要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制，務必要了解 PCR 反應過程中發(fā)生了什么?；?PCR 運行可以分為三個階段：

指數期

       每個循環(huán)積聚的產物準確加倍（假定 ** 反應效率）。該反應具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數式擴增，因為所有試劑均新鮮可用，反應的動力學推動反應有利于擴增子加倍。

線性期（高變異性）

       隨著反應繼續(xù)，一些試劑因擴增而被消耗。反應開始減緩，并且每個循環(huán)的 PCR 產物不再加倍。

平臺期（終點：使用傳統(tǒng)方法進行凝膠檢測）

       反應停止，不再產生更多產物，并且如果放置時間夠長，PCR 產物將開始降解。因為每個樣品具有不同的反應動力學，所以每支試管或每個反應將在不同的時間點進入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內，傳統(tǒng) PCR 進行測量，又稱為終點檢測。 數字PCR技術是公認的液體活檢領域靈敏度比較好的檢測方法。廣州JUE對定量數字PCR

與常規(guī)PCR方法相比，數字PCR有如下優(yōu)勢：

1、能夠***定量：常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數的標準DNA曲線，但是由于待檢樣本與標準曲線不在統(tǒng)一體系，條件上會存在差異，另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結果的準確性。而數字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響，可進行***定量。

2、樣本需求量低：適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本。

3、靈敏度高：數字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應體系分割成數萬個**PCR反應，這些反應可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質雙鏈的形成。

4、高耐受性：由于目的序列被分配到多個**反應體系中，***降低了背景信號和***物對反應的干擾，擴增基質效應大大減小。 無錫流式數字PCR解決方案MiniDrop?研發(fā)團隊由微流控、光學、機電學、化學、臨床醫(yī)學、分子生物學等多學科交叉領域的**組成。

       MiniDrop數字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數據分析軟件組成，該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術，采用原創(chuàng)性的油液，在40um微管道中利用氣壓驅動在2分鐘內生成50萬微滴，單次運行生成400萬微滴，微滴體積達皮升級，檢測線性范圍達到5個數量級，各項指標均超越國內外的主流產品。

       MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅動的方法將樣本分割成50萬份，打破了國外廠商在微滴式數字PCR領域的壟斷。

MicroDrop-100微滴式數字PCR 應用范圍如下：

a. 動植物檢驗檢疫，動物源性分析、極微量病原菌檢測定量分析、轉基因產品檢測；

b. 降低篩查成本、縮短檢測周期，適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風險評估；適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監(jiān)測等；適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導；

c. 可用于DNA甲基化的檢測、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測等。

d.基因表達差異監(jiān)測單細胞研究：測序、PCR

e.無創(chuàng)產前篩查：低成本、快速、傳染性疾?。篐BV、HIV、COVID-19 定量

無創(chuàng)產前篩查：低成本、快速。

       CNV（Copy Number Variations，拷貝數變異）研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數之間的微小差異，測序方法適用于高于30%的變異率檢測，而qPCR的比較**辨在1.5倍左右，數字PCR通過直接計數目標基因與參照基因( 拷貝數為1的基因，例如RNaseP) 的數目，計算比值，直接得到目標基因的拷貝數可以達到極高的拷貝數分辨精度。

       除此之外，dPCR在病原微生物檢測、microRNA研究、基因表達研究、NGS測序文庫的***定量、表觀遺傳學直接相關的DNA甲基化定量檢測、ChIP定量鑒定等領域的應用都令人極為期待，而在轉基因成分鑒定、分子標準品精確定量、環(huán)境樣本檢測等具體的應用方向上，已經有大量實驗數據和結果證明了dPCR技術的優(yōu)良性能。

關于甲基化含量的鑒定。無錫JUE對定量數字PCR哪家好

單細胞研究：測序、PCR。廣州JUE對定量數字PCR

**個體化診療

通過檢測T790M位點突變情況，可以更好地評估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而，由于qPCR平臺ARMS檢測技術的靈敏度有限，沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準確的檢測到T790M突變。這個時候dPCR技術展現(xiàn)出了****的檢測精度，此外，dPCR***定量的優(yōu)勢也能充分發(fā)揮出來了，可以監(jiān)控突變含量變化，做到及早發(fā)現(xiàn)耐藥。

2.）基因表達分析

伊馬替尼（Imatinib）可以有效幫助很多慢性髓細胞白血?。–ML）患者延長生存期，但是臨床上發(fā)現(xiàn)，伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉錄產物表達量有很大的關系。研究人員采用dPCR對CML患者的BCR-ABL1融合基因轉錄產物進行測定，結果檢測下限可以達到0.001%，顯示出dPCR在痕量核酸檢測方面比qPCR具有無可比擬的優(yōu)勢 廣州JUE對定量數字PCR

浚和（上海）儀器有限公司是一家供應國內外先進儀器和設備的專業(yè)供應商和服務商，致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來，持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業(yè)提供先進的產品和專業(yè)的服務。

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浚和儀器將始終以行業(yè)特點為立足點，以客戶需求為導向，不斷地提高自身專業(yè)技術能力，不停地完善客戶服務質量，在發(fā)展中保持創(chuàng)新的精神，力求與客戶共同進步，為行業(yè)的發(fā)展作出不懈的努力。