微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)在傳統(tǒng)的PCR擴增前對樣品進(jìn)行微滴化處理，即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬個納升級的微滴，其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子，或者含有一個至數(shù)個待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴增后，逐個對每個微滴進(jìn)行檢測，有熒光信號的微滴判讀為1，沒有熒光信號的微滴判讀為0，根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。與傳統(tǒng)PCR相比所具有的優(yōu)勢不依賴Ct值或內(nèi)參基因，即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的***數(shù)目。微滴技術(shù)讓數(shù)字PCR更低成本，且更實用。國內(nèi)擁有完全自主知識產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀。蘇州數(shù)字PCR正規(guī)代理

相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言，數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:●靈敏度可達(dá)到單個核酸分子：檢測限低至0.001%，主要系為數(shù)字PCR可以實現(xiàn)靶標(biāo)DNA/RNA的生物濃縮；●無需標(biāo)準(zhǔn)曲線活參照基因進(jìn)行對比來測定核算量，可對靶分子起始量進(jìn)行***定量，直接獨處DNA分子 的個數(shù)；●適合環(huán)境復(fù)雜樣品的檢測：終點PCR檢測，不依賴Ct值，不依賴擴增效率，能克服PCR 劑的影響，避免樣品間的交叉 問題，適合各類復(fù)雜環(huán)境中的樣本進(jìn)行 定量，如動血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等；蘇州廣東數(shù)字PCR解決方案超高靈敏度，適用于稀有序列及稀有突變的檢測。

dPCR的基本原理目前dPCR主要有兩種形式，芯片式和液滴式，但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中，每個反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個。這樣經(jīng)過PCR循環(huán)之后，有一個核酸分子模板的反應(yīng)器就會給出熒光信號，沒有模板的反應(yīng)器就沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應(yīng)器的體積，就可以推算出原始溶液的核酸濃度?？梢允褂脦追N不同的方法來分配樣品，包括微孔板，毛細(xì)管，油乳劑和帶有核酸結(jié)合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設(shè)分子種群遵循泊松分布來估計不同分子的數(shù)量，根據(jù)泊松分布的原理，反應(yīng)體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計算，從而解決了多個目標(biāo)分子存在于單個液滴中的可能性。

與常規(guī)PCR方法相比，數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢：1、能夠***定量：常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA曲線，但是由于待檢樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線不在統(tǒng)一體系，條件上會存在差異，另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而數(shù)字PCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴增動力學(xué)影響，可進(jìn)行***定量。2、樣本需求量低：適用于珍貴樣本或核酸降解嚴(yán)重的樣本。3、靈敏度高：數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個 PCR反應(yīng)，這些反應(yīng)可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性：由于目的序列被分配到多個 反應(yīng)體系中，***降低了背景信號和***物對反應(yīng)的干擾，擴增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。無創(chuàng)產(chǎn)前篩查：低成本、快速。

數(shù)字PCR為juedui定量，qPCR為相對定量，數(shù)字PCR較qPCR更精細(xì)、更靈敏。所以說，未來數(shù)字PCR將成為qPCR的重要補充，在部分領(lǐng)域逐步替代熒光定量PCR。未來這些領(lǐng)域?qū)V泛應(yīng)用到數(shù)字PCR：科研：高校（生命科學(xué)學(xué)院、環(huán)境學(xué)院、醫(yī)學(xué)院、藥學(xué)院）等。醫(yī)院：病理科、血液科、婦產(chǎn)科、心血管科、檢驗科、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心：研究院單位、疾控中心、海關(guān)（出入境檢驗檢疫）、質(zhì)監(jiān)局、環(huán)境/環(huán)保局等。企業(yè)：第三方檢測機構(gòu)、IVD(分子體外診斷試劑)、生物制藥等。線性范圍達(dá)到6個數(shù)量級，靈敏度高達(dá)萬分之一。南通MicroDrop-100數(shù)字PCR價格

采用微滴式技術(shù)高達(dá)100,000個的微滴。蘇州數(shù)字PCR正規(guī)代理

與常規(guī)的PCR的方法相比，dPCR有很好的優(yōu)勢。***定量常規(guī)PCR和實時熒光PCR定量檢測都需要已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA制定標(biāo)準(zhǔn)曲線，由于樣品測定在各種條件上不會完全一致，會造成PCR擴增效率的差異，從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而ddPCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴增動力學(xué)影響，可以進(jìn)行***定量。樣品需求量低在檢測珍貴樣品和樣品核酸存在降解時具有明顯的優(yōu)勢。高靈敏度ddPCR本質(zhì)上是 將一個傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)分成了數(shù)萬個 的PCR反應(yīng)，在這些反應(yīng)中可以精確地檢測到很小的目的片段的差異、單拷貝甚至是低濃度混雜樣品，且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。高耐受性由于目的序列被分配到多個微滴中，***降低了體系間的影響以及背景序列和***物對反應(yīng)的干擾，擴增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。蘇州數(shù)字PCR正規(guī)代理

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