介紹:三羥甲基氨基甲烷(Tris)是一種有機化合物,其分子式為(HOCH2)3CNH2。Tris被廣泛應用于生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備。在生物化學實驗中常用的TAE和TBE緩沖液都需要用到Tris。拓展:Tris為弱堿,在室溫25℃下,它的pKa為8.1;根據緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。Tris堿的水溶液pH在10.5左右,一般加入鹽酸以調節(jié)pH值至所需值,即可獲得該pH值的緩沖液。但同時應注意溫度對于Tris的pKa的影響。 獲取更多氨丁三醇相關資訊,敬請關注艾偉拓!上海TRIS藥用采購
Tris緩沖能力:Tris為弱堿,在25°C下,它的pKa為8.1;根據緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。0.1mol/l的水溶液pH為10.4,一般加入鹽酸以調節(jié)pH值,即可獲得所需pH值的緩沖液。但同時應注意溫度對于Tris的pKa的影響對于Tris緩沖液,溫度每降低1°C,pH增加約0.03個單位,濃度每稀釋10倍,pH降低0.03-0.05個單位。對于精確應用,使用帶有玻璃/甘汞復合電極的經仔細校正的pH計。廣應用于生物化學和分子生物學實驗中緩沖液的制備。遼寧藥用輔料TRIS需求更多tris相關資訊,敬請關注艾偉拓!
上篇文章我們介紹了Tris緩沖劑的優(yōu)點,本篇文章我們來介紹一下Tris緩沖劑在使用中的注意事項吧!使用Tris緩沖劑的注意事項:1.Tris緩沖液的pH值受溫度影響大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃時緩沖液的pH=8.4,則37℃時的pH=7.4,所以一定要在使用溫度下進行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃。2.Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,緩沖液稀釋十倍,pH值的變化大于0.1 3.Tris在一定程度上與各種分子反應,包括RNA酶抑制劑,醛,酶,DNA以及常見金屬如Cr3+,F(xiàn)e3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系統(tǒng)中會起抑制作用,在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用;4.Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2,配制的緩沖液要注意蓋嚴密封;5.Tris緩沖液對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,需使用與Tris溶液具有兼容性的電極;6.Tris緩沖液不適用于二喹啉甲酸(BCA)測定;7.吸入,攝入,皮膚吸收Tris可造成傷害,操作時需戴好手套和護目鏡;8.作為蛋白緩沖液時,若后續(xù)工作需要質譜,則不適宜用Tris,比較好換成其他質譜儀可耐受的緩沖液。
使用Tris緩沖液時的注意事項:1.Tris緩沖液的pH值受溫度和濃度影響很大,因此在配制過程中要考慮使用環(huán)境;2.Tris在一定程度上與各種分子反應,包括RNA酶抑制劑,醛,酶,DNA以及常見金屬如Cr3+,F(xiàn)e3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,可以和重金屬一起作用,但在有些系統(tǒng)中也起抑制作用;3.易吸收空氣中的CO2,配制的緩沖液要注意蓋嚴密封;4.對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,需使用與Tris緩沖溶液具有兼容性的電極;5.Tris不適用于二喹啉甲酸(BCA)測定;6.吸入,攝入,皮膚吸收可造成傷害,操作時需戴好手套和護目鏡。除了Tris-HCl之外,Tris還有多種衍生緩沖液:TBS=Tris-HCl+NaCl+KCl,常用于清洗免疫染色的組織或WesternBlotting中的蛋白印跡膜等;TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,做WesternBlotting中常用的一種洗膜緩沖液;TE=Tris-HCl+EDTA,對DNA的堿基有保護性,常被用于DNA的穩(wěn)定和儲存;TAE=Trisbase+乙酸+EDTA,是大片段DNA短時間電泳時***使用的緩沖系統(tǒng);TBE=Trisbase+硼酸+EDTA,適用于長時間DNA電泳,對較小片段分離效果較好。知曉更多三(羥甲基)氨基甲烷相關資訊,敬請關注AVT!
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量取下列溶液,置于lL燒杯中。1MTris-HClBuffer,100ml500mMEDTA20ml。向燒杯中加入約800ml的去離子水,均勻混合。將溶液定容至1L后,高溫高壓滅菌,室溫保存就可以了。介紹:三羥甲基氨基甲烷是一種有機化合物,其分子式為(HOCH2)3CNH2。Tris被廣泛應用于生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備。在生物化學實驗中常用的TAE和TBE緩沖液都需要用到Tris。Tris緩沖液不僅被廣用作核酸和蛋白質的溶劑,還有許多重要用途。詳情請見AVT官網上海TRIS藥用采購
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