彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細(xì)菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**選擇性培養(yǎng)**:彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)通常與特定的選擇性添加劑一起使用,如改良Karmali選擇性添加劑或彎曲桿菌選擇性添加劑,這些添加劑含有抗生物質(zhì),如萬古霉素和兩性霉素B,以抑制其他非目標(biāo)微生物的生長,提高目標(biāo)彎曲桿菌的分離率。2.**無血培養(yǎng)基**:某些類型的彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)是無血的,這使得它在某些應(yīng)用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟(jì)。無血培養(yǎng)基通常使用活性炭、硫酸亞鐵和酸鈉替代血液。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,生長環(huán)境是含氧氣5%、二氧化碳10%、氮?dú)?5%。因此,彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長。4.**菌落特征**:在適宜的條件下,空腸彎曲桿菌在彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)中生長,形成灰色、濕潤、平鋪的菌落,這些特征有助于識(shí)別彎曲桿菌。5.配方:彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)的配方可能包含蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨、氯化鈉、瓊脂等,提供碳、氮源、維生素和生長因子。
乙基紫疊氮鈉肉湯(EthylVioletAzideBroth,EVA)是一種用于微生物培養(yǎng)的選擇性培養(yǎng)基,特別適合于鏈球菌的增菌培養(yǎng)。以下是它的一些特點(diǎn)和用法:**特點(diǎn)**:1.**成分**:含有酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、疊氮鈉和乙基紫等成分。2.**pH值**:pH值控制在7.0±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:疊氮鈉可以抑制革蘭氏陰性細(xì)菌的生長,特別是對變形桿菌的抑制效果好。4.**應(yīng)用**:主要用于鏈球菌的增菌培養(yǎng),也可用于其他需氧菌和兼性厭氧菌的培養(yǎng)。**配制方法**:1.稱取35.8g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水。2.加熱攪拌至完全溶解。3.分裝后,在121℃高壓下滅菌15分鐘。**質(zhì)量控制**:-制備好的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行pH值、無菌性檢查和適用性檢查。-培養(yǎng)基的保存應(yīng)避光、密封,并在已驗(yàn)證的條件下貯藏。**應(yīng)用**:-用于鏈球菌的分離培養(yǎng),通過觀察菌落的生長情況和特征進(jìn)行鑒定。**注意事項(xiàng)**:-在配制和操作過程中,應(yīng)避免攝入、吸入、皮膚接觸,并在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備。哥倫比亞-MUG瓊脂平板不同的微生物對培養(yǎng)基的要求差異較大,因此在選擇水瓊脂培養(yǎng)基時(shí)需要考慮具體的研究目的和微生物的特性。
胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA)是一種常用的微生物固體培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于各種細(xì)菌的分離和培養(yǎng)。以下是TSA培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**成分**:TSA培養(yǎng)基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone,15g/L)、大豆胨(Soytone,5g/L)、氯化鈉(5g/L)和瓊脂(15g/L),這些成分為細(xì)菌提供氮源、維生素、生長因子以及維持滲透壓和凝固培養(yǎng)基。2.**pH值**:TSA培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.3±0.2(25℃),以滿足大多數(shù)細(xì)菌生長的需要。3.**用途**:TSA培養(yǎng)基適用于多種細(xì)菌的培養(yǎng),包括非選擇性增菌培養(yǎng)及用于阪崎腸桿菌的純化培養(yǎng)和產(chǎn)黃色素試驗(yàn)。4.**制備方法**:將TSA培養(yǎng)基的干粉加入到蒸餾水中,加熱攪拌至完全溶解,通常分裝到試管或平皿中,經(jīng)過高壓滅菌后備用。5.**保存條件**:未開封的TSA培養(yǎng)基通常在室溫下避光保存,保質(zhì)期可達(dá)三年。開封后應(yīng)旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊,并根據(jù)存放條件適當(dāng)延長保存期。6.**注意事項(xiàng)**:在稱量和操作過程中應(yīng)注意無菌操作,避免微生物污染。使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,防止吸潮。粉塵可能引起呼吸道不適,操作時(shí)應(yīng)佩戴口罩。7.**應(yīng)用**:TSA培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、食品檢測和環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實(shí)驗(yàn)的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實(shí)驗(yàn)室無菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)服和手套。-準(zhǔn)備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細(xì)菌),此時(shí)瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時(shí)。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。
改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)是一種用于微生物學(xué)研究和診斷的培養(yǎng)基,它具有一些特定的特點(diǎn)和用途:1.**選擇性分離培養(yǎng)基**:改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)主要用于李斯特氏菌的選擇性分離。它通過添加特定的抗生物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制其他非目標(biāo)微生物的生長,從而促進(jìn)目標(biāo)微生物——在這種情況下是李斯特氏菌的生長。2.**配方成分**:該培養(yǎng)基的配方包括酪胨、多價(jià)胨、牛肉浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、甘氨酸、氯化鋰和瓊脂等。這些成分為微生物提供了生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境。3.**pH值**:改良McBride瓊脂基礎(chǔ)(MMA)的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃),這為李斯特氏菌的生長提供了適宜的酸堿環(huán)境。4.**添加物**:在使用時(shí),每升培養(yǎng)基中需添加2.5g苯乙醇以及200mg環(huán)乙酰亞胺或30mg復(fù)達(dá)欣,這些添加物有助于抑制其他微生物的生長,提高李斯特氏菌分離的選擇性。5.**高壓滅菌**:在制備過程中,需要將培養(yǎng)基加熱至完全溶解,然后進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保培養(yǎng)基的無菌性。6.**冷卻和添加抗生物質(zhì)**:滅菌后,培養(yǎng)基需要冷卻至50℃,然后在無菌環(huán)境下加入抗生物質(zhì),備用。
由于其營養(yǎng)成分的豐富性,不同類型的微生物在血瓊脂基礎(chǔ)2號(hào)上能夠迅速生長,并形成明顯的菌落。腸球菌瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
DPD培養(yǎng)基(DPDMedium)是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,其特點(diǎn)是全無機(jī)鹽配方,適用于多種植物細(xì)胞的培養(yǎng)。以下是DPD培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**成分**:DPD培養(yǎng)基包含多種無機(jī)鹽和有機(jī)物,如硝酸銨、硫酸鉀、硫酸鎂、氯化鈣、硫酸二氫鉀、硫酸亞鐵、乙二胺四乙酸二鈉(EDTA二鈉)、硫酸錳、鉬酸鈉、硼酸、硫酸鋅、硫酸銅、氯化鈷、碘化鉀、煙酸、鹽酸吡哆醇、鹽酸硫胺素、肌醇、葉酸、甘氨酸、生物素、蔗糖、甘露醇、2,4-D和激動(dòng)素等。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值調(diào)整至5.8,以滿足植物細(xì)胞生長的需要。3.**用途**:DPD培養(yǎng)基主要用于植物組織的培養(yǎng),包括植物細(xì)胞、組織的生長和發(fā)育。4.**配制方法**:通常稱取一定量的DPD培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。5.**保存條件**:DPD培養(yǎng)基的保質(zhì)期通常為三年,應(yīng)避光、干燥保存,或根據(jù)需要保存于2-8°C。6.**注意事項(xiàng)**:在使用時(shí),應(yīng)檢查培養(yǎng)基是否有顏色變化、蒸發(fā)/脫水情況或微生物生長。培養(yǎng)基融化后應(yīng)立即使用,避免重復(fù)融化和長時(shí)間放置。7.**用法**:在使用前,需要調(diào)整pH值至5.8,并進(jìn)行高壓滅菌處理。DPD培養(yǎng)基因其成分穩(wěn)定和適用性廣,在植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。 腸球菌瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿