)
自動化細(xì)胞計數(shù)
結(jié)果
為了突出fluidlabR-300在自動細(xì)胞計數(shù)方面的多功能性,我們在三種不同形態(tài)和大小的細(xì)胞類型上測試了fluidlabR-300的性能(圖1)。HeLa細(xì)胞是***個在生物學(xué)和臨床研究中仍然普遍使用的不朽人類細(xì)胞系。根據(jù)不同的培養(yǎng)條件,HeLa細(xì)胞的直徑通常為20-40μm范圍內(nèi)。相比之下,外周血單核細(xì)胞(PBMCs)是小的人體細(xì)胞之一,直徑約為7-10μm。PBMCs是一種常見的原代細(xì)胞源,用于臨床診斷和免疫學(xué)的研究。使用傳統(tǒng)的細(xì)胞計數(shù)方法來精確量化原代細(xì)胞樣本的細(xì)胞濃度是具有挑戰(zhàn)性的,因為它們通常含有不同的細(xì)胞類型及細(xì)胞碎片。我們使用平均大小約為5μm的酵母細(xì)胞(釀酒酵母)來評估在非常小的細(xì)胞上進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)的性能。酵母是分子和細(xì)胞生物學(xué)中研究**深入的真核生物模式生物之一,但它對啤酒釀造的發(fā)酵過程和葡萄酒工業(yè)也至關(guān)重要 河北智能化fluidlabR-300便攜式細(xì)胞計數(shù)儀廠家供應(yīng)
上海怡賽科學(xué)儀器有限公司成立于2014-07-08,位于滬松公路2299號蘇式商務(wù)大樓409室,公司自成立以來通過規(guī)范化運營和高質(zhì)量服務(wù),贏得了客戶及社會的一致認(rèn)可和好評。公司主要產(chǎn)品有大龍,洗瓶機(jī),厭氧工作站,旋光儀等,公司工程技術(shù)人員、行政管理人員、產(chǎn)品制造及售后服務(wù)人員均有多年行業(yè)經(jīng)驗。并與上下游企業(yè)保持密切的合作關(guān)系。怡賽集中了一批經(jīng)驗豐富的技術(shù)及管理專業(yè)人才,能為客戶提供良好的售前、售中及售后服務(wù),并能根據(jù)用戶需求,定制產(chǎn)品和配套整體解決方案。上海怡賽科學(xué)儀器有限公司通過多年的深耕細(xì)作,企業(yè)已通過儀器儀表質(zhì)量體系認(rèn)證,確保公司各類產(chǎn)品以高技術(shù)、高性能、高精密度服務(wù)于廣大客戶。歡迎各界朋友蒞臨參觀、 指導(dǎo)和業(yè)務(wù)洽談。