羅丹明123一種可對(duì)活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。羅丹明123可透過細(xì)胞膜且在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集,并發(fā)出黃綠色熒光。羅丹明123***用作檢測(cè)線粒體膜電位,也常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與羅丹明123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性,此熒光染料被應(yīng)用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ATP。羅丹明123的比較大激發(fā)波長(zhǎng)為507nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)為525nm。在熒光顯微鏡下觀察,呈現(xiàn)黃綠色熒光。 一:工作液配制用緩沖液或者預(yù)熱的培養(yǎng)液直接稀釋儲(chǔ)存液到需要的工作液濃度(1~20μM),充分混勻。具體的工作液濃度使用者要根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行調(diào)整?!咀⒁狻浚簩?duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn),要控制好總體稀釋倍數(shù),DMSO在...
D-熒光素是熒光素酶 (Luc) 的天然底物,可催化螢火蟲產(chǎn)生典型的黃綠色光。該反應(yīng)的 560 nm 化學(xué)發(fā)光在幾秒鐘內(nèi)達(dá)到峰值,當(dāng)?shù)孜餆晒馑剡^量時(shí),光輸出與熒光素酶濃度成正比。熒光素酶 (luc) 基因是用于研究和藥物篩選的流行報(bào)告基因?;瘜W(xué)發(fā)光技術(shù)幾乎沒有背景,使得 luc 報(bào)告基因成為檢測(cè)低水平基因表達(dá)的理想選擇。標(biāo)準(zhǔn)閃爍計(jì)數(shù)器可以可靠地測(cè)量低至 0.02 pg 的熒光素酶。除了作為基因表達(dá)報(bào)告者的作用外,熒光素酶還常用于極其靈敏的 ATP 檢測(cè)中[1]。我們提供螢火蟲熒光素酶 (HY-P1004)、熒光素游離酸 (HY-12591A) 及其水溶性鈉鹽 (HY-12591) 和鉀鹽 (H...
羅丹明屬于呫噸族。與市場(chǎng)上的許多其他染料相比,羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們?cè)诰酆衔锛{米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測(cè)、活細(xì)胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作:分子開關(guān),病毒表面修飾,化學(xué)傳感器,硫醇。不同類型的染料通過它們各自的取代基(R1、R2、R3、R4和G)來區(qū)分。由于它們的差異,這些熒光染料在溶液中也表現(xiàn)出不同的光物理特性(例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值)。氨基被剛性化的羅丹明染料無論溫度范圍如何都表現(xiàn)出高量子產(chǎn)率,而在每個(gè)氮處具有兩個(gè)烷基取代基的那些表現(xiàn)出活化的內(nèi)...
南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料 多肽、蛋白、抗體標(biāo)記:5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像:脂溶性熒光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY...
熒光染料在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中具有廣泛的應(yīng)用1、細(xì)胞膜標(biāo)記:可以使用熒光染料標(biāo)記細(xì)胞膜,以觀察和研究細(xì)胞膜的動(dòng)態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。2、染色體和DNA標(biāo)記:用熒光染料標(biāo)記染色體或DNA,可以觀察和分析DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、修復(fù)等過程3、蛋白質(zhì)標(biāo)記:通過熒光染料標(biāo)記蛋白質(zhì),可以研究蛋白質(zhì)的相互作用、定位和運(yùn)動(dòng)等特性。4、細(xì)胞器標(biāo)記:使用特定波長(zhǎng)的熒光染料可以標(biāo)記和可視化細(xì)胞中的線粒體、溶酶體等細(xì)胞器。5、神經(jīng)科學(xué)應(yīng)用:熒光染料在神經(jīng)科學(xué)中也有廣泛應(yīng)用,如標(biāo)記神經(jīng)元和突觸,觀察神經(jīng)信號(hào)的傳遞等。6、基因表達(dá)分析:通過熒光染料標(biāo)記基因表達(dá)產(chǎn)物,可以定量分析基因的表達(dá)水平和細(xì)胞中的分布情況。Super Flour 系列熒光...
染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族,用于標(biāo)記細(xì)胞膜和疏水性組織。這是一類環(huán)境敏感型熒光染料,當(dāng)它們與膜結(jié)合或者與親脂性生物分子(例如蛋白質(zhì),雖然在水中其熒光強(qiáng)度很弱)結(jié)合時(shí),其熒光強(qiáng)度***增強(qiáng)。它們具有很高的淬滅系數(shù),偏光依賴性和很短的激發(fā)壽命。一旦應(yīng)用于細(xì)胞中,這種染料會(huì)在細(xì)胞內(nèi)質(zhì)膜中逐步擴(kuò)散,導(dǎo)致在其比較好濃度條件下,將整個(gè)細(xì)胞染色。它們不同的熒光顏色:DiI(橙色熒光)、DiO(綠色熒光)、DiD(紅色熒光)、DiR(深紅色熒光),為活細(xì)胞多色彩熒光成像分析和流式細(xì)胞術(shù)提供了一種便捷的工具。DiO和DiI可以分別與標(biāo)準(zhǔn)的FITC和TRITC濾光器一同使用...
第二種***使用的DNA染色方法是Hoechst染料,**初由化學(xué)公司HoechstAG生產(chǎn)。Hoechst33258、Hoechst33342和Hoechst34580都是鄰苯二甲酰亞胺,具有向A-T富集區(qū)插入的趨勢(shì),因此后者不常使用。與DAPI相似,此類染料受到紫外線激發(fā)并在455nm下發(fā)射比較大值,在無結(jié)合狀態(tài)下變?yōu)?10–540nm。Hoechst染料還具有細(xì)胞滲透作用,因此可用于固定細(xì)胞和活細(xì)胞。與DAPI不同是,Hoechst染料毒性更低。DNA染色劑碘化丙啶無法透過細(xì)胞膜。在細(xì)胞培養(yǎng)中,因?yàn)樵撊旧珓o法進(jìn)入完好的細(xì)胞內(nèi),所以常常被用來區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。碘化丙啶也是一種結(jié)合劑,但...
3.粘壁細(xì)胞的染色(1)使粘壁的細(xì)胞在無菌實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。(2)從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。(3)在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。(4)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞2~20分鐘,不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同。(5)吸干染料工作液,用培養(yǎng)液洗蓋玻片2~3次,每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞,培養(yǎng)5~10分鐘,然后吸干培養(yǎng)基。 4.顯微鏡檢測(cè)(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。(2)多色染料的同時(shí)檢測(cè),濾光器按照以下設(shè)定:a)DiI和DiO=OmegaXF52,Chroma51004;b)DiI和D...
Hoechst33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。用于細(xì)胞核染色時(shí),推薦的Hoechst33258工作濃度為0.5-10μg/ml。儲(chǔ)存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。注意事項(xiàng):Hoechst33258對(duì)人體有害,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。抗熒光淬滅封片液(P0126)可以向碧云天訂購(gòu)。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作注意事項(xiàng):Hoechst33342對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。為減緩熒光淬滅可以使...
其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)常用染料生物染料在細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組分鑒定中有著廣泛的應(yīng)用,除細(xì)胞膜研究外,我們經(jīng)常也會(huì)對(duì)一些其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)及成分進(jìn)行探索,例如線粒體、溶酶體、蛋白質(zhì)、細(xì)胞核等,而對(duì)于不同的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有不同的染料進(jìn)行染色細(xì)胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于細(xì)胞核染色,可將細(xì)胞核染成藍(lán)色。鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是細(xì)胞骨架的染色神器,羅丹明標(biāo)記的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可將細(xì)胞染成橙紅色,DAPI與Phalloidin染色液是研究細(xì)胞形態(tài)變化時(shí)經(jīng)常用到的兩種共染的試劑,染色效果可見A1-E1用TRIT...
Hoechst33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。用于細(xì)胞核染色時(shí),推薦的Hoechst33258工作濃度為0.5-10μg/ml。儲(chǔ)存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。注意事項(xiàng):Hoechst33258對(duì)人體有害,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。抗熒光淬滅封片液(P0126)可以向碧云天訂購(gòu)。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作注意事項(xiàng):Hoechst33342對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。為減緩熒光淬滅可以使...
一、體外生物發(fā)光試驗(yàn)熒光素試劑的制備:D-熒光素,鉀鹽,無菌純水,完全培養(yǎng)基(自行配置)1、用無菌水制備100X熒光素原液(15mg/ml),輕輕顛倒搖動(dòng)至熒光素完全溶解。混勻后立即使用或分裝后-20℃凍存。2、將D-luciferin,potassiumsalt溶解于預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基中制備成濃度為150μg/ml的工作液。用組織培養(yǎng)基1∶100稀釋儲(chǔ)存液,配置工作液(終濃度150μg/mL)3、去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基圖像分析前,向細(xì)胞培養(yǎng)板中添加1×熒光素工作液,然后進(jìn)行圖像分析-注射器濾膜過濾除菌,0.2μm注:成像前在37℃下對(duì)細(xì)胞進(jìn)行短時(shí)間孵育可增強(qiáng)信號(hào)。異硫氰酸熒光素含有一個(gè)異硫氰酸...
羅丹明屬于呫噸族。與市場(chǎng)上的許多其他染料相比,羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們?cè)诰酆衔锛{米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測(cè)、活細(xì)胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作:分子開關(guān),病毒表面修飾,化學(xué)傳感器,硫醇。不同類型的染料通過它們各自的取代基(R1、R2、R3、R4和G)來區(qū)分。由于它們的差異,這些熒光染料在溶液中也表現(xiàn)出不同的光物理特性(例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值)。氨基被剛性化的羅丹明染料無論溫度范圍如何都表現(xiàn)出高量子產(chǎn)率,而在每個(gè)氮處具有兩個(gè)烷基取代基的那些表現(xiàn)出活化的內(nèi)...
一:染色液制備1、配制儲(chǔ)液:儲(chǔ)液用無水DMSO或無水EtOH配制,濃度1~5mM。注:未使用的儲(chǔ)液建議分裝后儲(chǔ)存在-20℃,避免反復(fù)凍融。2、工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲(chǔ)液,配制濃度為1~5μM的工作液。注:工作液**終濃度建議根據(jù)不同細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)體系來優(yōu)化。建議從推薦濃度的10倍范圍內(nèi)開始比較好濃度的摸索。二:懸浮細(xì)胞染色1、加入適當(dāng)體積的染色工作液重懸細(xì)胞,使其密度為1×106/mL。2、37℃孵育細(xì)胞2~20min,不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同??梢?0min作為起始孵育時(shí)間,之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記效果。3、孵育結(jié)束,1000~1500rp...