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改良NBB瓊脂培養(yǎng)皿

來源: 發(fā)布時間:2024-09-06

伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于大腸桿菌和其他腸桿菌科細(xì)菌的分離和鑒別。以下是伊紅美藍(lán)瓊脂的特點介紹:1.**成分**:伊紅美藍(lán)瓊脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、瓊脂、伊紅Y溶液和美藍(lán)溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,而伊紅和美藍(lán)則作為pH指示劑。2.**pH值**:伊紅美藍(lán)瓊脂的pH值為7.1,適合多數(shù)腸道細(xì)菌的生長。3.**制法**:首先將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH值后進(jìn)行高壓滅菌。使用前加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷卻至50-55℃時加入伊紅和美藍(lán)溶液,搖勻后傾注平板。4.**用途**:主要用于大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌的分離和鑒別。大腸桿菌在該培養(yǎng)基上分解乳糖產(chǎn)酸,菌落呈深紫色并帶有金屬光澤;而產(chǎn)氣腸桿菌則可能呈現(xiàn)棕色,很少有金屬光澤。5.**保存**:伊紅美藍(lán)瓊脂應(yīng)在4℃至8℃的條件下保存,避免凍結(jié),以保持其有效性。6.**有效期**:在適當(dāng)?shù)馁A存條件下,伊紅美藍(lán)瓊脂的有效期通常為三個月。

接種: 使用無菌的技術(shù)在瓊脂培養(yǎng)基表面接種待測樣品,可以是從食品、水樣或其他來源收集的微生物樣品。改良NBB瓊脂培養(yǎng)皿

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Kovacs氏靛基質(zhì)試劑是一種用于吲哚(靛基質(zhì))試驗的試劑,其特點如下:1.**應(yīng)用領(lǐng)域**:主要用于鑒定腸系細(xì)菌,如大腸桿菌等,通過檢測細(xì)菌分解色氨酸生成的吲哚來進(jìn)行鑒定。2.**反應(yīng)原理**:某些細(xì)菌能夠分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚與試劑中的對二甲氨基苯甲醛結(jié)合,形成玫瑰吲哚,產(chǎn)生紅色化合物,從而進(jìn)行顯色反應(yīng)。3.**操作步驟**:首先將純培養(yǎng)物接種于適宜的培養(yǎng)基中,如色氨酸肉湯或胰蛋白水培養(yǎng)基,然后在36±1℃下培養(yǎng)24±2小時。之后加入2-4滴Kovacs試劑,混勻后立即觀察或放置室溫5-10分鐘觀察結(jié)果。4.**結(jié)果判斷**:陽性反應(yīng)表現(xiàn)為培養(yǎng)基上部有一紅色環(huán),而陰性反應(yīng)則為黃色、桔黃色或棕色。5.**試劑盒組成**:Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒包含溶液A,配制依據(jù)是將5g對二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后緩慢加入25mL濃鹽酸。6.**產(chǎn)品規(guī)格與價格**:以青島海博生物提供的產(chǎn)品為例,產(chǎn)品規(guī)格為5ml*2,價格為35元,保質(zhì)期為一年。7.**應(yīng)用范圍**:除了用于病原細(xì)菌的鑒定,還可用于食品衛(wèi)生檢測、環(huán)境控制、食品毒性檢測、水中大腸桿菌檢測、食品過敏性檢測、食品生產(chǎn)環(huán)境的清潔檢測、菌落計數(shù)及控制系統(tǒng)。含甲基綠的DNA酶試驗瓊脂平板去氧膽酸是一種抑制腸道細(xì)菌生長的化合物,因此對于從非腸道來源中分離出的微生物具有選擇性。

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亞碲酸鉀卵黃增菌液(PotassiumTelluritesolution)是一種用于微生物培養(yǎng)的增菌液,特別適用于金黃色葡萄球菌的分離和鑒定。以下是其特點介紹:1.**成分**:含有30%卵黃懸浮液和0.16%亞碲酸鉀,這些成分有助于金黃色葡萄球菌的生長,同時抑制其他微生物。2.**選擇性**:亞碲酸鉀具有抑制某些細(xì)菌生長的作用,特別是對革蘭氏陰性細(xì)菌和一些革蘭氏陽性細(xì)菌有較強(qiáng)的抑制效果,而金黃色葡萄球菌能夠抵抗這種抑制作用。3.**使用方法**:通常與Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基配合使用,將增菌液添加到已冷卻至45-50℃的Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混合均勻后傾注平板。4.**培養(yǎng)效果**:含有卵磷脂酶的金黃色葡萄球菌在這種培養(yǎng)基上能夠降解卵黃,產(chǎn)生透明圈,而脂酶作用則產(chǎn)生不透明的沉淀環(huán)。凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌還能還原亞碲酸鉀,產(chǎn)生黑色菌落。5.**儲存條件**:建議在2-8℃的條件下保存,以保持其有效性。6.**有效期**:在適當(dāng)?shù)膬Υ鏃l件下,亞碲酸鉀卵黃增菌液的有效期通常為半年至一年。7.**注意事項**:由于亞碲酸鉀卵黃增菌液的特殊性質(zhì),不能使用常規(guī)方法進(jìn)行滅菌。使用前應(yīng)在完全培養(yǎng)基上進(jìn)行無菌實驗,以確保培養(yǎng)基的無菌性。

強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一種專為梭菌屬(Clostridium)細(xì)菌設(shè)計的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**營養(yǎng)成分**:RCM培養(yǎng)基富含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化鈉、醋酸鈉和L-半胱氨酸鹽酸鹽,這些成分提供碳源、氮源、維生素和生長因子,適合梭菌的生長需求。2.**pH值**:RCM培養(yǎng)基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),為梭菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計數(shù),特別適用于厭氧條件下梭菌的培養(yǎng)。4.**抑制作用**:醋酸鈉成分有助于抑制革蘭氏陰性菌的生長,使得RCM培養(yǎng)基更適合梭菌屬細(xì)菌的選擇性培養(yǎng)。5.**穩(wěn)定性**:微量瓊脂(0.5g/L)的添加增加了培養(yǎng)基還原環(huán)境的穩(wěn)定性,有助于厭氧環(huán)境的形成,防止二氧化碳、氧氣和還原產(chǎn)物的擴(kuò)散。6.**生長表現(xiàn)**:無動力的細(xì)菌在RCM培養(yǎng)基中通常呈顆粒狀或條狀生長,便于計數(shù);而有動力的細(xì)菌則可能呈現(xiàn)渾濁生長,一般不適合計數(shù)。7.**制備方法**:將RCM培養(yǎng)基粉末溶解于蒸餾水中,加熱至完全溶解后分裝,通過高壓滅菌以備使用。8.**質(zhì)控結(jié)果**:RCM培養(yǎng)基適用于生孢梭菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌等梭菌的生長,這些菌株在培養(yǎng)基中的生長情況良好。去氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基通常被用于分離和鑒定腸道細(xì)菌,尤其是腸桿菌科的細(xì)菌。

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TBX顯色培養(yǎng)基是一種用于快速、準(zhǔn)確地檢測食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的培養(yǎng)基。以下是其主要特點:1.**顯色特性**:TBX培養(yǎng)基中含有的特殊顯色劑能夠使大腸桿菌在培養(yǎng)24小時后顯藍(lán)綠色,而大腸菌群顯無色,其他細(xì)菌則顯黃色或無色,革蘭氏陽性菌被抑制。2.**成分**:包含特殊營養(yǎng)物質(zhì)、顯色劑和瓊脂,其中特殊營養(yǎng)物質(zhì)為21.4克/升,顯色劑為0.2克/升,瓊脂為15.0克/升,pH值控制在6.8±0.2(25℃)。3.**應(yīng)用范圍**:適用于多種樣品的大腸桿菌快速檢測,包括食品、水體、奶制品等。4.**制備方法**:通常將干粉培養(yǎng)基與蒸餾水混合,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不超過1分鐘,然后進(jìn)行高壓滅菌。5.**使用方法**:將制備好的樣品液加入冷卻至45-50°C的培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上,36±1℃培養(yǎng)18-24小時。6.**檢驗原理**:特殊營養(yǎng)物質(zhì)提供微生物生長所需的碳氮源和微量元素,維持均衡的滲透壓,并提供針對革蘭氏陽性細(xì)菌的選擇性。顯色劑在特異性酶作用下產(chǎn)生顏色變化,用于識別大腸桿菌。7.**質(zhì)量控制**:通過接種質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗,確保培養(yǎng)基的性能。VRBA培養(yǎng)基對于革蘭氏陰性菌,尤其是腸道細(xì)菌,具有較強(qiáng)的選擇性。BCYE-Cys瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿

NAC瓊脂培養(yǎng)皿中含有富含氨基酸的天然瓊脂,能夠提供微生物生長所需的豐富營養(yǎng)物質(zhì)。改良NBB瓊脂培養(yǎng)皿

品紅亞硫酸鈉液體培養(yǎng)基(EndoAgar),也稱為遠(yuǎn)藤瓊脂培養(yǎng)基,是一種用于微生物學(xué)檢驗的選擇性培養(yǎng)基,主要用于飲用水和水源中總大腸菌群的選擇性分離和確證,符合GB(中國國家標(biāo)準(zhǔn))的要求。**主要成分**:-蛋白胨:10.0g-牛肉粉:5.0g-酵母粉:5.0g-磷酸氫二鉀:3.5g-乳糖:10.0g-瓊脂:13.0g-堿性品紅:1.0g-亞硫酸鈉:5.0g-pH值:7.2-7.4(25℃)**檢驗原理**:-蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供微生物生長所需的碳氮源、維生素和礦物質(zhì)。-乳糖作為可發(fā)酵的糖類,用于檢測細(xì)菌的乳糖發(fā)酵能力。-亞硫酸鈉能將堿性品紅還原,使其褪色。-發(fā)酵乳糖的細(xì)菌產(chǎn)生乙醛,在存在堿性品紅的情況下乙醛與亞硫酸鈉結(jié)合形成紅色菌落。-快速發(fā)酵乳糖的細(xì)菌產(chǎn)生金屬光澤,不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌形成無色透明菌落。**使用方法**:-稱取本品52.5g,加入20mL無水乙醇和980mL蒸餾水(可根據(jù)培養(yǎng)需要擴(kuò)大或縮小產(chǎn)品用量),加熱攪拌溶解。-按需分裝,116℃高壓滅菌20分鐘,備用。-質(zhì)控菌液按國標(biāo)等標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備而成。-取相應(yīng)菌液按涂布或劃線方式接種于培養(yǎng)基中。-將接好菌的平板倒置放入恒溫培養(yǎng)箱,于36±1℃需氧培養(yǎng)24±2小時,觀察實驗結(jié)果。改良NBB瓊脂培養(yǎng)皿

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