《數(shù)字化轉(zhuǎn)型和跨學(xué)科實(shí)踐暑期研討會(huì)》詳解
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改良R2A瓊脂(ModifiedR2Amedium)是一種應(yīng)用的低營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,用于微生物的分離、計(jì)數(shù)和鑒定,特別是在水質(zhì)檢測(cè)中用于測(cè)定細(xì)菌總數(shù)。以下是改良R2A瓊脂的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**成分**:-酵母浸出粉-蛋白胨-酪蛋白水解物-葡萄糖-可溶性淀粉-磷酸氫二鉀-無(wú)水硫酸鎂-酸鈉-瓊脂2.**pH值**:通常調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:-主要用于純化水中菌落總數(shù)的測(cè)定。-適用于EP(歐洲藥典)、USP(美國(guó)藥典)、ChP(中國(guó)藥典)標(biāo)準(zhǔn)。4.**配制方法**:-稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入到蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-調(diào)節(jié)pH值至適宜范圍。-進(jìn)行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘。5.**保存條件**:通常在2-8°C下保存。6.**注意事項(xiàng)**:-在稱量和操作過程中應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免微生物污染。-使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,防止吸潮。7.**應(yīng)用**:-在微生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、食品檢測(cè)和環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域有廣的應(yīng)用。8.**質(zhì)控結(jié)果**:質(zhì)控菌株接種后于30-35℃需氧培養(yǎng)48-120小時(shí),用于評(píng)估培養(yǎng)基的性能。改良R2A瓊脂因其營(yíng)養(yǎng)豐富、操作簡(jiǎn)便和應(yīng)用廣,成為實(shí)驗(yàn)室中常用的培養(yǎng)基之一。CAS培養(yǎng)基包含鉻天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化銨、鐵離子等成分,這些成分與微生物分泌的鐵載體反應(yīng)。胰酪大豆蛋白胨瓊脂平板
四號(hào)瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些主要特點(diǎn)和使用方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-牛肉浸粉:5.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-無(wú)水亞硫酸鈉:3.0g/L-十二烷基硫酸鈉:0.5g/L-豬膽粉:5.0g/L-利凡諾:0.03g/L-慶大霉素:500U/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.5±0.2(25℃)2.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;-氯化鈉維持均衡的滲透壓;-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長(zhǎng);-十二烷基硫酸鈉、豬膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH值可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性雜菌;-霍亂弧菌對(duì)酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強(qiáng)其生長(zhǎng);-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉培養(yǎng)基,加入1L蒸餾水或去離子水,加熱煮沸充分溶解,冷卻至50℃左右,每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。4.**使用方法**:-從冷藏柜中取出平板皿,并恢復(fù)至室溫。-將包裝整體送入試驗(yàn)地點(diǎn)。-試驗(yàn)或接種。-將平板從潔凈室取出,按規(guī)定的溫度和時(shí)間倒置培養(yǎng)。-觀察、計(jì)數(shù)。DCLS瓊脂平板巴氏芽孢桿菌的芽孢形成需要特定的培養(yǎng)條件,包括營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境因素。例如,使用改良的Schaeffer培養(yǎng)基。
營(yíng)養(yǎng)瓊脂方瓶(羅氏瓶)通常是指營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的一種包裝形式,適合實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物培養(yǎng)使用。營(yíng)養(yǎng)瓊脂是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基,用于非苛養(yǎng)微生物的培養(yǎng),以及在生化或血清學(xué)測(cè)試前的質(zhì)量控制和純度檢查。以下是營(yíng)養(yǎng)瓊脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-瓊脂:15.0g/L-終pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取33g營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-攪拌加熱煮沸至完全溶解。-分裝到方瓶(羅氏瓶)中,通常分裝量為100mL或500mL。-121℃高壓滅菌15分鐘。3.**使用方法**:-滅菌完成后,取出方瓶并冷卻至大約40-45°C。-如果需要富集,可在滅菌后加入血液或其他生物液體。-在無(wú)菌條件下,將培養(yǎng)基倒入無(wú)菌的培養(yǎng)皿中或作為液體培養(yǎng)基使用。-培養(yǎng)基凝固后,可將培養(yǎng)皿放置在熱空氣烤箱中,用較低溫度烘烤幾分鐘,以去除使用前培養(yǎng)皿上的任何水分。4.**儲(chǔ)存方法**:-粉末形式的培養(yǎng)基應(yīng)儲(chǔ)存在10至30°C之間,容器需緊密封閉。-制備好的培養(yǎng)基應(yīng)在20-30°C的環(huán)境中儲(chǔ)存。
腦心浸出液肉湯(BHI/BHIB)是一種微生物培養(yǎng)基,特別適用于培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌。以下是BHI培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**配方組成**:-蛋白胨:10.0g-脫水小牛腦浸粉:12.5g-脫水牛心浸粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:2.0g-磷酸氫二鈉:2.5g-pH值:7.4±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取38.5gBHI培養(yǎng)基粉末,加入1000ml蒸餾水。-加熱攪拌至完全溶解,通常在121℃下高壓滅菌15分鐘。3.**用途**:-用于培養(yǎng)各種苛養(yǎng)型致病微生物,如鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌。-用于培養(yǎng)單增李斯特菌,可極大的增加李斯特菌培養(yǎng)時(shí)的OD值。-加入腹水后,可用于淋球菌的培養(yǎng)。-用于葡萄球菌的血漿凝固酶試驗(yàn)。-作為檢測(cè)培養(yǎng)基,用于檢測(cè)水、廢水、肉類和食品。-作為藥敏實(shí)驗(yàn)的接種用培養(yǎng)基。-可用來配制血液培養(yǎng)基。4.**培養(yǎng)條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)。5.**保存條件**:-2-8°C保存。6.**注意事項(xiàng)**:-避免吸入和皮膚接觸。-使用前請(qǐng)檢查平板內(nèi)是否干裂或染菌,若長(zhǎng)菌請(qǐng)勿使用。-4°C儲(chǔ)存的平板出現(xiàn)冷凝水屬正?,F(xiàn)象,請(qǐng)?jiān)跐崈舡h(huán)境下將水倒出后使用。-請(qǐng)?jiān)跐崈舡h(huán)境下操作,開封后請(qǐng)盡快使用,避免雜菌干擾。木糖明膠培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、酵母浸粉、明膠、木糖、磷酸氫二鈉和酚紅等。
DTA培養(yǎng)基的pH值對(duì)微生物生長(zhǎng)有影響。pH值是描述溶液酸堿性的基本指標(biāo),對(duì)微生物的生長(zhǎng)和繁殖有深遠(yuǎn)的影響。微生物的適應(yīng)pH范圍各不相同,不同種類的微生物對(duì)pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范圍。pH值的過高或過低都可能對(duì)微生物的生長(zhǎng)造成不利影響。在DTA培養(yǎng)基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),這個(gè)pH值范圍是為嗜熱菌芽孢的分離培養(yǎng)而優(yōu)化的。在這個(gè)pH值下,胰酪蛋白胨能夠提供適宜的碳氮源和生長(zhǎng)因子,而葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑,瓊脂作為凝固劑,共同為嗜熱菌芽孢提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。當(dāng)培養(yǎng)基的pH值偏離這個(gè)范圍時(shí),可能會(huì)影響微生物的新陳代謝和酶活性,改變細(xì)胞膜的通透性,影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄,進(jìn)而影響微生物的生長(zhǎng)。例如,如果pH值過低,可能會(huì)抑制菌體中某些酶的活性,阻礙新陳代謝;如果pH值過高,可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性改變,影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。因此,在配制和使用DTA培養(yǎng)基時(shí),嚴(yán)格控制pH值是非常重要的,以確保微生物能夠在適宜的環(huán)境中生長(zhǎng)。哥倫比亞肉湯為非選擇性培養(yǎng)基,大多數(shù)微生物都能在其上生長(zhǎng)良好,因此常用于微生物的初步分離和培養(yǎng)。哥倫比亞血瓊脂平板培養(yǎng)皿
木醋桿菌的生長(zhǎng)和纖維素的合成對(duì)pH值有一定的要求,通常在pH 5.0至6.8之間。胰酪大豆蛋白胨瓊脂平板
氧化三甲胺(TMAO)培養(yǎng)基是一種專門用于培養(yǎng)和研究某些特定微生物的培養(yǎng)基,尤其是在厭氧菌和一些具有特定代謝途徑的細(xì)菌的研究中。以下是TMAO培養(yǎng)基的一些特點(diǎn):1.**促進(jìn)特定微生物生長(zhǎng)**:TMAO培養(yǎng)基含有氧化三甲胺作為關(guān)鍵成分,能夠刺激某些厭氧菌的生長(zhǎng)速率和產(chǎn)量,如在胰蛋白胨/酵母提取物培養(yǎng)基中加入TMAO,可以促進(jìn)葡萄糖的摩爾生長(zhǎng)產(chǎn)量翻倍。2.**作為末端電子受體**:TMAO在厭氧菌的代謝過程中充當(dāng)末端電子受體,促進(jìn)非氧化菌在無(wú)氧條件下的生長(zhǎng)。3.**微生物代謝研究**:TMAO培養(yǎng)基用于研究微生物如何將TMAO分解為三甲胺(TMA),這一過程對(duì)理解微生物的代謝途徑至關(guān)重要。4.**影響培養(yǎng)基理化性質(zhì)**:微生物在TMAO培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)可以影響培養(yǎng)基的電導(dǎo)率和pH值,這些變化可以用于監(jiān)測(cè)微生物的代謝活動(dòng)。5.**與心血管疾病相關(guān)**:TMAO和其前體物質(zhì)TMA在心血管疾病中的作用引起了關(guān)注,TMAO培養(yǎng)基有助于研究這些代謝物在疾病發(fā)展中的作用。6.**微生物群落影響**:TMAO的代謝與腸道微生物群落的組成和功能密切相關(guān),TMAO培養(yǎng)基可以用于研究腸道微生物如何影響宿主的代謝和健康。胰酪大豆蛋白胨瓊脂平板