與常規(guī)PCR方法相比,數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢(shì):1、能夠***定量:常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA曲線,但是由于待檢樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線不在統(tǒng)一體系,條件上會(huì)存在差異,另外加上PCR擴(kuò)增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而數(shù)字PCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可進(jìn)行***定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴(yán)重的樣本。3、靈敏度高:數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬(wàn)個(gè) PCR反應(yīng),這些反應(yīng)可以精確地檢測(cè)很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個(gè) 反應(yīng)體系中,***降低了背景信號(hào)和***物對(duì)反應(yīng)...
數(shù)字PCR是一種核酸分子 定量技術(shù)。當(dāng)前核酸分子的定量有三種方法,光度法基于核酸分子的吸光度來(lái)定量;,Ct值就是指可以檢測(cè)到熒光值對(duì)應(yīng)的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR是***的定量技術(shù),基于單分子PCR方法來(lái)進(jìn)行計(jì)數(shù)的核酸定量,是一種 定量的方法。主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法,將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。這樣經(jīng)過(guò)PCR循環(huán)之后,有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),沒(méi)有模板的反應(yīng)器就沒(méi)有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。油包水乳化微滴技術(shù),在微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)生成十萬(wàn)個(gè)微滴,...
MicroDrop-100數(shù)字PCR系統(tǒng)具有如下優(yōu)點(diǎn): 1、JUE對(duì)定量,結(jié)果判讀不需要依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線; 2、突破局限,檢測(cè)靈敏度可低至萬(wàn)分之一; 3、專利設(shè)計(jì)的具有高精度復(fù)雜三維微納防污染結(jié)構(gòu)的微流控芯片,單張可同時(shí)處理1-8個(gè)樣本; 4、一鍵式自動(dòng)操作,20uL PCR體系可生成100,000微滴,8個(gè)樣本單次微滴生成*需2分鐘; 5、FAM、HEX(VIC)雙熒光通道,半導(dǎo)體激光器做為激發(fā)光源相比LED光源,穩(wěn)定性高,功率穩(wěn)定不影響檢測(cè)靈敏度,單色性能優(yōu)異降低對(duì)檢測(cè)特異性的影響,且方向性好; 6、檢測(cè)器為2個(gè)光電倍增管,靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CC...
與常規(guī)的PCR的方法相比,dPCR有很好的優(yōu)勢(shì)。 ***定量 常規(guī)PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR定量檢測(cè)都需要已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA制定標(biāo)準(zhǔn)曲線,由于樣品測(cè)定在各種條件上不會(huì)完全一致,會(huì)造成PCR擴(kuò)增效率的差異,從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而ddPCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可以進(jìn)行***定量。 樣品需求量低 在檢測(cè)珍貴樣品和樣品核酸存在降解時(shí)具有明顯的優(yōu)勢(shì)。 高靈敏度 ddPCR本質(zhì)上是將一個(gè)傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)分成了數(shù)萬(wàn)個(gè)**的PCR反應(yīng),在這些反應(yīng)中可以精確地檢測(cè)到很小的目的片段的差異、單拷貝甚至是低濃度混雜樣品,且能避免非同...
無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查 鐮狀細(xì)胞貧血(sickle cell anemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細(xì)有效的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測(cè)孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以**的檢測(cè)出HBB基因突變[3],可以說(shuō)是相當(dāng)厲害了。 2個(gè)光電倍增管(PMT),靈敏度及增益優(yōu)于MPC...
研究方向 甲基化含量鑒定 作為表觀遺傳學(xué)研究中重要的一個(gè)研究方向——甲基化程度分析,現(xiàn)階段有不同的方法或技術(shù)來(lái)進(jìn)行研究:如傳統(tǒng)的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測(cè)序統(tǒng)計(jì)法、抗體檢測(cè)法、定量PCR檢測(cè)法等。這些方法皆因方法學(xué)的問(wèn)題而不能獲得精確的定量,而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過(guò)對(duì)樣品的微滴化處理及目標(biāo)因子的***拷貝數(shù)定量,為甲基化程度的精確定量檢測(cè)提供了一種全新的技術(shù)。 *****的伴隨診斷 常用體液來(lái)源(如血液,胸腹水,唾液及尿液等)的待檢標(biāo)本中的DNA,有正常脫落體細(xì)胞和病變脫落細(xì)胞兩種來(lái)源,前者的量遠(yuǎn)大于后者。通過(guò)微液滴處理能在每個(gè)微液滴中有效減少正常體細(xì)胞...
MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測(cè)儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬(wàn)微滴,單次運(yùn)行生成400萬(wàn)微滴,微滴體積達(dá)皮升級(jí),檢測(cè)線性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級(jí),各項(xiàng)指標(biāo)均超越國(guó)內(nèi)外的主流產(chǎn)品。 MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬(wàn)份,打破了國(guó)外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。 樣本多樣性,樣本通量可達(dá)96個(gè)樣本,支持靈活設(shè)定。北京永諾數(shù)...
與常規(guī)的PCR的方法相比,dPCR有很好的優(yōu)勢(shì)。 ***定量 常規(guī)PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR定量檢測(cè)都需要已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA制定標(biāo)準(zhǔn)曲線,由于樣品測(cè)定在各種條件上不會(huì)完全一致,會(huì)造成PCR擴(kuò)增效率的差異,從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而ddPCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可以進(jìn)行***定量。 樣品需求量低 在檢測(cè)珍貴樣品和樣品核酸存在降解時(shí)具有明顯的優(yōu)勢(shì)。 高靈敏度 ddPCR本質(zhì)上是將一個(gè)傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)分成了數(shù)萬(wàn)個(gè)**的PCR反應(yīng),在這些反應(yīng)中可以精確地檢測(cè)到很小的目的片段的差異、單拷貝甚至是低濃度混雜樣品,且能避免非同...
數(shù)字PCR是一種核酸分子***值定量技術(shù),能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對(duì)起始樣品的***值定量。該試劑盒采用創(chuàng)新的一步法逆轉(zhuǎn)錄數(shù)字PCR技術(shù),將*****的RNA逆轉(zhuǎn)錄及數(shù)字PCR擴(kuò)增整合到一個(gè)反應(yīng)體系,單管雙檢同時(shí)測(cè)定*****的兩個(gè)**基因,消除***變異帶來(lái)的漏檢風(fēng)險(xiǎn)。 MicroDrop-100全新微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)為永諾生物旗下子公司永諾醫(yī)療自主研發(fā)的檢測(cè)設(shè)備,此系統(tǒng)檢測(cè)無(wú)需依賴標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),可達(dá)到***定量,具有超高靈敏度,檢測(cè)靈敏度高達(dá)1個(gè)拷貝,且具有較好的重復(fù)性,降低同樣本不同批次的檢測(cè)差異。數(shù)字PCR結(jié)果采取終點(diǎn)判讀法,相比熒光定量PC...
精細(xì)診斷是精細(xì)醫(yī)學(xué)的關(guān)鍵環(huán)節(jié),液體活檢作為一種無(wú)創(chuàng)、均一的檢測(cè)技術(shù),迅速成為精細(xì)診斷領(lǐng)域的新星,2015年被《麻省理工大學(xué)科技評(píng)論》評(píng)選為年度**突破技術(shù), 2017年入選世界經(jīng)濟(jì)論壇評(píng)出的全球**新興技術(shù),引發(fā)了全球科研、臨床和產(chǎn)業(yè)界的極大熱情,已在**、產(chǎn)前診斷、***移植等疾病領(lǐng)域***被應(yīng)用。 數(shù)字PCR技術(shù)與高通量的二代測(cè)序技術(shù),共同組成液體活檢領(lǐng)域的兩大利器;數(shù)字PCR技術(shù)是公認(rèn)的液體活檢領(lǐng)域靈敏度比較高的檢測(cè)方法,采用有限稀釋的方法將目標(biāo)分子分割到**的反應(yīng)體系中,在不依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線條件下實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)***定量檢測(cè),能檢測(cè)低至0.01%的突變基...
數(shù)字PCR檢測(cè)及分析原理在上世紀(jì)90年代就被提出來(lái)了,但是無(wú)奈受限于當(dāng)時(shí)的技術(shù)條件,樣本稀釋及分配都是靠手工來(lái)完成的,受到很多因素的干擾和限制;并且結(jié)果分析對(duì)于研究者來(lái)說(shuō)也十分枯燥與繁瑣,因此在很長(zhǎng)一段時(shí)間dPCR發(fā)展停滯不前。后來(lái)由于微流控技術(shù)與微納集成制造工藝的發(fā)展解決了dPCR過(guò)程中的幾個(gè)關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題,推動(dòng)了dPCR的研究與商業(yè)化的發(fā)展。 目前根據(jù)dPCR樣本稀釋分配的方式,基本可分為三大類,一種是基于大規(guī)模集成微流控芯片;第二種是使用微反應(yīng)室/孔板;第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式,其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的...
微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,單個(gè)樣本在微米級(jí)流道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在3分鐘內(nèi)生成10萬(wàn)微滴,單次運(yùn)行生成80萬(wàn)微滴,微滴體積達(dá)皮升級(jí),檢測(cè)線性范圍達(dá)到6個(gè)數(shù)量級(jí),各項(xiàng)指標(biāo)均超越國(guó)內(nèi)外主流產(chǎn)品。 在液滴生成數(shù)上,MicroDrop?能達(dá)到國(guó)外同級(jí)別產(chǎn)品的5倍。與此同時(shí),設(shè)備制作成本只有國(guó)外同類產(chǎn)品的一半。這減低了精細(xì)醫(yī)療的成本,打破了國(guó)外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。這意味著在未來(lái),采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進(jìn)行低成本、高靈敏、快速的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)成為可能。 理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應(yīng)用...
無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查 鐮狀細(xì)胞貧血(sickle cell anemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細(xì)有效的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測(cè)孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以**的檢測(cè)出HBB基因突變[3],可以說(shuō)是相當(dāng)厲害了。 支持多重?cái)?shù)字PCR,可選全中文分析軟件。南通國(guó)產(chǎn)...
與常規(guī)的PCR的方法相比,dPCR有很好的優(yōu)勢(shì)。 ***定量 常規(guī)PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR定量檢測(cè)都需要已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA制定標(biāo)準(zhǔn)曲線,由于樣品測(cè)定在各種條件上不會(huì)完全一致,會(huì)造成PCR擴(kuò)增效率的差異,從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而ddPCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可以進(jìn)行***定量。 樣品需求量低 在檢測(cè)珍貴樣品和樣品核酸存在降解時(shí)具有明顯的優(yōu)勢(shì)。 高靈敏度 ddPCR本質(zhì)上是將一個(gè)傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)分成了數(shù)萬(wàn)個(gè)**的PCR反應(yīng),在這些反應(yīng)中可以精確地檢測(cè)到很小的目的片段的差異、單拷貝甚至是低濃度混雜樣品,且能避免非同...
儀器特點(diǎn): MicroDrop-100A樣本制備儀 1、單張芯片一次可處理8個(gè)樣本; 2、20微升體系生成100,000微滴; 3、單次微滴生成*需2分鐘; 4、一鍵式自動(dòng)化操作。儀器參數(shù)樣本體積20μl容量1~8個(gè)樣本微滴總數(shù)100,000反應(yīng)時(shí)間2分鐘/芯片儀器尺寸(寬x深x高)300*400*145mm MD Detector 微滴檢測(cè)儀 1、全封閉體系,自動(dòng)化流程操作; 2、FAM、VIC雙通道熒光檢測(cè); 3、檢測(cè)靈敏度高達(dá)萬(wàn)分之一; 4、通量達(dá)96個(gè)樣品。儀器參數(shù)線性范圍6個(gè)數(shù)量級(jí)通量1~96個(gè)樣...
數(shù)字PCR通過(guò)將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬(wàn)份,分配到不同的反應(yīng)單元(微滴),包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(也就是說(shuō)我們所說(shuō)的 DNA 模板) ,這是與PCR或qPCR反應(yīng)比較大的區(qū)別,PCR或qPCR只在一個(gè)反應(yīng)體系中進(jìn)行,而數(shù)字PCR在每個(gè)反應(yīng)單元(微滴)中都會(huì)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增結(jié)束后統(tǒng)計(jì)熒光信號(hào)并分析。是不是聽起來(lái)特別高(yi)大(lian)上(meng)?舉個(gè)栗子,PCR或qPCR檢測(cè)突變像是在大海里撈一個(gè)會(huì)發(fā)光的針,周圍都是海水,很難看到針的光在哪,而dPCR就像把海水盛到好多個(gè)碗里面,瞧一眼很容易就知道哪個(gè)碗在發(fā)光了,而且,系統(tǒng)還會(huì)數(shù)出來(lái)到底有多少個(gè)碗里是發(fā)光的,多少...
微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,單個(gè)樣本在微米級(jí)流道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在3分鐘內(nèi)生成10萬(wàn)微滴,單次運(yùn)行生成80萬(wàn)微滴,微滴體積達(dá)皮升級(jí),檢測(cè)線性范圍達(dá)到6個(gè)數(shù)量級(jí),各項(xiàng)指標(biāo)均超越國(guó)內(nèi)外主流產(chǎn)品。 在液滴生成數(shù)上,MicroDrop?能達(dá)到國(guó)外同級(jí)別產(chǎn)品的5倍。與此同時(shí),設(shè)備制作成本只有國(guó)外同類產(chǎn)品的一半。這減低了精細(xì)醫(yī)療的成本,打破了國(guó)外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。這意味著在未來(lái),采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進(jìn)行低成本、高靈敏、快速的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)成為可能。 單次微滴生成*需2分鐘。寧波微流控芯片數(shù)字PCR...
數(shù)字PCR是一種核酸分子***定量技術(shù)。當(dāng)前核酸分子的定量有三種方法,光度法基于核酸分子的吸光度來(lái)定量;,Ct值就是指可以檢測(cè)到熒光值對(duì)應(yīng)的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR是***的定量技術(shù),基于單分子PCR方法來(lái)進(jìn)行計(jì)數(shù)的核酸定量,是一種***定量的方法。主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法,將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。這樣經(jīng)過(guò)PCR循環(huán)之后,有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),沒(méi)有模板的反應(yīng)器就沒(méi)有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。準(zhǔn)確度不完全依賴于擴(kuò)增效率。南京國(guó)產(chǎn)...
基因檢測(cè)**前沿的兩種方法是:高通量測(cè)序(NGS)和數(shù)字PCR (dPCR)。 高通量測(cè)序技術(shù)又稱“下一代”測(cè)序技術(shù),可以一次對(duì)幾十萬(wàn)到幾百萬(wàn)條DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定,功能強(qiáng)大,但是實(shí)驗(yàn)操作較復(fù)雜,數(shù)據(jù)分析難度較大,檢測(cè)周期長(zhǎng),成本較高。數(shù)字PCR技術(shù)是目前**精細(xì)**靈敏的基因檢測(cè)技術(shù),借助微液滴或微腔室,通過(guò)單個(gè)模板分子的PCR擴(kuò)增,可實(shí)現(xiàn)不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線和參照樣本的***定量。與NGS相比,數(shù)字PCR靈敏度高、檢測(cè)速度快、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果易讀、成本低廉等優(yōu)勢(shì)使其更適合臨床檢測(cè),成為精細(xì)醫(yī)療實(shí)現(xiàn)平民化、大眾化的比較好選擇。 ...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過(guò)程中發(fā)生了什么?;?PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺(tái)期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測(cè)) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長(zhǎng),PCR 產(chǎn)物將...
MicroDrop-100數(shù)字PCR有什么優(yōu)勢(shì)? 1.MicroDrop-100數(shù)字PCR所產(chǎn)生的微滴數(shù)是目前市面微滴式數(shù)字PCR里相對(duì)較高的產(chǎn)品,可將樣品分割為10萬(wàn)份,更符合泊松分布數(shù)學(xué)模型,可以忽略更多的誤差因素;此外,高微滴數(shù)在多重?cái)?shù)字PCR上的優(yōu)勢(shì)也會(huì)更大。 2.數(shù)字PCR可選全中文界面,對(duì)國(guó)內(nèi)用戶十分友好,可以說(shuō),拿到即可上手。 3.數(shù)字PCR是一個(gè)開放性的平臺(tái),在試劑方面除了產(chǎn)品列表上的檢測(cè)試劑盒,還有通用的反應(yīng)預(yù)混液,客戶自行設(shè)計(jì)引物探針即可進(jìn)行新項(xiàng)目的檢測(cè)。此外,永諾非常歡迎進(jìn)行定制、合作開發(fā)檢測(cè)試劑盒。 ...
MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測(cè)儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬(wàn)微滴,單次運(yùn)行生成400萬(wàn)微滴,微滴體積達(dá)皮升級(jí),檢測(cè)線性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級(jí),各項(xiàng)指標(biāo)均超越國(guó)內(nèi)外的主流產(chǎn)品。 MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬(wàn)份,打破了國(guó)外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。 全封閉體系,自動(dòng)化流程操作。無(wú)錫微滴式數(shù)字PCR報(bào)價(jià) MicroDrop-100...
數(shù)字PCR是一種核酸分子***值定量技術(shù),能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對(duì)起始樣品的***值定量。該試劑盒采用創(chuàng)新的一步法逆轉(zhuǎn)錄數(shù)字PCR技術(shù),將*****的RNA逆轉(zhuǎn)錄及數(shù)字PCR擴(kuò)增整合到一個(gè)反應(yīng)體系,單管雙檢同時(shí)測(cè)定*****的兩個(gè)**基因,消除***變異帶來(lái)的漏檢風(fēng)險(xiǎn)。 MicroDrop-100全新微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)為永諾生物旗下子公司永諾醫(yī)療自主研發(fā)的檢測(cè)設(shè)備,此系統(tǒng)檢測(cè)無(wú)需依賴標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),可達(dá)到***定量,具有超高靈敏度,檢測(cè)靈敏度高達(dá)1個(gè)拷貝,且具有較好的重復(fù)性,降低同樣本不同批次的檢測(cè)差異。數(shù)字PCR結(jié)果采取終點(diǎn)判讀法,相比熒光定量PC...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過(guò)程中發(fā)生了什么。基本 PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺(tái)期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測(cè)) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長(zhǎng),PCR 產(chǎn)物將...
MicroDrop-100數(shù)字PCR系統(tǒng)具有如下優(yōu)點(diǎn): 1、JUE對(duì)定量,結(jié)果判讀不需要依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線; 2、突破局限,檢測(cè)靈敏度可低至萬(wàn)分之一; 3、專利設(shè)計(jì)的具有高精度復(fù)雜三維微納防污染結(jié)構(gòu)的微流控芯片,單張可同時(shí)處理1-8個(gè)樣本; 4、一鍵式自動(dòng)操作,20uL PCR體系可生成100,000微滴,8個(gè)樣本單次微滴生成*需2分鐘; 5、FAM、HEX(VIC)雙熒光通道,半導(dǎo)體激光器做為激發(fā)光源相比LED光源,穩(wěn)定性高,功率穩(wěn)定不影響檢測(cè)靈敏度,單色性能優(yōu)異降低對(duì)檢測(cè)特異性的影響,且方向性好; 6、檢測(cè)器為2個(gè)光電倍增管,靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CC...
定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn): 1. 在20多年的使用和發(fā)展中,定量PCR作為一種技術(shù)平臺(tái),已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù),在工業(yè)界和分子檢測(cè)的某些應(yīng)用上,定量PCR已經(jīng)成為“金標(biāo)準(zhǔn)”?;A(chǔ)研究方面,則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)指南”。 2. 在定量PCR的各種應(yīng)用中,基因表達(dá)分析(gene expression analysis)的應(yīng)用比重約占七成,綜合各種因素來(lái)看,眼下定量PCR還是進(jìn)行基因表達(dá)研究的理想手段。 3. 上述的“各種因素”具體展開,主要包括:通量、自動(dòng)化程度、各種檢測(cè)探針與染料、檢測(cè)通道、成本和可參考...
dPCR的基本原理 目前dPCR主要有兩種形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。這樣經(jīng)過(guò)PCR循環(huán)之后,有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),沒(méi)有模板的反應(yīng)器就沒(méi)有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度??梢允褂脦追N不同的方法來(lái)分配樣品,包括微孔板,毛細(xì)管,油乳劑和帶有核酸結(jié)合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過(guò)假設(shè)分子種群遵循泊松分布來(lái)估計(jì)不同分子的數(shù)量,根據(jù)泊松分布的原理,反應(yīng)體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)可以通過(guò)公式A=-ln[(N-X)...
要了解為什么傳統(tǒng) PCR 存在限制,務(wù)必要了解 PCR 反應(yīng)過(guò)程中發(fā)生了什么?;?PCR 運(yùn)行可以分為三個(gè)階段: 指數(shù)期 每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 ** 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。 線性期(高變異性) 隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。 平臺(tái)期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測(cè)) 反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長(zhǎng),PCR 產(chǎn)物將...
研究方向 *****的實(shí)時(shí)監(jiān)控 已有數(shù)篇文章報(bào)道了使用數(shù)字PCR技術(shù)對(duì)患者***過(guò)程中的循環(huán)**DNA(ctDNA)進(jìn)行檢測(cè),實(shí)時(shí)監(jiān)控疾病進(jìn)展。在非小細(xì)胞肺*、乳腺*和腸*等多種**患者中都取得了令人鼓舞的結(jié)果。與影像學(xué)及其他常規(guī)指標(biāo)相比,ctDNA突變及豐度改變通常會(huì)提前數(shù)月出現(xiàn),這樣就可以提醒醫(yī)生及時(shí)調(diào)整***方案,使患者得到更有效的***。 隨著數(shù)字PCR熒光通道的增加和多指標(biāo)檢測(cè)的成熟,數(shù)字PCR將會(huì)進(jìn)入更多應(yīng)用領(lǐng)域,有力推動(dòng)生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)診斷、檢驗(yàn)檢疫、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的快速發(fā)展。 分辨率——低至0.1倍基因表達(dá)差異。常州廣州永諾數(shù)字PCR ...
MicroDrop-100數(shù)字PCR有什么優(yōu)勢(shì)? 1.MicroDrop-100數(shù)字PCR所產(chǎn)生的微滴數(shù)是目前市面微滴式數(shù)字PCR里相對(duì)較高的產(chǎn)品,可將樣品分割為10萬(wàn)份,更符合泊松分布數(shù)學(xué)模型,可以忽略更多的誤差因素;此外,高微滴數(shù)在多重?cái)?shù)字PCR上的優(yōu)勢(shì)也會(huì)更大。 2.數(shù)字PCR可選全中文界面,對(duì)國(guó)內(nèi)用戶十分友好,可以說(shuō),拿到即可上手。 3.數(shù)字PCR是一個(gè)開放性的平臺(tái),在試劑方面除了產(chǎn)品列表上的檢測(cè)試劑盒,還有通用的反應(yīng)預(yù)混液,客戶自行設(shè)計(jì)引物探針即可進(jìn)行新項(xiàng)目的檢測(cè)。此外,永諾非常歡迎進(jìn)行定制、合作開發(fā)檢測(cè)試劑盒。 ...