研究方向
低豐度及稀有序列的精確定量
目前對于低豐度目標序列的檢測,定量PCR、雜交、毛細管測序及NGS等方法都因受到背景DNA的干擾,使得檢測靈敏度及精確性都達不到精細定量的要求(如定量PCR檢測中Ct值大于33的情況下,其重復性就不是很高), 而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過**的微滴 化處理,使得稀有的核酸序列從大量的背景DNA中分離出來,從而提高了檢測的靈敏度及重復性。
此外,由于樣品微滴化處理的同時,也將樣品中可能存在的***劑進行了分裝,提高了數(shù)字PCR擴增對于***劑的耐受程度,因此可具體應用于很多臨床樣品(血液、尿液、糞便、痰液、腦脊液等)中對**核酸標記物的檢測。一般而言,毛細管電泳和定量PCR的檢測靈敏度約在10%;NGS的靈敏度可達到1%;而ddPCR的檢測下限為0.001%。 單次微滴生成*需2分鐘。南通廣東數(shù)字PCR銷售電話
數(shù)字PCR是一種核酸分子***定量技術。當前核酸分子的定量有三種方法,光度法基于核酸分子的吸光度來定量;,Ct值就是指可以檢測到熒光值對應的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR是***的定量技術,基于單分子PCR方法來進行計數(shù)的核酸定量,是一種***定量的方法。主要采用當前分析化學熱門研究領域的微流控或微滴化方法,將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中,每個反應器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個。這樣經(jīng)過PCR循環(huán)之后,有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。上海MicroDrop-100數(shù)字PCR原理正壓生成油包水的液滴。
數(shù)字PCR是一種核酸分子***值定量技術,能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù),是對起始樣品的***值定量。該試劑盒采用創(chuàng)新的一步法逆轉錄數(shù)字PCR技術,將*****的RNA逆轉錄及數(shù)字PCR擴增整合到一個反應體系,單管雙檢同時測定*****的兩個**基因,消除***變異帶來的漏檢風險。
MicroDrop-100全新微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)為永諾生物旗下子公司永諾醫(yī)療自主研發(fā)的檢測設備,此系統(tǒng)檢測無需依賴標準物質(zhì),可達到***定量,具有超高靈敏度,檢測靈敏度高達1個拷貝,且具有較好的重復性,降低同樣本不同批次的檢測差異。數(shù)字PCR結果采取終點判讀法,相比熒光定量PCR的過程性讀取可有效降低對PCR 擴增效率的依賴、降低PCR***物對檢測結果的影響,對于復雜樣本也能提供穩(wěn)定的檢測結果等特點,在******臨床實驗及***患者的治療過程中可發(fā)揮重要作用。
相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:
· 能夠有效區(qū)分濃度差異微小的樣品:更好的準確度、精密度和重復性,可以用于精確測定靶基因的相對表達,基因拷貝數(shù)變異分析等。
· 數(shù)字PCR可開發(fā)針對不同**、不同樣本以及不同的樣本環(huán)境提供檢測解決方案,該技術的應用范圍廣,尤其在液體活檢領域,已開發(fā)針對肺*、乳腺*、腸*、胃*等上百個位點檢測試劑盒,可精細指導臨床***的診斷,以便患者在后續(xù)得到更及時并且適當?shù)?**方案提供。 理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應用。
同時,從公式也可以看出,隨著反應陽性體系數(shù)(X)的增加,體系中目標分子的拷貝數(shù)相對于X會有較大的差距,隨著X的持續(xù)增加,數(shù)字PCR結果的不確定度也隨著提高,總體來說,數(shù)字PCR陽性體系的數(shù)量不得超過總體系數(shù)量的80%。另一個方面,N的增加會使整個數(shù)字PCR體系具有較大的線性范圍,并可以提高反應的靈敏度、穩(wěn)定性以及可重復性。因此,目前dPCR都需要在成本可控的情況下,增加分配的腔室數(shù)和液滴數(shù)。
商業(yè)化dPCR平臺及其特點
發(fā)展到現(xiàn)在,市面上常見的dPCR主要有兩種:微滴式dPCR(droplet dPCR,ddPCR)和芯片式dPCR(chip dPCR,cdPCR)技術。由于芯片式dPCR制造芯片的成本較高,目前微滴式dPCR正越來越受到企業(yè)的認可。 關于甲基化含量的鑒定。廣東數(shù)字PCR如何選型
檢測靈敏度高達萬分之一。南通廣東數(shù)字PCR銷售電話
MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR 應用范圍如下:
a. 動植物檢驗檢疫,動物源性分析、極微量病原菌檢測定量分析、轉基因產(chǎn)品檢測;
b. 降低篩查成本、縮短檢測周期,適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風險評估;適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監(jiān)測等;適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導;
c. 可用于DNA甲基化的檢測、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測等。
d.基因表達差異監(jiān)測單細胞研究:測序、PCR
e.無創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速、傳染性疾?。篐BV、HIV、COVID-19 定量
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浚和(上海)儀器有限公司是一家供應國內(nèi)外先進儀器和設備的專業(yè)供應商和服務商,致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來,持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業(yè)提供先進的產(chǎn)品和專業(yè)的服務。
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公司主要經(jīng)營產(chǎn)品包括:等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數(shù)字PCR、高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等,目前主要合作品牌有:日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時,公司還提供專業(yè)的技術服務,如設備的維護、驗證等。
浚和儀器將始終以行業(yè)特點為立足點,以客戶需求為導向,不斷地提高自身專業(yè)技術能力,不停地完善客戶服務質(zhì)量,在發(fā)展中保持創(chuàng)新的精神,力求與客戶共同進步,為行業(yè)的發(fā)展作出不懈的努力。