PK瓊脂培養(yǎng)基,也稱為Pikovskaya'sAgar,是一種用于檢測(cè)解磷微生物(phosphatesolubilizingmicroorganisms)的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的原理基于解磷微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中能夠?qū)⒉蝗苄缘牧姿猁}轉(zhuǎn)化為可溶性形式,從而使得培養(yǎng)基中的磷酸鈣溶解,導(dǎo)致培養(yǎng)基的透明度發(fā)生變化。**配方組成**:-酵母提取物:0.5g-D-葡萄糖:10.0g-磷酸鈣:5.0g-硫酸銨:0.5g-氯化鉀:0.2g-硫酸鎂:0.1g-硫酸錳:0.0001g-硫酸亞鐵:0.0001g-瓊脂:15.0g**配制方法**:1.使用1000ml蒸餾水重懸31.3g培養(yǎng)基。2.不斷攪動(dòng)并加熱,煮沸1分鐘使培養(yǎng)基完全溶解。3.121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘。4.冷卻至50°C時(shí),分裝15ml培養(yǎng)基到每個(gè)無(wú)菌培養(yǎng)皿中。**培養(yǎng)條件**:-通常在35°C下培養(yǎng)48小時(shí)。**觀察指標(biāo)**:-在PK瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的解磷微生物菌落周圍的培養(yǎng)基由不透明變透明,通過(guò)觀察培養(yǎng)基的透明度變化來(lái)判斷微生物是否具有解磷能力。**保存條件**:-密封,2-30°C避光保存。**注意事項(xiàng)**:-避免吸入和皮膚接觸。這種培養(yǎng)基在土壤微生物學(xué)、植物病理學(xué)和環(huán)境微生物學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,特別是在研究植物-微生物相互作用以及微生物對(duì)土壤養(yǎng)分循環(huán)的貢獻(xiàn)方面。水瓊脂培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)研究的不同領(lǐng)域,包括菌落計(jì)數(shù)、分離純培養(yǎng)、鑒定和抗生物質(zhì)敏感性測(cè)試等。結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBDA)培養(yǎng)皿
營(yíng)養(yǎng)瓊脂方瓶(羅氏瓶)通常是指營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的一種包裝形式,適合實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物培養(yǎng)使用。營(yíng)養(yǎng)瓊脂是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基,用于非苛養(yǎng)微生物的培養(yǎng),以及在生化或血清學(xué)測(cè)試前的質(zhì)量控制和純度檢查。以下是營(yíng)養(yǎng)瓊脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-瓊脂:15.0g/L-終pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取33g營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-攪拌加熱煮沸至完全溶解。-分裝到方瓶(羅氏瓶)中,通常分裝量為100mL或500mL。-121℃高壓滅菌15分鐘。3.**使用方法**:-滅菌完成后,取出方瓶并冷卻至大約40-45°C。-如果需要富集,可在滅菌后加入血液或其他生物液體。-在無(wú)菌條件下,將培養(yǎng)基倒入無(wú)菌的培養(yǎng)皿中或作為液體培養(yǎng)基使用。-培養(yǎng)基凝固后,可將培養(yǎng)皿放置在熱空氣烤箱中,用較低溫度烘烤幾分鐘,以去除使用前培養(yǎng)皿上的任何水分。4.**儲(chǔ)存方法**:-粉末形式的培養(yǎng)基應(yīng)儲(chǔ)存在10至30°C之間,容器需緊密封閉。-制備好的培養(yǎng)基應(yīng)在20-30°C的環(huán)境中儲(chǔ)存。玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)皿長(zhǎng)雙歧桿菌和嬰兒雙歧桿菌在PYG培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況通常表現(xiàn)為圓形凸起,奶油色,邊緣整齊光滑的菌落 。
四號(hào)瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些主要特點(diǎn)和使用方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-牛肉浸粉:5.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-無(wú)水亞硫酸鈉:3.0g/L-十二烷基硫酸鈉:0.5g/L-豬膽粉:5.0g/L-利凡諾:0.03g/L-慶大霉素:500U/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.5±0.2(25℃)2.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;-氯化鈉維持均衡的滲透壓;-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長(zhǎng);-十二烷基硫酸鈉、豬膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH值可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性雜菌;-霍亂弧菌對(duì)酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強(qiáng)其生長(zhǎng);-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉培養(yǎng)基,加入1L蒸餾水或去離子水,加熱煮沸充分溶解,冷卻至50℃左右,每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。4.**使用方法**:-從冷藏柜中取出平板皿,并恢復(fù)至室溫。-將包裝整體送入試驗(yàn)地點(diǎn)。-試驗(yàn)或接種。-將平板從潔凈室取出,按規(guī)定的溫度和時(shí)間倒置培養(yǎng)。-觀察、計(jì)數(shù)。
DTA培養(yǎng)基的pH值對(duì)微生物生長(zhǎng)有影響。pH值是描述溶液酸堿性的基本指標(biāo),對(duì)微生物的生長(zhǎng)和繁殖有深遠(yuǎn)的影響。微生物的適應(yīng)pH范圍各不相同,不同種類的微生物對(duì)pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范圍。pH值的過(guò)高或過(guò)低都可能對(duì)微生物的生長(zhǎng)造成不利影響。在DTA培養(yǎng)基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),這個(gè)pH值范圍是為嗜熱菌芽孢的分離培養(yǎng)而優(yōu)化的。在這個(gè)pH值下,胰酪蛋白胨能夠提供適宜的碳氮源和生長(zhǎng)因子,而葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑,瓊脂作為凝固劑,共同為嗜熱菌芽孢提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。當(dāng)培養(yǎng)基的pH值偏離這個(gè)范圍時(shí),可能會(huì)影響微生物的新陳代謝和酶活性,改變細(xì)胞膜的通透性,影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄,進(jìn)而影響微生物的生長(zhǎng)。例如,如果pH值過(guò)低,可能會(huì)抑制菌體中某些酶的活性,阻礙新陳代謝;如果pH值過(guò)高,可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性改變,影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。因此,在配制和使用DTA培養(yǎng)基時(shí),嚴(yán)格控制pH值是非常重要的,以確保微生物能夠在適宜的環(huán)境中生長(zhǎng)。通常將卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的粉成分溶解于蒸餾水中,加熱煮沸以完全溶解,然后高壓蒸汽滅菌15分鐘。
輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)基礎(chǔ),也稱為輕型唾液鏈球菌瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ),是一種用于分離培養(yǎng)輕型鏈球菌(綠色鏈球菌)、唾液鏈球菌(非溶血性鏈球菌)和腸球菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是它的一些特點(diǎn):1.**成分**:該培養(yǎng)基的配方中含有胰酪蛋白胨、牛肉粉、磷酸氫二鉀、葡萄糖、蔗糖、臺(tái)盼藍(lán)、結(jié)晶紫和瓊脂等。其中,胰酪蛋白胨和牛肉粉提供氮源和碳源,蔗糖作為可發(fā)酵的碳水化合物來(lái)源,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,臺(tái)盼藍(lán)和結(jié)晶紫作為染料提供菌落顏色,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性**:通過(guò)添加結(jié)晶紫和亞碲酸鉀,該培養(yǎng)基可以抑制大多數(shù)革蘭氏陰性桿菌和大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng),而對(duì)鏈球菌和腸球菌的生長(zhǎng)影響較小。4.**應(yīng)用**:輕唾瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)主要用于輕型鏈球菌、唾液鏈球菌和腸球菌的分離培養(yǎng),這些細(xì)菌在培養(yǎng)基上可以形成具有特征顏色的菌落,有助于后續(xù)的鑒定和分析。5.**配制方法**:通常稱取90g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌結(jié)束后,冷卻至50-55℃,加入無(wú)菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中。哥倫比亞肉湯為非選擇性培養(yǎng)基,大多數(shù)微生物都能在其上生長(zhǎng)良好,因此常用于微生物的初步分離和培養(yǎng)。哥倫比亞血瓊脂平板
PYG培養(yǎng)基的干粉應(yīng)在避光、干燥處保存,未開(kāi)封的保質(zhì)期通常為三年。使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊 。結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBDA)培養(yǎng)皿
變異鏈球菌(Streptococcusmutans)是一種在口腔中發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌,與齲齒的形成有關(guān)。它是一種革蘭陽(yáng)性球菌,常以成對(duì)或短鏈狀排列。在胰蛋白胨培養(yǎng)基中和含有95%氮?dú)饧?%二氧化碳混合氣體的環(huán)境下生長(zhǎng)良好。對(duì)于變異鏈球菌的培養(yǎng),通常使用TSA+5%脫纖維蛋白羊血(血瓊脂平板)作為培養(yǎng)基。在這種培養(yǎng)基上,變異鏈球菌的菌落特征為較?。ㄖ睆郊s1mm)、灰白色、凸起、邊緣不齊、干燥、有α溶血環(huán)。在選擇培養(yǎng)基時(shí),需要考慮培養(yǎng)基的pH值、營(yíng)養(yǎng)成分、氧氣需求和抑制劑等因素,以確保目標(biāo)細(xì)菌能夠在抑制雜菌的同時(shí)良好生長(zhǎng)。例如,改良愛(ài)德華培養(yǎng)基(Edwardmodifiedmedium)是一種常用的培養(yǎng)基,它含有血液、血清或其它營(yíng)養(yǎng)成分,適合于培養(yǎng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌,如鏈球菌。在實(shí)驗(yàn)室中,變異鏈球菌的培養(yǎng)和鑒定是一個(gè)多步驟的過(guò)程,包括接種、培養(yǎng)、觀察菌落特征、進(jìn)行生化試驗(yàn)和藥敏分析等。通過(guò)這些步驟,可以準(zhǔn)確地識(shí)別和鑒定變異鏈球菌,從而為臨床診斷提供依據(jù)。結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBDA)培養(yǎng)皿