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酚紅葡萄糖肉湯(PhenolRedGlucoseBroth)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于鑒定細(xì)菌是否具有發(fā)酵葡萄糖的能力。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:酚紅葡萄糖肉湯的配方包含月示胨(或稱為蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化鈉、葡萄糖和酚紅。其中,月示胨和牛肉浸粉提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類;氯化鈉維持滲透壓;酚紅作為pH指示劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.4±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌10-15分鐘。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于蒸餾水中,分裝試管,每管3ml。5.**質(zhì)量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在厭氧條件下35℃培養(yǎng)24小時(shí),培養(yǎng)基由紅色變?yōu)辄S色,表明細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸。6.**用途**:酚紅葡萄糖肉湯用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)),也用于檢測(cè)大腸菌群。7.**結(jié)果觀察**:如果培養(yǎng)基顏色由紅色變?yōu)辄S色,說(shuō)明細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸;如果培養(yǎng)基顏色不變或紅色加深,說(shuō)明該微生物葡萄糖發(fā)酵陰性。8.**儲(chǔ)存條件**:避光,密封,陰涼干燥處保存。巴氏芽孢桿菌的芽孢具有多層保護(hù)結(jié)構(gòu),包括芽孢外殼和芽孢皮層,這些結(jié)構(gòu)由多種蛋白質(zhì)組成。腦-心浸萃瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)是一種專門設(shè)計(jì)用于分離和培養(yǎng)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。除了李斯特氏菌,它也可以用來(lái)分離其他類型的細(xì)菌,盡管其選擇性成分主要針對(duì)李斯特氏菌。**特點(diǎn)**:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎(chǔ)包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七葉苷、檸檬酸鐵銨、葡萄糖、氯化鋰、瓊脂和酚紅等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌,特別是非李斯特氏菌的生長(zhǎng)。4.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長(zhǎng)時(shí),會(huì)水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環(huán)。盡管PALCAM瓊脂基礎(chǔ)主要用于李斯特氏菌的分離,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和腸球菌等,偶爾也能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng),利用甘露醇產(chǎn)酸使菌落和其周圍的培養(yǎng)基呈黃色。
酵母浸粉葡萄糖瓊脂(YPDA)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,尤其是在酵母菌的培養(yǎng)中。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和瓊脂。具體配方為1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固體培養(yǎng)基,加入2%瓊脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常調(diào)節(jié)在6.0±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。葡萄糖溶液滅菌后加入,以避免高溫下可能發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)導(dǎo)致培養(yǎng)基成分變化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培養(yǎng),也用于藥品和生物制品中含王漿和蜂蜜的合劑酵母菌數(shù)測(cè)定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g瓊脂粉,然后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**儲(chǔ)存條件**:液體YPDA培養(yǎng)基可常溫保存;瓊脂YPDA平板在4℃可保存幾個(gè)月。7.**微生物生長(zhǎng)特征**:不同細(xì)菌在酵母浸粉葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌則有黑色孢子。
NGKG瓊脂基礎(chǔ)是一種用于食品中蠟樣芽孢桿菌分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)的配方包含蛋白胨、酵母浸粉、氯化鈉、甘氨酸、苯酚紅和瓊脂等成分。蛋白胨和酵母浸粉提供碳源、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;氯化鈉維持滲透壓;甘氨酸提供氮源;苯酚紅作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。2.**pH調(diào)節(jié)**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)的pH值通常調(diào)節(jié)在6.8±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加物**:在冷卻至50℃左右時(shí),需要加入20%卵黃液100mL(卵黃液制備:取無(wú)菌卵黃液20mL,生理鹽水80mL,混勻)。卵黃液提供卵磷脂,產(chǎn)卵磷脂酶的細(xì)菌可水解卵磷脂,使其菌落周圍形成一個(gè)白色的沉淀環(huán)。5.**抗生物質(zhì)**:每200mL培養(yǎng)基中添加多粘菌素B溶液1支,以抑制革蘭氏陰性細(xì)菌生長(zhǎng)。6.**用途**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)主要用于食品中蠟樣芽孢桿菌的分離培養(yǎng)。7.**培養(yǎng)特征**:在30℃±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)后,典型的蠟樣芽孢桿菌在NGKG瓊脂基礎(chǔ)上表現(xiàn)為淺紅色菌落,邊緣不規(guī)則,有卵磷脂沉淀環(huán)。8.**質(zhì)量控制**:通過(guò)接種質(zhì)控菌株并觀察培養(yǎng)特征來(lái)驗(yàn)證培養(yǎng)基的質(zhì)量。 海藻糖-脯氨酸培養(yǎng)基被推薦用于稀有放線菌的分離培養(yǎng)基,因?yàn)樗兄谔岣呦∮蟹啪€菌的出菌率 。
改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)是一種用于微生物學(xué)研究和診斷的培養(yǎng)基,它具有一些特定的特點(diǎn)和用途:1.**選擇性分離培養(yǎng)基**:改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)主要用于李斯特氏菌的選擇性分離。它通過(guò)添加特定的抗生物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制其他非目標(biāo)微生物的生長(zhǎng),從而促進(jìn)目標(biāo)微生物——在這種情況下是李斯特氏菌的生長(zhǎng)。2.**配方成分**:該培養(yǎng)基的配方包括酪胨、多價(jià)胨、牛肉浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、甘氨酸、氯化鋰和瓊脂等。這些成分為微生物提供了生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境。3.**pH值**:改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)的pH值通??刂圃?.3±0.2(25℃),這為李斯特氏菌的生長(zhǎng)提供了適宜的酸堿環(huán)境。4.**添加物**:在使用時(shí),每升培養(yǎng)基中需添加2.5g苯乙醇以及200mg環(huán)乙酰亞胺或30mg復(fù)達(dá)欣,這些添加物有助于抑制其他微生物的生長(zhǎng),提高李斯特氏菌分離的選擇性。5.**高壓滅菌**:在制備過(guò)程中,需要將培養(yǎng)基加熱至完全溶解,然后進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保培養(yǎng)基的無(wú)菌性。6.**冷卻和添加抗生物質(zhì)**:滅菌后,培養(yǎng)基需要冷卻至50℃,然后在無(wú)菌環(huán)境下加入抗生物質(zhì),備用。
不同細(xì)菌在TSFA上的生長(zhǎng)特征不同,如金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生黃色的色素,大腸埃希氏菌形成無(wú)色透明大菌落。腦-心浸萃瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
嗜鹽菌選擇性瓊脂是一種專門用于分離和培養(yǎng)嗜鹽菌的培養(yǎng)基,其特點(diǎn)和應(yīng)用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化鈉:40.0g/L-結(jié)晶紫:0.0005g/L-瓊脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生長(zhǎng)。-高含量的氯化鈉創(chuàng)造高滲環(huán)境,有利于嗜鹽菌的生長(zhǎng),同時(shí)抑制不耐高鹽的細(xì)菌。-結(jié)晶紫抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)。-瓊脂作為凝固劑,使培養(yǎng)基凝固成固體。-高pH值有助于抑制部分雜菌的生長(zhǎng)。3.**配制方法**:-稱取77.0g培養(yǎng)基粉末,加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中。-分裝后,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**使用方法**:-將培養(yǎng)基傾注成平板,待凝固后使用。-接種樣品后,放置于36±1℃恒溫培養(yǎng)箱中需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。5.**細(xì)菌生長(zhǎng)特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:無(wú)色菌落,較濕潤(rùn)。-溶藻弧菌ATCC17749:無(wú)色菌落。-金黃色葡萄球菌ATCC25923:抑制生長(zhǎng)。6.**微生物靈敏度試驗(yàn)**:-按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置于36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。-回收率計(jì)算時(shí),用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。腦-心浸萃瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿