血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和生長因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用。血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。每100ml人血清含有蛋白質(zhì)6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不會凝固。有免疫,維持酸堿平衡和滲透壓的作用,血清蛋白質(zhì)亦可儲備供給機體蛋白質(zhì)不足時的應用。人和動物的血清常用以進行各種血清學試驗,幫助診斷疾病。含抗體的血清可作為預防或醫(yī)治疾病之用。胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液...
胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別?根據(jù)牛出生時間和血清采集分離方法分為:胎牛血清:胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后,發(fā)育未完全的胎牛心臟密閉穿刺后,通過一系列工藝處理較為終獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育完全這些因子會自動消失。新生牛血清:出生14小時內(nèi)未進食的新生牛,通常采用頸動脈采集血液分離得到的血清。小牛血清:出生后3天至6月齡小牛動脈分離血清。成年牛血清指的是屠宰時收集全血后分離得到血清。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝醫(yī)治中起重要作用。鎮(zhèn)江標準級血清哪家好國內(nèi)科研人員購買胎牛血清的現(xiàn)狀:難辨真假。 原因很多,一方面是國內(nèi)血清市場這幾年是愈發(fā)的混亂了,...
那么如何保障胎牛血清的品質(zhì)呢:內(nèi)有毒的,內(nèi)有毒的含量越低的血清,胎牛血清級別就越高:內(nèi)有毒的≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;10EU/ml<內(nèi)有毒的≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;內(nèi)有毒的≥ 25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清;應選取內(nèi)有毒的含量低的胎牛血清,使培養(yǎng)的細胞更健康。如果選取內(nèi)有毒的較高的血清,細胞一直泡在“毒液”里,短期內(nèi)細胞看不出太明顯的變化,但長期的話細胞會衰老得較快,從而對實驗結(jié)果造成嚴重影響。微生物:微生物包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。嚴格的生產(chǎn)工藝可以對細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。同時3次0.1um過濾可以完...
血清的主要作用:提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質(zhì)。提供和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。胎牛血清是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。蘇州不含外泌體胎牛血清哪里有賣胎牛血清參與細胞培養(yǎng)實驗為細胞生長提供必要的營養(yǎng)成分,對于研究細胞的科學人士來說...
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。胎牛血清的細菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性;支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長曲線(接種濃度)較為大增殖濃度≥2.5×106 個/ml;細胞倍增時間 ≤15h;克隆率 ≥85%。血清的保存應該注意:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。黃石不...
添加胎牛血清的時候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因為如果培養(yǎng)液有沉淀的存在,會使得其中培養(yǎng)的細胞產(chǎn)生大量的黑點,除此之外,細胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會極其不利于細胞的正常生長。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。注意解凍的方法:再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時候堅持謹慎的原則,因此在解凍血清的時候,要細心地考慮到其解凍時體積一般會增大的特點,事先為血清預留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國際通用的解方式解凍血清。血清的主要作用是提供促接觸和...
血清的保存應該注意:血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點"。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染,一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量。血清的主要作用:提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機物、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質(zhì)。蘇州優(yōu)級血清品牌因...
如何挑選適合細胞生長的血清?原代或是正常細胞株建議使用BI特級胎牛血清,對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用所用特級胎牛血清,或胚胎干細胞所用胎牛血清。由于血清有批間差異,細胞種類不同,我們建議客戶購買前可先申請試用樣品,通過篩選得到滿意的血清批號,之后根據(jù)項目需求可進行批量囤貨,以保證該項目所需血清質(zhì)量的一致性,可排除不同批號血清對于實驗帶來的影響。如何正確保存血清:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請勿超過1個月,若一次無法用完一瓶,建議將血清無菌分裝并冷凍。胎牛血清的牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。福州優(yōu)級胎牛血清可能你會覺得,你從...
很好的胎牛血清對細胞成長的作用:提供細胞生長所需的天然或天然的生長因子。提供天然的結(jié)合蛋白,能識別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和等,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白即具有上述功能,并對細胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白,具有多個鈣離子結(jié)合位點,因而能調(diào)節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。天然含有粘附蛋白等細胞外基質(zhì)成分,促進細胞的附著、鋪展。提供醫(yī)治功能。這主要通過血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結(jié)合來完成的。如金屬硫蛋白,對多種重金屬有高度親和性,并可消除細胞生長環(huán)境中的氧自由基,具有很強的抗氧化活性,可防止細胞衰老。提供酸堿度緩沖的作用,以及維持滲透壓。提供蛋白酶...
胎牛血清的主要成分:蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進細胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用)、纖維粘連素(促進細胞附著生長)等;多肽類,主要是一些促進細胞生長和分裂的生長因子,較為主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經(jīng)細胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細胞的生長和分裂也起著重要作用;類,對細胞的作用是多方面的。包括:胰島素:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細胞分裂有關;類胰島素生長因子:能與細胞表達的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用:促生長:促進細胞增殖的效應;氫化可的松:血...
血清是血液凝固后的液體部分,不含血細胞、纖維蛋白及凝集因子等,含有多種對細胞生長必需的營養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量對細胞生長必需的生長因子 [1, 2] 。 胎牛血清也含有一些小分子物質(zhì),如氨基酸、糖類、脂類及類物質(zhì)。胎牛血清應用在哺乳動物細胞培養(yǎng)中;因此,胎牛血清應用很較廣。比如,胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術藥物的質(zhì)量控制領域。相對于新生動物血清或成體動物血清來說,胚胎期動物血清有什么優(yōu)點?與其它類型血清相比,胚胎期動物血清含有更多的生長因子,及較少的gamma球蛋白含量。血清與血漿的區(qū)別:血清是由血...
胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛(通常5-8個月胎齡),之后對未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血,完成的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天內(nèi)的小牛,而且它們的發(fā)育相對于胎牛而言更加完全。國產(chǎn)血清因為原料供應等原因,通常會選8個月以上,或足月剛出生的小牛取血,把它定義為類胎牛血清。但我們知道這時血清里的生長因子已經(jīng)完全不同于胚胎發(fā)育時的生長因子。甚至于現(xiàn)在很多國產(chǎn)廠家已經(jīng)把這類血清完全歸類于胎牛血清,貼上胎牛血清的標簽,賣著胎牛價格,卻只起著新生牛的作用。市場上進口胎牛血清較多,真正好的胎...
如何挑選適合細胞生長的血清?原代或是正常細胞株建議使用BI特級胎牛血清,對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用所用特級胎牛血清,或胚胎干細胞所用胎牛血清。由于血清有批間差異,細胞種類不同,我們建議客戶購買前可先申請試用樣品,通過篩選得到滿意的血清批號,之后根據(jù)項目需求可進行批量囤貨,以保證該項目所需血清質(zhì)量的一致性,可排除不同批號血清對于實驗帶來的影響。如何正確保存血清:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請勿超過1個月,若一次無法用完一瓶,建議將血清無菌分裝并冷凍。熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化...
細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關:細胞生長過老,破碎的細胞殘?。谎遒|(zhì)量不好,反復凍融的結(jié)果;配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱秒x心、過濾的方法去除這些黑點;培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。血清的...
除了對血清進行檢測,有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量?目測法,我們可根據(jù)血清的顏色,沉淀,澄清度等進行區(qū)分。顏色:顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同,可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進口血清質(zhì)量較為好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色,較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當?shù)?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多,使用時反復凍融會增加沉淀。進口血清過濾分裝前很少反復凍融,因此成品清澈。澄清度:進口血清是由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。國產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分...
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。胎牛血清的牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿...
細胞培養(yǎng)是很多下游實驗的基礎,細胞培養(yǎng)的好壞會直接影響后續(xù)實驗的成功和穩(wěn)定,而胎牛血清作為細胞培養(yǎng)的主要試劑對實驗的重要性不言而喻!胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,故目前多數(shù)實驗人員選擇的都是胎牛血清進行動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數(shù)生長的,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。起...
為何血清會存在批間差?如何避免此影響?因為血清來源于動物,其組成成分有1000種左右,每個批號的組分和組分含量都是不固定的,因此批間差異是可能存在的。為了避免批間差異對細胞的影響,XP建議先進行批號測試,篩選合適的批號,備好庫存(血清未開封時,在-20℃下可保存5年)。如需更換血清批次或產(chǎn)地,建議先試用后再大量訂購。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何預防和處理沉淀?血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘連蛋白,磷酸鈣[1](顯微鏡下小黑點沉淀),膽固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復凍融,長期儲存于2-8℃或者室溫。預防措施與建議...
較為低血清試驗的要求。內(nèi)有毒的檢測:內(nèi)有毒的,又叫脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),存在于革蘭氏陰性菌的細胞外膜。臨床上,內(nèi)有毒的作為一些革蘭氏陰性菌的診斷提示,如腦膜炎球菌。動物體內(nèi),內(nèi)有毒的能夠?qū)е掳l(fā)熱或者誘導炎癥反應;細胞培養(yǎng)中,內(nèi)有毒的能夠誘導細胞反應異常。通常,采用鱟阿米巴樣細胞裂解實驗(LAL檢測)檢測內(nèi)有毒的水平。LAL是從美洲鱟的血液中制備的,對內(nèi)有毒的非常靈敏,在微量內(nèi)有毒的存在情況下就凝結(jié)。阿米巴樣細胞相當于哺乳動物的白細胞。特異性血清及其加工方式,熱鈍化:胎牛血清的常規(guī)處理方式是熱鈍化,即放在56°水浴30分鐘;其目的是使血清中的補體成分及一些未知的細胞生長抑制分子失活...
胎牛血清的合規(guī)血源產(chǎn)地對于細微差異即可決定成敗的細胞培養(yǎng)技術來說,選擇來源安全、品質(zhì)優(yōu)良的胎牛血清至關重要。作為牛肉制品的副產(chǎn)品,胎牛血清的傳統(tǒng)產(chǎn)地包括澳大利亞,新西蘭, 美國, 南美(烏拉圭&巴西)以及歐洲等畜牧業(yè)發(fā)達的區(qū)域。業(yè)內(nèi)通常會根據(jù)不同產(chǎn)地的牛情況,將胎牛血清分為特級胎牛血清以及很好胎牛血清。例如新西蘭全境、澳大利亞及北美的部分區(qū)域從未爆發(fā)過瘋牛?。˙SE)和口蹄疫(FMD),因此這些產(chǎn)地的胎牛血清被定義為特級胎牛血清;而南美的胎牛血清則被定義為很好胎牛血清。另外,中國國產(chǎn)的胎牛血清在市場上并不多見,這一方面是由于是養(yǎng)殖模式的差異導致的,另一方面也受到過度使用的影響。含抗體的血清可作...
很好的胎牛血清:微生物,包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過0.1μm過濾,大多也能消除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底消除,但對血清質(zhì)量影響不大。病原毒,特別是BVDV,在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進口胎牛血清相對國產(chǎn)血清而言,檢出率不高。每100ml人血清含有蛋白質(zhì)6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。湖州去外泌體血清哪家好未經(jīng)檢疫的胎牛血清可能攜帶傳染性物質(zhì),一旦流入境內(nèi),將會對人民**...
添加胎牛血清的時候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因為如果培養(yǎng)液有沉淀的存在,會使得其中培養(yǎng)的細胞產(chǎn)生大量的黑點,除此之外,細胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會極其不利于細胞的正常生長。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。注意解凍的方法:再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時候堅持謹慎的原則,因此在解凍血清的時候,要細心地考慮到其解凍時體積一般會增大的特點,事先為血清預留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國際通用的解方式解凍血清。血清提供促接觸和伸展因子使細...
很好的胎牛血清對細胞成長的作用:提供細胞生長所需的天然或天然的生長因子。提供天然的結(jié)合蛋白,能識別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和等,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白即具有上述功能,并對細胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白,具有多個鈣離子結(jié)合位點,因而能調(diào)節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。天然含有粘附蛋白等細胞外基質(zhì)成分,促進細胞的附著、鋪展。提供醫(yī)治功能。這主要通過血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結(jié)合來完成的。如金屬硫蛋白,對多種重金屬有高度親和性,并可消除細胞生長環(huán)境中的氧自由基,具有很強的抗氧化活性,可防止細胞衰老。提供酸堿度緩沖的作用,以及維持滲透壓。提供蛋白酶...
胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血;新生牛血清:出生12-24小時新生牛靜脈;又可細分為:a.高級新生牛血清:后靜置自然析出的血清;b.標準新生牛血清:c.經(jīng)離心分離的血清;d.普通新生牛血清:融血或微融血的血清;小牛血清:出生三月齡小牛動脈分離血清;血清是血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題。胎牛...
血清為何要熱滅活,有必要對所有血清都滅活嗎?如何正確的進行滅活?加熱可以滅活補體系統(tǒng)。啟動的補體系統(tǒng)參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學研究中,培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅清。實驗顯示,熱滅清對大多數(shù)的細胞而言是不需要的,對于非必須的細胞來說血清滅活對于細胞生長只有微小甚至無任何作用,還可能造成生長速率降低,沉淀物還會明顯增多,不利于細胞觀察。因此,若非必須,不需要對血清進行滅活處理。將需要進行處理的血清置于56℃水浴30min,建議加放空白對照(同體積水)使用溫度計測溫,以測得溫度為56℃時為計時起始點,加熱中可不...
細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關:細胞生長過老,破碎的細胞殘?。谎遒|(zhì)量不好,反復凍融的結(jié)果;配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱秒x心、過濾的方法去除這些黑點;培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。血清中...
血清的保存應該注意:血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點"。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染,一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量。血清提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。金華不含外泌體血清哪里有細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?一...
為何血清會存在批間差?如何避免此影響?因為血清來源于動物,其組成成分有1000種左右,每個批號的組分和組分含量都是不固定的,因此批間差異是可能存在的。為了避免批間差異對細胞的影響,XP建議先進行批號測試,篩選合適的批號,備好庫存(血清未開封時,在-20℃下可保存5年)。如需更換血清批次或產(chǎn)地,建議先試用后再大量訂購。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何預防和處理沉淀?血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘連蛋白,磷酸鈣[1](顯微鏡下小黑點沉淀),膽固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復凍融,長期儲存于2-8℃或者室溫。預防措施與建議...
對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題。主要是:血清的成份可能有幾百種之多,對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難;血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續(xù)性受到限制;不能排除血清中含有易變物質(zhì),這被認為是“瓶中惡化”的原因之一。血清的主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白。宿遷OriCell血清價格如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成...
小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項?來源不同:胎牛血清 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清采自出生10至14 天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ,應先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放...