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四號(hào)瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-無(wú)水亞硫酸鈉:3.0g-十二烷基硫酸鈉:0.5g-豬膽汁粉:5.0g-雷佛奴爾:0.03g-慶大霉素:500U-瓊脂:15.0g-pH值約為8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉,加入到1L蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-冷卻至50-55℃時(shí),每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。-待凝固后備用。4.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。-氯化鈉維持均衡的滲透壓。-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長(zhǎng)。-檸檬酸鈉、十二烷基硫酸鈉、牛膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性雜菌。-霍亂弧菌對(duì)酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強(qiáng)其生長(zhǎng)。-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。細(xì)菌保存培養(yǎng)基的基本原理是通過(guò)降低細(xì)菌的新陳代謝速度,使細(xì)菌的生命活動(dòng)處于半永久性的休眠狀態(tài)。酵母粉瓊脂平板
DTA培養(yǎng)基的pH值對(duì)微生物生長(zhǎng)有影響。pH值是描述溶液酸堿性的基本指標(biāo),對(duì)微生物的生長(zhǎng)和繁殖有深遠(yuǎn)的影響。微生物的適應(yīng)pH范圍各不相同,不同種類的微生物對(duì)pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范圍。pH值的過(guò)高或過(guò)低都可能對(duì)微生物的生長(zhǎng)造成不利影響。在DTA培養(yǎng)基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),這個(gè)pH值范圍是為嗜熱菌芽孢的分離培養(yǎng)而優(yōu)化的。在這個(gè)pH值下,胰酪蛋白胨能夠提供適宜的碳氮源和生長(zhǎng)因子,而葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑,瓊脂作為凝固劑,共同為嗜熱菌芽孢提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。當(dāng)培養(yǎng)基的pH值偏離這個(gè)范圍時(shí),可能會(huì)影響微生物的新陳代謝和酶活性,改變細(xì)胞膜的通透性,影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄,進(jìn)而影響微生物的生長(zhǎng)。例如,如果pH值過(guò)低,可能會(huì)抑制菌體中某些酶的活性,阻礙新陳代謝;如果pH值過(guò)高,可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性改變,影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。因此,在配制和使用DTA培養(yǎng)基時(shí),嚴(yán)格控制pH值是非常重要的,以確保微生物能夠在適宜的環(huán)境中生長(zhǎng)。酵母粉瓊脂平板CAS培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于細(xì)菌鐵載體的篩選試驗(yàn),特別是在研究植物根際促生菌和微生物與植物相互作用的領(lǐng)域 。
SlantzandBartley培養(yǎng)基是一種專門設(shè)計(jì)用于分離和計(jì)數(shù)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于水和食品樣本中的腸球菌檢測(cè)。以下是它的一些特點(diǎn):1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、磷酸二氫鉀、疊氮鈉和瓊脂等成分。其中,胰蛋白胨和酵母提取物提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),葡萄糖作為碳源,磷酸二氫鉀作為緩沖劑,疊氮鈉作為抑菌劑抑制革蘭氏陰性菌的生長(zhǎng),瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25°C),為腸球菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性**:疊氮鈉對(duì)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,確保培養(yǎng)基的選擇性。4.**應(yīng)用**:開(kāi)始設(shè)計(jì)用于通過(guò)膜過(guò)濾技術(shù)檢測(cè)和計(jì)數(shù)腸球菌,但也證明作為直接涂布培養(yǎng)基同樣有效。5.**配制方法**:通常稱取41.5g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水,加熱至沸騰以溶解瓊脂,高壓滅菌20分鐘。滅菌后冷卻至45-50°C,并分裝進(jìn)培養(yǎng)皿。6.**質(zhì)量控制**:通過(guò)特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行測(cè)試,確保培養(yǎng)基支持目標(biāo)菌株的生長(zhǎng)。例如,腸球菌ATCC29212在該培養(yǎng)基上應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長(zhǎng),而大腸桿菌ATCC25922則應(yīng)被抑制。7.**儲(chǔ)存條件**:未配制的培養(yǎng)基粉末應(yīng)密封保存在15-30°C的陰涼干燥處。配制好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在2-8°C。
Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細(xì)菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些特點(diǎn):1.**無(wú)血培養(yǎng)基**:Karmali氏培養(yǎng)基是一種無(wú)血的培養(yǎng)基,這使得它在某些應(yīng)用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟(jì)。2.**選擇性培養(yǎng)**:該培養(yǎng)基含有萬(wàn)古霉素(vancomycin)和兩性霉素B(amphotericinB)等選擇性添加劑,這些添加劑有助于抑制其他非目標(biāo)微生物的生長(zhǎng),從而提高目標(biāo)彎曲桿菌的分離率。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,Karmali氏培養(yǎng)基通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長(zhǎng)。4.**菌落特征**:在42°C下培養(yǎng)42小時(shí)后,空腸彎曲桿菌菌株在這種培養(yǎng)基上通常產(chǎn)生灰色、濕潤(rùn)、平鋪的菌落,這些特征有助于識(shí)別彎曲桿菌。5.**配方**:Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方包含特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化鈉、活性碳和血晶素(hemin),以及瓊脂作為固化劑。這些成分為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供了必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并且活性碳有助于中和代謝產(chǎn)生的產(chǎn)物。6.**應(yīng)用**:這種培養(yǎng)基被ISO委員會(huì)推薦使用,適用于從食品、動(dòng)物飼料和臨床樣本中分離彎曲桿菌。TSFA是一種通用的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,用于各種微生物的培養(yǎng),如細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定,特別是適用于濾膜法細(xì)菌總數(shù)測(cè)定 。
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)是一種用于分離培養(yǎng)李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化鈉、七葉苷、檸檬酸鐵銨、氯化鋰和瓊脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特點(diǎn)**:1.**選擇性**:含有氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如多粘菌素E、放線菌酮、吖啶黃素、頭孢雙硫唑甲氧、磷霉素),這些成分能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng),特別是非李斯特氏菌。2.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng),符合ISO和SN標(biāo)準(zhǔn)。3.**配制方法**:通常稱取5.85g的OXA基礎(chǔ)粉末,溶解在100mL蒸餾水中,高壓滅菌15分鐘后冷卻至50℃,再加入配套的添加劑,混勻后傾入無(wú)菌平皿備用。4.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在OXA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí),會(huì)形成黑色菌落,并且菌落周圍可能有黑色環(huán)。牛津瓊脂基礎(chǔ)因其高選擇性和特異性,是檢測(cè)食品和水樣本中李斯特氏菌污染的重要工具。由于其營(yíng)養(yǎng)成分的豐富性,不同類型的微生物在血瓊脂基礎(chǔ)2號(hào)上能夠迅速生長(zhǎng),并形成明顯的菌落。GAM瓊脂平板
TGC液體培養(yǎng)基不僅用于無(wú)菌試驗(yàn),還可用于牛奶和乳制品中霉菌及酵母菌總數(shù)的測(cè)定。酵母粉瓊脂平板
支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含精氨酸)是一種專門用于培養(yǎng)支原體的培養(yǎng)基,它包含精氨酸作為生長(zhǎng)因子,適用于那些需要精氨酸才能生長(zhǎng)的支原體,如口腔支原體等。以下是該培養(yǎng)基的一些特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:通常包含豬胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、葡萄糖、L-精氨酸和酚紅等成分。2.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末,按照說(shuō)明書(shū)比例(通常是25.52g/L)溶解在蒸餾水中。-加熱溶解并調(diào)節(jié)pH至7.1-0.2(25℃)。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至室溫后,無(wú)菌操作下加入滅活小牛血清或馬血清(通常為200mL)和青霉素(通常為80萬(wàn)單位)。-混勻后分裝到無(wú)菌試管中備用。3.**用途**:主要用于藥品和生物制品中支原體的檢測(cè),特別是口腔支原體的培養(yǎng)和檢測(cè)。4.**培養(yǎng)條件**:通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)7-14天。5.**觀察指標(biāo)**:培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,支原體生長(zhǎng)時(shí)會(huì)因代謝產(chǎn)物改變培養(yǎng)基的pH值,導(dǎo)致顏色變化。例如,口腔支原體分解精氨酸產(chǎn)堿,使培養(yǎng)基顏色由橙色變?yōu)榧t色。6.**質(zhì)量控制**:通過(guò)接種已知的質(zhì)控菌株來(lái)驗(yàn)證培養(yǎng)基的靈敏度和有效性。酵母粉瓊脂平板