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VRBA培養(yǎng)皿

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-09-21

連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基(TetrathionateBroth,TTB)是一種用于分離和富集沙門氏菌的選擇性富集培養(yǎng)基。它通常包含胰酪蛋白胨、動(dòng)物組織消化物、膽鹽、碳酸鈣、硫代硫酸鈉等成分。這種培養(yǎng)基通過(guò)提供特定的營(yíng)養(yǎng)和抑制劑,有助于沙門氏菌的生長(zhǎng),同時(shí)抑制其他雜菌。以下是一些關(guān)于連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方和使用信息:1.**配方**(每升):-胰酪蛋白胨(PancreaticDigestofCasein):2.5g-動(dòng)物組織消化物(PepticDigestofAnimalTissue):2.5g-膽鹽(BileSalts):1.0g-碳酸鈣(CalciumCarbonate):10.0g-硫代硫酸鈉(SodiumThiosulfate):30.0g-碘(Iodine)和碘化鉀(PotassiumIodide):根據(jù)具體配方調(diào)整2.**配制方法**:-稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入去離子水或蒸餾水。-加熱煮沸以確保所有成分完全溶解。-分裝至適宜的容器中,并進(jìn)行高壓滅菌。3.**使用說(shuō)明**:-接種樣品后,培養(yǎng)基可以在35°C或43°C下培養(yǎng)12至24小時(shí)。-培養(yǎng)后,可以將培養(yǎng)物接種到其他選擇性培養(yǎng)基上,如XLD瓊脂、亞硫酸鉍瓊脂、SS瓊脂等,以進(jìn)一步分離和鑒定沙門氏菌。EMB培養(yǎng)皿是用于培養(yǎng)和檢測(cè)腸道革蘭氏陰性桿菌的一種特殊培養(yǎng)基。VRBA培養(yǎng)皿

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強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一種專為梭菌屬(Clostridium)細(xì)菌設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營(yíng)養(yǎng)成分**:RCM培養(yǎng)基富含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化鈉、醋酸鈉和L-半胱氨酸鹽酸鹽,這些成分提供碳源、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,適合梭菌的生長(zhǎng)需求。2.**pH值**:RCM培養(yǎng)基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),為梭菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù),特別適用于厭氧條件下梭菌的培養(yǎng)。4.**抑制作用**:醋酸鈉成分有助于抑制革蘭氏陰性菌的生長(zhǎng),使得RCM培養(yǎng)基更適合梭菌屬細(xì)菌的選擇性培養(yǎng)。5.**穩(wěn)定性**:微量瓊脂(0.5g/L)的添加增加了培養(yǎng)基還原環(huán)境的穩(wěn)定性,有助于厭氧環(huán)境的形成,防止二氧化碳、氧氣和還原產(chǎn)物的擴(kuò)散。6.**生長(zhǎng)表現(xiàn)**:無(wú)動(dòng)力的細(xì)菌在RCM培養(yǎng)基中通常呈顆粒狀或條狀生長(zhǎng),便于計(jì)數(shù);而有動(dòng)力的細(xì)菌則可能呈現(xiàn)渾濁生長(zhǎng),一般不適合計(jì)數(shù)。7.**制備方法**:將RCM培養(yǎng)基粉末溶解于蒸餾水中,加熱至完全溶解后分裝,通過(guò)高壓滅菌以備使用。8.**質(zhì)控結(jié)果**:RCM培養(yǎng)基適用于生孢梭菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌等梭菌的生長(zhǎng),這些菌株在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況良好。VRBA培養(yǎng)皿TSA板常用于菌落計(jì)數(shù),通過(guò)將待測(cè)樣品在TSA板上均勻涂布,培養(yǎng)一定時(shí)間后,觀察并計(jì)數(shù)產(chǎn)生的菌落數(shù)量。

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品紅亞硫酸鈉液體培養(yǎng)基(EndoAgar),也稱為遠(yuǎn)藤瓊脂培養(yǎng)基,是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于飲用水和水源中總大腸菌群的選擇性分離和確證,符合GB(中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn))的要求。**主要成分**:-蛋白胨:10.0g-牛肉粉:5.0g-酵母粉:5.0g-磷酸氫二鉀:3.5g-乳糖:10.0g-瓊脂:13.0g-堿性品紅:1.0g-亞硫酸鈉:5.0g-pH值:7.2-7.4(25℃)**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供微生物生長(zhǎng)所需的碳氮源、維生素和礦物質(zhì)。-乳糖作為可發(fā)酵的糖類,用于檢測(cè)細(xì)菌的乳糖發(fā)酵能力。-亞硫酸鈉能將堿性品紅還原,使其褪色。-發(fā)酵乳糖的細(xì)菌產(chǎn)生乙醛,在存在堿性品紅的情況下乙醛與亞硫酸鈉結(jié)合形成紅色菌落。-快速發(fā)酵乳糖的細(xì)菌產(chǎn)生金屬光澤,不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌形成無(wú)色透明菌落。**使用方法**:-稱取本品52.5g,加入20mL無(wú)水乙醇和980mL蒸餾水(可根據(jù)培養(yǎng)需要擴(kuò)大或縮小產(chǎn)品用量),加熱攪拌溶解。-按需分裝,116℃高壓滅菌20分鐘,備用。-質(zhì)控菌液按國(guó)標(biāo)等標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備而成。-取相應(yīng)菌液按涂布或劃線方式接種于培養(yǎng)基中。-將接好菌的平板倒置放入恒溫培養(yǎng)箱,于36±1℃需氧培養(yǎng)24±2小時(shí),觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基是一種專門用于霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**選擇性抑制**:玫瑰紅鈉作為選擇性抑菌劑,可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng),并減緩某些霉菌因生長(zhǎng)過(guò)快而導(dǎo)致菌落漫延生長(zhǎng)。2.**營(yíng)養(yǎng)成分**:蛋白胨提供碳源和氮源,葡萄糖提供能源,磷酸二氫鉀作為緩沖劑,硫酸鎂提供必需的微量元素。3.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在6.0±0.2(25℃),為霉菌和酵母菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。4.**制備方法**:稱取31.5g培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,然后在121℃高壓下滅菌15分鐘備用。5.**用途**:根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版,供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用。6.**微生物質(zhì)控**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),例如白色念珠菌、黑曲霉和酵母菌,觀察其生長(zhǎng)情況和特征。7.**產(chǎn)品性能**:培養(yǎng)基應(yīng)為粉紅色均勻混懸液,無(wú)肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)。8.**注意事項(xiàng)**:傾注培養(yǎng)基的溫度不宜過(guò)高,一般要求在45℃左右,以免損傷或燙死樣品中的微生物而影響計(jì)數(shù)。

在分子生物學(xué)研究中,BHI Agar用于培養(yǎng)大腸桿菌等細(xì)菌,以便進(jìn)行質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化和克隆。

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木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)是一種選擇性培養(yǎng)基,用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng),以下是其特點(diǎn):1.**用途**:專門用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng),也適用于其他腸道菌的選擇性分離。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-賴氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鐵銨、去氧膽酸鹽、苯酚紅和瓊脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**檢驗(yàn)原理**:酵母浸粉提供維生素和輔助因子,木糖、乳糖和蔗糖作為可發(fā)酵碳源。賴氨酸的加入有助于鑒別沙門氏菌。沙門氏菌發(fā)酵木糖產(chǎn)酸,產(chǎn)生的脫羧酶使賴氨酸脫羧,導(dǎo)致pH升高。硫代硫酸鈉及檸檬酸鐵銨與硫化氫反應(yīng),產(chǎn)生黑色硫化鐵,苯酚紅作為pH指示劑,去氧膽酸鹽抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)。4.**用法**:稱取57g培養(yǎng)基,溶解在1000ml蒸餾水中,不要過(guò)分加熱,冷至50-55℃時(shí)傾入無(wú)菌平皿,部分開(kāi)蓋干燥2小時(shí),然后蓋上備用。無(wú)需高壓滅菌,在24小時(shí)內(nèi)使用。5.**微生物質(zhì)控**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),如腸炎沙門氏菌CMCC50760、大腸埃希氏菌ATCC25922、福氏志賀氏菌CMCC51572等,觀察其在XLD培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特征。改良的配方提高了對(duì)特定微生物的選擇性,適用于特定菌株的檢測(cè)和鑒定。Vogel-Johnson瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿

去氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基通常被用于分離和鑒定腸道細(xì)菌,尤其是腸桿菌科的細(xì)菌。VRBA培養(yǎng)皿

月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LaurylSulfateTryptoseBroth,簡(jiǎn)稱LST)是一種選擇性液體培養(yǎng)基,主要用于檢測(cè)食品、水、奶制品中的大腸菌群和大腸埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**試驗(yàn)原理**:LST培養(yǎng)基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,滿足細(xì)菌生長(zhǎng)需求;氯化鈉維持滲透壓;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀作為pH緩沖劑;月桂基硫酸鈉抑制非大腸菌群細(xì)菌的生長(zhǎng)。2.**培養(yǎng)基配方**:每升培養(yǎng)基包含胰蛋白胨20.0g、氯化鈉5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氫鉀2.75g、磷酸氫二鉀2.75g、月桂基硫酸鈉0.1g,pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2(25℃)。3.**試驗(yàn)方法**:稱取35.6克LST培養(yǎng)基,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝到帶有倒立發(fā)酵管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**質(zhì)量控制和典型特征**:在36±1℃培養(yǎng)48±2小時(shí),大腸菌群、大腸桿菌和發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性細(xì)菌產(chǎn)生氣體,在小倒管內(nèi)有氣泡;其他細(xì)菌無(wú)氣泡。5.**微生物靈敏度試驗(yàn)**:接種特定的質(zhì)控菌株,如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、陰溝腸桿菌ATCC23355、大腸埃希氏菌ATCC8739、糞腸球菌ATCC29212和金黃色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí),觀察結(jié)果。VRBA培養(yǎng)皿

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