牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)是一種用于分離培養(yǎng)李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化鈉、七葉苷、檸檬酸鐵銨、氯化鋰和瓊脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特點(diǎn)**:1.**選擇性**:含有氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如多粘菌素E、放線菌酮、吖啶黃素、頭孢雙硫唑甲氧、磷霉素),這些成分能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng),特別是非李斯特氏菌。2.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng),符合ISO和SN標(biāo)準(zhǔn)。3.**配制方法**:通常稱取5.85g的OXA基礎(chǔ)粉末,溶解在100mL蒸餾水中,高壓滅菌15分鐘后冷卻至50℃,再加入配套的添加劑,混勻后傾入無菌平皿備用。4.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在OXA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí),會(huì)形成黑色菌落,并且菌落周圍可能有黑色環(huán)。牛津瓊脂基礎(chǔ)因其高選擇性和特異性,是檢測(cè)食品和水樣本中李斯特氏菌污染的重要工具。明膠的凝固點(diǎn)在28℃左右,受運(yùn)輸過程的溫度及震蕩影響,出現(xiàn)培養(yǎng)基在管壁凝固形成不規(guī)則狀,此為正常現(xiàn)象。改良番茄汁瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
DTA培養(yǎng)基,也稱為葡萄糖胰蛋白胨瓊脂,是一種用于分離培養(yǎng)嗜熱菌芽孢的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**用途**:DTA培養(yǎng)基主要用于乳制品中嗜熱需氧芽孢菌計(jì)數(shù),以及嗜熱菌芽孢(包括需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養(yǎng)。2.**成分**:其配方包含胰酪蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和溴甲酚紫。具體成分為每升培養(yǎng)基中包含胰酪蛋白胨10.0克、葡萄糖5.0克、瓊脂15.0克和溴甲酚紫0.04克。3.**pH值**:DTA培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在6.7±0.1(25℃)。4.**檢驗(yàn)原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。5.**用法**:稱取DTA培養(yǎng)基30.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。6.**生長(zhǎng)特征**:嗜熱脂肪芽孢桿菌在DTA培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特征為黃色菌落。7.**質(zhì)量控制**:進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn)時(shí),按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置55℃需氧培養(yǎng)48小時(shí)?;厥章视?jì)算時(shí),用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。8.**儲(chǔ)存條件**:DTA培養(yǎng)基應(yīng)貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋;貯存期三年。改良高氏合成一號(hào)瓊脂培養(yǎng)皿GC肉湯基礎(chǔ)用于致病性奈瑟氏菌的分離,每100ml添加IsoVitaleX添加劑、V-C-N抑菌劑、無菌血紅蛋白粉各1支 。
SH培養(yǎng)基(Schenk&HildebrandtMedium)是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適合于單子葉和雙子葉植物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)。它含有相對(duì)較低的銨鹽和較高的硝酸鹽,以及豐富的維生素和無機(jī)鹽,適合許多植物種類的生長(zhǎng)。**配方組成**:-硝酸鉀(KNO3):2500.00mg/L-磷酸二氫銨(NH4H2PO4):300.00mg/L-氯化鈣(CaCl2·2H2O):200.00mg/L-硫酸鎂(MgSO4):195.34mg/L-硫酸錳(MnSO4·H2O):10.00mg/L-硼酸(H3BO3):5.00mg/L-碘化鉀(KI):1.00mg/L-鉬酸鈉(Na2MoO4·2H2O):0.10mg/L-硫酸鋅(ZnSO4·7H2O):1.00mg/L-硫酸銅(CuSO4·5H2O):0.20mg/L-氯化鈷(CoCl2·6H2O):0.10mg/L-硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O):15.00mg/L-EDTA二鈉(Na2EDTA·2H2O):20.00mg/L-肌醇(myo-Inositol):1000.00mg/L-鹽酸硫胺素(Thiaminehydrochloride):5.00mg/L-鹽酸吡哆醇(Pyridoxinehydrochloride):0.50mg/L-煙酸(Nicotinicacid):5.00mg/L-蔗糖(Sucrose):20000.00mg/L**配制方法**:1.用600ml滅菌后的蒸餾水溶解脫水培養(yǎng)基,用少量蒸餾水沖洗殘余培養(yǎng)基粉末。2.輕輕攪動(dòng)使培養(yǎng)基完全溶解。3.加入所有熱穩(wěn)定添加劑。
NGKG瓊脂基礎(chǔ)是一種用于食品中蠟樣芽孢桿菌分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)的配方包含蛋白胨、酵母浸粉、氯化鈉、甘氨酸、苯酚紅和瓊脂等成分。蛋白胨和酵母浸粉提供碳源、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;氯化鈉維持滲透壓;甘氨酸提供氮源;苯酚紅作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。2.**pH調(diào)節(jié)**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)的pH值通常調(diào)節(jié)在6.8±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加物**:在冷卻至50℃左右時(shí),需要加入20%卵黃液100mL(卵黃液制備:取無菌卵黃液20mL,生理鹽水80mL,混勻)。卵黃液提供卵磷脂,產(chǎn)卵磷脂酶的細(xì)菌可水解卵磷脂,使其菌落周圍形成一個(gè)白色的沉淀環(huán)。5.**抗生物質(zhì)**:每200mL培養(yǎng)基中添加多粘菌素B溶液1支,以抑制革蘭氏陰性細(xì)菌生長(zhǎng)。6.**用途**:NGKG瓊脂基礎(chǔ)主要用于食品中蠟樣芽孢桿菌的分離培養(yǎng)。7.**培養(yǎng)特征**:在30℃±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)后,典型的蠟樣芽孢桿菌在NGKG瓊脂基礎(chǔ)上表現(xiàn)為淺紅色菌落,邊緣不規(guī)則,有卵磷脂沉淀環(huán)。8.**質(zhì)量控制**:通過接種質(zhì)控菌株并觀察培養(yǎng)特征來驗(yàn)證培養(yǎng)基的質(zhì)量。 PK瓊脂培養(yǎng)基的制備通常包括將干燥的培養(yǎng)基粉末與適量的水混合,加熱至瓊脂完全溶解,然后分裝到培養(yǎng)皿中。
芽孢桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)是一種專為芽孢桿菌屬細(xì)菌設(shè)計(jì)的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營(yíng)養(yǎng)成分**:通常包含碳源、氮源以及促進(jìn)芽孢形成的必需微量元素。例如,葡萄糖作為碳源,硫酸銨或酵母提取物作為氮源。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0±0.2(25℃),以保證細(xì)菌的良好生長(zhǎng)。3.**配方**:一個(gè)典型的芽孢桿菌培養(yǎng)基配方可能包含葡萄糖、磷酸鈣、硫酸銨、氯化鉀、七水硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵和酵母提取物等成分。4.**制備方法**:首先稱取培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,接種菌種,并在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時(shí)間。5.**應(yīng)用**:主要用于芽孢桿菌的平板計(jì)數(shù),可以用于檢測(cè)和分離芽孢桿菌,包括枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等。6.**注意事項(xiàng)**:由于培養(yǎng)基中含有不溶性磷酸鈣,滅菌后可能會(huì)有白色沉淀,因此在倒平板前需要充分搖勻培養(yǎng)基,以確保磷酸鈣均勻分布。7.**質(zhì)量控制**:接種質(zhì)控菌株后,應(yīng)在36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72小時(shí),以驗(yàn)證培養(yǎng)基的性能和菌株的生長(zhǎng)情況。由于其營(yíng)養(yǎng)成分的豐富性,不同類型的微生物在血瓊脂基礎(chǔ)2號(hào)上能夠迅速生長(zhǎng),并形成明顯的菌落。改良番茄汁瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
CVT瓊脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、結(jié)晶紫、TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)和瓊脂等成分。改良番茄汁瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實(shí)驗(yàn)的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實(shí)驗(yàn)室無菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)服和手套。-準(zhǔn)備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細(xì)菌),此時(shí)瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測(cè)的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時(shí)。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長(zhǎng)情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。