1.DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細胞膜染色液制備（1）配置DMSO或EtOH儲存液：儲存液用DMSO或EtOH配置濃度1～5mM。注意：未使用的儲存液保存在-20°C，避免反復(fù)凍融。（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲存液，配制濃度為1～5μM的工作液。注意：工作液的**終濃度是根據(jù)不同細胞和實驗的經(jīng)驗來配制。可以從推薦濃度的十倍以上尋找比較好條件。

2.懸浮細胞染色（1）懸浮細胞密度為1×106/mL加入到工作液中。（2）在37℃培養(yǎng)細胞2～20分鐘，不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同。（3）染色細胞試管在1000～1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。（4）傾倒上清液，再次緩慢加入預(yù)溫37℃的培養(yǎng)液。（5）重復(fù)（3），（4）步驟兩次以上。 PI是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。遼寧熒光染料luciferin

熒光染料標記蛋白或肽技術(shù)是一種常見的蛋白質(zhì)體外標記技術(shù)。除了GFP等熒光蛋白的融合表達外，目標蛋白還可以通過熒光染料標記直接進行下游實驗操作，如***跟蹤、細胞分選等。

FITC熒光標記的原理是什么？

熒光標記所依賴的化合物稱為熒光材料。熒光材料是指具有共軛雙鍵系統(tǒng)化學結(jié)構(gòu)的化合物。當受到紫外線或藍紫光的照射時，它可以被刺激為刺激狀態(tài)。當激發(fā)狀態(tài)恢復(fù)到基本狀態(tài)時，它會發(fā)出熒光。蛋白質(zhì)熒光標記技術(shù)利用熒光材料的共價結(jié)合在目標分子的基團上，利用其熒光特性提供研究對象的信息。 蘇州熒光染料DAPISuper Fluor活化酯（與Invitrogen的Alexa Fluor活化酯完全相同）。

除了以上應(yīng)用，吲哚菁綠還可以用于生物識別和藥物輸送。在生物識別中，吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合，從而實現(xiàn)對這些分子的檢測和定量分析。這項技術(shù)在生物醫(yī)學研究和臨床診斷中有著廣泛的應(yīng)用前景。此外，吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分，將藥物包裹在其分子結(jié)構(gòu)中，通過近紅外光***釋放藥物，實現(xiàn)靶向***。吲哚菁綠作為一種多功能的熒光染料，在醫(yī)學和生物領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。其綠色溶解度的優(yōu)良性能，使其能夠在水溶液中快速溶解，為其在醫(yī)學影像學、光熱***、生物識別和藥物輸送等方面的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。隨著科學技術(shù)的不斷進步，相信吲哚菁綠在未來將發(fā)揮更大的潛力，為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻。吲哚菁綠作為一種熒光染料，在醫(yī)學影像學中的應(yīng)用是**為突出的。它可以通過靜脈注射進入人體血液循環(huán)系統(tǒng)，并在近紅外激光的照射下發(fā)出熒光信號。這種熒光信號可以被**的顯像設(shè)備捕獲和記錄，從而形成高分辨率、高對比度的影像。這樣的影像可以幫助醫(yī)生觀察和分析血管、淋巴系統(tǒng)以及**等病變的情況，提供重要的診斷依據(jù)。

5(6)-FITC(Fluorescein5(6)-isothiocyanate)是一種胺活性衍生物的熒光染料，具有廣泛的應(yīng)用，作為抗體和其他探針標記，用熒光顯微鏡，流式細胞儀、免疫熒光方法如ELISA和Western印跡實驗。熒光素衍生物具有高吸收率、優(yōu)異的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性，是流式細胞儀和免疫熒光中生物檢測**常用的熒光標記之一。**常用的熒光素包括用于標記蛋白質(zhì)（特別是抗體）的異硫氰酸熒光素[5(6)-FITC)]，5-FITC和用于標記肽和寡核苷酸的羧基熒光素（5-FAM和5(6)-FAM）。BIOFOUNT提供***的基于熒光素的染料、底物和偶聯(lián)物，以及一系列具有針對細胞標記和檢測優(yōu)化的特性的質(zhì)量iFluor?熒光標記染料。羰花青染料用作 Di 來標記細胞、細胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。

一：染色液制備1、配制儲液：儲液用無水DMSO或無水EtOH配制，濃度1~5mM。注：未使用的儲液建議分裝后儲存在-20℃，避免反復(fù)凍融。2、工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲液，配制濃度為1~5μM的工作液。注：工作液**終濃度建議根據(jù)不同細胞系和實驗體系來優(yōu)化。建議從推薦濃度的10倍范圍內(nèi)開始比較好濃度的摸索。二：懸浮細胞染色1、加入適當體積的染色工作液重懸細胞，使其密度為1×106/mL。2、37℃孵育細胞2~20min，不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同?？梢?0min作為起始孵育時間，之后優(yōu)化體系以得到均一的標記效果。3、孵育結(jié)束，1000~1500rpm離心5min。傾倒上清液，再次緩慢加入37℃預(yù)熱的生長培養(yǎng)液重懸細胞。4、重復(fù)步驟3兩次以上。南京星葉生物熒光染料標記蛋白。蘇州熒光染料DAPI

熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。遼寧熒光染料luciferin

細胞培養(yǎng)后，需要對其生長情況、形態(tài)甚至生物學性狀進行觀察。由于細胞小而復(fù)雜，若不借助適當?shù)氖侄?，難以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu)，更難發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前，已有多種研究細胞的技術(shù)，從光學顯微鏡到電子顯微鏡，從一般細胞化學法到免疫化學法。細胞染色是研究細胞生物學特征的一種常用手段，然而，對于細胞實驗新手來說，想要獲得一張漂亮的細胞染色圖并不容易。染色試劑不會選、細胞染色不均勻、染色時切片脫落等都是很常見的問題。

細胞膜常用染料DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見的細胞膜染料（見表2），它們是一族親脂性的熒光染料，用于細胞的形態(tài)學和結(jié)構(gòu)研究。該系列染料進入細胞膜后，會在整個細胞膜上側(cè)向擴散，在比較好濃度時可以使整個細胞膜染色。其中DiD染料的染色效率高，染色均一，熒光不易猝滅，無明顯細胞毒性，且受自身熒光背景干擾小。目前DiD已成功應(yīng)用于多種細胞的體內(nèi)示蹤研究，如Treg細胞、間充質(zhì)干細胞、腫瘤細胞、造血干祖細胞等。 遼寧熒光染料luciferin

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