動(dòng)物視網(wǎng)膜成像技術(shù)為基礎(chǔ)研究提供了有力工具。從小鼠視網(wǎng)膜多種成像方式探討眼科光學(xué)成像技術(shù)進(jìn)展：張鵬飛、張廷瑋、宋維業(yè)闡述了近年來在小鼠和人眼視網(wǎng)膜高精度光學(xué)成像領(lǐng)域出現(xiàn)的技術(shù)突破6。幾種在人眼視網(wǎng)膜成像中廣泛應(yīng)用的光學(xué)成像技術(shù)在動(dòng)物視網(wǎng)膜中得到了成功應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)了對(duì)動(dòng)物視網(wǎng)膜的高精度細(xì)胞級(jí)別成像，為科研工作者提供了有力工具。同時(shí)，動(dòng)物視網(wǎng)膜的研究工作也開發(fā)了一些新型成像技術(shù)或增強(qiáng)了對(duì)人眼視網(wǎng)膜功能機(jī)理的理解。綜上所述，動(dòng)物成像技術(shù)在磁共振成像、熱成像、X射線發(fā)光成像、近紅外高光譜成像、非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物超高場(chǎng)磁共振腦成像、新型動(dòng)物搖籃的小動(dòng)物多重成像、紅外成像以及動(dòng)物視網(wǎng)膜成像等方面都取得了***的發(fā)展，為動(dòng)物研究和相關(guān)領(lǐng)域的發(fā)展提供了重要的技術(shù)支持?；诓《镜霓D(zhuǎn)染，或者更具體地稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)，涉及使用病毒載體將特定的核酸序列帶入宿主細(xì)胞。Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑效率高

準(zhǔn)確控制脂質(zhì)體與核酸的比例是關(guān)鍵。通過實(shí)驗(yàn)確定比較好的脂質(zhì)體 - 核酸復(fù)合物比例，一般可以進(jìn)行梯度實(shí)驗(yàn)，從較低比例開始逐步增加，觀察轉(zhuǎn)染效率的變化。例如，不同類型的細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)體和 RNA 或 DNA 的比例要求不同，像在轉(zhuǎn)染 HEK293 細(xì)胞時(shí)，可能 1:3（脂質(zhì)體：核酸）的比例比較合適，而對(duì)于較難轉(zhuǎn)染的原代細(xì)胞，可能需要適當(dāng)增加脂質(zhì)體的用量。

不同配方的脂質(zhì)體在轉(zhuǎn)染效率上有差異。根據(jù)細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的脂質(zhì)體試劑。例如，一些脂質(zhì)體含有特殊的功能成分，如靶向基團(tuán)可以增強(qiáng)與特定細(xì)胞的結(jié)合，或者具有促進(jìn)內(nèi)吞體逃逸的成分，從而提高轉(zhuǎn)染效率。新型的脂質(zhì)體制劑不斷涌現(xiàn)，如含有可電離陽離子脂質(zhì)的脂質(zhì)體，在生理 pH 條件下呈電中性，減少與血清蛋白的相互作用，進(jìn)入酸性的內(nèi)體后帶正電，更有利于與內(nèi)體膜融合，釋放核酸，在提高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)降低細(xì)胞毒性。 西安轉(zhuǎn)染試劑企業(yè)流式細(xì)胞術(shù)可以更精確地定量表達(dá)特定熒光基因的細(xì)胞，以評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。

考慮多因子轉(zhuǎn)染能力如果實(shí)驗(yàn)需要同時(shí)轉(zhuǎn)染多個(gè)RNA分子或進(jìn)行共轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，那么選擇具有多因子轉(zhuǎn)染能力的試劑是重要的。共轉(zhuǎn)染效果：一些轉(zhuǎn)染試劑可以有效地實(shí)現(xiàn)多個(gè)RNA分子的共轉(zhuǎn)染，而另一些試劑可能在共轉(zhuǎn)染方面效果不佳。在脂質(zhì)體方法用于modRNA轉(zhuǎn)染各種類型細(xì)胞的初步研究中，MessageMax能將modGFP高效轉(zhuǎn)染入多種細(xì)胞中，并實(shí)現(xiàn)modGFP和modmCherry在MEF細(xì)胞中的共轉(zhuǎn)及核內(nèi)因子nGFP和mTBX5在MEF細(xì)胞核中的定位5。選擇適合多因子轉(zhuǎn)染的試劑：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，選擇能夠滿足多因子轉(zhuǎn)染要求的轉(zhuǎn)染試劑。例如，如果實(shí)驗(yàn)需要同時(shí)轉(zhuǎn)染多個(gè)基因或進(jìn)行基因編輯實(shí)驗(yàn)，那么選擇具有多因子轉(zhuǎn)染能力的轉(zhuǎn)染試劑可以提高實(shí)驗(yàn)效率。

雞胚成纖維（CEF）細(xì)胞、293細(xì)胞、PK細(xì)胞和MDCK細(xì)胞：在RNA干涉中，轉(zhuǎn)染試劑的用量與siRNAs的量成正相關(guān)關(guān)系，但轉(zhuǎn)染試劑對(duì)細(xì)胞有一定毒性作用。相同用量的RNAiFectTM和SuperFect兩種轉(zhuǎn)染試劑對(duì)293細(xì)胞、PK細(xì)胞和MDCK細(xì)胞的生長(zhǎng)影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于對(duì)CEF細(xì)胞的影響。兩種轉(zhuǎn)染試劑用于外源小分子轉(zhuǎn)染時(shí)，建議在293細(xì)胞、PK細(xì)胞和MDCK細(xì)胞上的用量不超過3ul。兩種轉(zhuǎn)染試劑對(duì)CEF細(xì)胞的毒性較大，不適合用于轉(zhuǎn)染111316。MEF細(xì)胞、3T3細(xì)胞、Hela細(xì)胞及MCF-7細(xì)胞：分別用RNAiMax及MessageMax將modGFP轉(zhuǎn)染入MEF細(xì)胞，流式分析發(fā)現(xiàn)MessageMax的轉(zhuǎn)染效率略高于RNAiMax，但兩者沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。但是流式分析和熒光顯微鏡觀察均表明MessageMax轉(zhuǎn)染后1周內(nèi)的蛋白翻譯表達(dá)效率更高，是更高效的modRNA轉(zhuǎn)染試劑。MessageMax能將modGFP高效轉(zhuǎn)染入3T3細(xì)胞、Hela細(xì)胞及MCF-7細(xì)胞中，并實(shí)現(xiàn)modGFP和modmCherry在MEF細(xì)胞中的共轉(zhuǎn)及核內(nèi)因子nGFP和mTBX5在MEF細(xì)胞核中的定位。陽離子聚合物是一種非病毒載體。

納米顆粒遞送藥物并發(fā)揮功能的能力在很大程度上取決于它們被細(xì)胞攝取的機(jī)制。以蒲公英湯劑體為例，研究發(fā)現(xiàn)親溶酶體物質(zhì)能***抑制蒲公英湯劑體進(jìn)入細(xì)胞；巨胞飲抑制劑細(xì)胞松弛素D和阿米洛利能***降低蒲公英湯劑體的胞內(nèi)攝入，且呈現(xiàn)劑量依賴性，敲減Rac1和PAK1也有效地抑制其進(jìn)入細(xì)胞。這些結(jié)果提示蒲公英湯劑體通過內(nèi)吞進(jìn)入A549細(xì)胞且主要由巨胞飲介導(dǎo)26。同理，RNA轉(zhuǎn)染試劑在某些情況下也可能利用巨胞飲途徑進(jìn)入細(xì)胞。電穿孔轉(zhuǎn)染中的內(nèi)吞途徑電穿孔轉(zhuǎn)染是一種用于基因遞送的技術(shù)，在研究其機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)，用冰冷介質(zhì)處理或在電穿孔轉(zhuǎn)染前使用內(nèi)吞抑制劑處理三種不同的人類細(xì)胞系（HEK293、HCT116和HT29）。結(jié)果表明，用冰冷介質(zhì)、氯丙嗪或染料木黃酮處理會(huì)***降低所有三種細(xì)胞系的電穿孔轉(zhuǎn)染效率，但阿米洛利處理對(duì)電穿孔轉(zhuǎn)染效率影響不***。對(duì)于用小干擾RNA（siRNA）處理的細(xì)胞，只有敲低網(wǎng)格蛋白重鏈（CLTC）會(huì)導(dǎo)致所有三種細(xì)胞系的電穿孔轉(zhuǎn)染效率降低。這些數(shù)據(jù)表明，網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用在電穿孔轉(zhuǎn)染中起著重要作用27。轉(zhuǎn)染是將外源核酸送入細(xì)胞的過程，其目的是使外源基因編碼的蛋白能夠在細(xì)胞中表達(dá)。Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑效率高

研究已經(jīng)確定了陽離子脂質(zhì)體（CLs）的某些特征，這些特征增強(qiáng)了它們?cè)隗w內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)核酸的能力。Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑效率高

    在鯉上皮瘤細(xì)胞中的應(yīng)用在鯉上皮瘤細(xì)胞進(jìn)行基因功能研究時(shí)，轉(zhuǎn)染試劑和DNA的劑量以及取樣時(shí)間缺乏統(tǒng)一的數(shù)據(jù)支持。選取兩種常用轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine®2000和FuGENE®HD進(jìn)行多配組轉(zhuǎn)染試驗(yàn)，在28℃，以35mm培養(yǎng)皿鋪板，16μLLipofectamine®2000和4μgDNA在轉(zhuǎn)染后48h達(dá)到比較高轉(zhuǎn)染效率(±)%；12μLFuGENE®HD和4μgDNA在轉(zhuǎn)染72h后轉(zhuǎn)染效率達(dá)到(±)%。通過構(gòu)建鯉高不飽和脂肪酸合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子過氧化物酶體增殖物***受體蛋白α（PPARα）的EGFP標(biāo)簽載體進(jìn)行驗(yàn)證，兩種轉(zhuǎn)染試劑分別獲得了約4%和約8%的轉(zhuǎn)染效率，并對(duì)下游脂肪酸去飽和酶2（fads2）基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控效應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果為后續(xù)利用鯉上皮瘤細(xì)胞進(jìn)行基因功能研究提供了數(shù)據(jù)支持5。在巨噬細(xì)胞中的應(yīng)用商業(yè)轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine已***用于核酸的細(xì)胞質(zhì)遞送和與細(xì)胞內(nèi)先天免疫傳感器進(jìn)行細(xì)胞源嚙合，以觸發(fā)I型干擾素（IFN）生產(chǎn)。然而，單獨(dú)對(duì)IIFN響應(yīng)的脂質(zhì)切積胺的影響尚未詳細(xì)研究。研究表明，Lipofectamine誘導(dǎo)在原始，I型IFN誘導(dǎo)依賴于干擾素調(diào)節(jié)因子（IRF）3和IRF7，并且部分需要達(dá)洛/白細(xì)胞介素-1受體-含有結(jié)構(gòu)域的適配器誘導(dǎo)的干擾素-β。相比之下，轉(zhuǎn)染試劑XFECT未***IIFN信令6。 Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑效率高